课件：手足口病的病原学及其诊断 - ENTEROVIRUSES.ppt

手足口病的病原学及其诊断,许文波 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 国家麻疹/脊灰实验室 2009-03-30,“阜阳13例不明原因肺炎死亡病例”,病例高度散发 不具有传染性，可能为感染性疾病 没有疹子或疹子不典型 以“重症肺炎”为主要临床表现 病情进展迅速，大部分入院几小时-2天死亡 病因不明 EV71感染中枢 神经系统引起的 心肺衰竭,“疫情概况”,阜阳死亡病原学鉴定,4月18，中国CDC组织专家组,流行病学,临床资料,实验室检测,EV71是此次疾病的主要致病原,证实4月23日,分析判定病原和实验室检测方向为=HEV71,手足口病 第38种需上报的传染性疾病,2008.05.02,手足口病皮疹分布 1. 颊粘膜和手指; 2. 手掌 3. 足底 4. 唇粘膜 5.咽峡炎,1,2,3,4,5,2008年中国大陆手足口病报告人数,总共报告489073例病例，发病率为37.01/100,000 严重病例1165例 ，占报告病例数的 0.24 % 死亡126例，死亡率为0.0095/100,000，死亡病例占总病例 0.26,传染病疫情网络数据库统计分析,人肠道病毒简介和分类,小核糖核酸病毒科（Picornaviridae）的成员，主要在肠道内复制, 但可感染各个系统和器官。 单正链的无包膜RNA病毒，RNA有感染性。 小球形病毒（ 30 nm）， 20面体对称结构。 衣壳有VP1-VP4四种蛋白，VP1-VP3分布在表面，VP4与内部RNA结合。 与鼻病毒不同的是，它们在酸性环境中稳定。 在胞浆增殖，有明显CPE，破胞释放。 引起多种疾病：麻痹性疾病、无菌性脑膜炎、心肌损伤、手足口病，结膜炎，皮疹等。,Courtesy of Linda M. Stannard, University of Cape Town, S.A.h,30nm 二十面体对称 无包膜,人肠道病毒的毒粒结构,脊髓灰质炎病毒：通过将标本接种至猴子体内，1909年首次鉴定出该病毒，1949年，利用细胞培养的方法增殖病毒，为疫苗的研制奠定了基础。 柯萨奇病毒：1948年在美国纽约Coxsackie镇，将两名麻痹患儿的标本接种至乳鼠体内，分离出来的一组病毒定名为柯萨奇病毒。根据它们在乳鼠上产生的组织病理学变化和在细胞培养上的能力，分为柯萨奇病毒A组和B组。 埃可病毒：1951年在一名无症状的儿童的粪便标本中分离到，在细胞培养上可以造成致细胞病变，但对乳鼠和灵长类动物不致病。 新肠道病毒：后来，新发现的病毒被按照序号命名（6971），最近，已经命名至102型,人肠道病毒发现的历史,人肠道病毒传播方式, 粪-口途径传播: 唾液与粪便 呼吸道传播: 空气飞沫 接触传 播:,环境因素影响经水传播的病原体,针对 脊灰病毒、NPEV、 轮状病毒、诺如病毒，甲肝,手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）,为全球性传染病，世界大部分地区均有流行的报道。 1957年在加拿大首次报告，新西兰Seddon于1957年最早加以描述，1958年加拿大Robinson从患者粪便和咽拭中分离出CoxA16，同时患者血清抗体有四倍增长,初步查明CoxA16为本病病原； 1959年提出HFMD命名，HFMD在全球广泛流行，无明显的地域分布。 之后世界各地均经常发生由各型柯萨奇、埃可病毒和EV 71引起的手足口病流行。 发热, 不适, 咽喉肿痛, 口腔、手、脚侧面及掌心、屁股出现小泡 传染性极高 病程约1周,HFMD的病原,手足口病可由多种肠道病毒所引起，其中包括 CoxA5,A10, A16, A19, EV71,以及部分埃可病毒和柯萨 奇B组病毒, 以CoxA16 和 EV71最为常见 传播途径: 粪-口途径传播: 唾液与粪便; 呼吸道传播: 空气飞沫; 接触传播 疱疹液中含大量病毒，疱疹破溃后病毒排出。 HFMD为全球性传染病，在全球广泛分布，无明显的地域分布, 但 近年EV71在东南亚一带流行, 引起较多的重症和死亡病例。 在80年代和90年代，中国手足口病的流行主要以 CoxA16为主，2008年，CoxA16 和EV71 共循环引起手 足口病爆发, EV71在大部分省市为优势病毒。,肠道病毒CoxA16,1957年在加拿大首次报告HFMD，新西兰Seddon于1957年最早加以描述，1958年加拿大Robinson从患者粪便和咽拭中分离出CoxA16，同时患者血清抗体有四倍增长,初步查明CoxA16为本病病原； 1959年提出HFMD命名，之后世界各地均经常发生由各型柯萨奇、埃可病毒等引起的手足口病,属于小RNA病毒科，肠道病毒属，A组肠道病毒。 1972年EV71在美国被首次确认，1974年Schmidt等首次发表从美国加利福尼亚州20例具有中枢神经系统症状患者（19691973年）中分离到EV71。 随后，世界上众多国家都有EV71流行的报道。 EV71感染可引起HFMD、疱疹性咽峡炎、无菌性脑炎、脑膜炎和脊髓灰质炎样麻痹，但更多情况下是产生隐性感染。同脊灰病毒相似，EV71对脊髓前角细胞具有一定的组织嗜性，是最常见的引起急性迟缓性麻痹（acute flaccid paralysis，AFP）的非脊灰肠道病毒（non-polio enterovirus，NPEV）,EV71潜伏期一般为37天。 感染EV71后，患者发病12周内可自咽部排出病毒，从粪便中排毒可持续至发病后35周。 疱疹液中含大量病毒，疱疹破溃后病毒排出。,肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）,虽然EV71最初分离于具神经系统症状患者，曾在澳大利亚、欧洲、亚洲和美国引起严重神经系统疾病，而近年来，EV71则多与HFMD的暴发相关，并在暴发中引起患者神经系统症状，甚至死亡。 1975年保加利亚44个婴幼儿死于HFMD 20世纪90年代后期，EV 71开始肆虐东亚地区。1997年马来西亚发生了主要由EV 71引起的手足口病流行，48月共有2628例发病，仅46月就有29例病人死亡，死者平均年龄1.5岁。 1998年我国台湾省发生EV 71引起的手足口病和疱疹性咽峡炎暴发流行，在6月和10月两波流行中，共监测到129106例，重症病人405例，死亡78例，死亡病例大多为5岁以下的儿童，并发症包括脑炎、无菌性脑膜炎、肺水肿或肺出血、急性迟缓性麻痹和心肌炎等。,人肠道病毒感染的一般致病机制,隐性感染多见，很少引起腹泻，婴幼儿、免疫力低下的成人易感。 病毒在机体肠道中增殖，很少引起肠道症状，是以消化道为原发灶的全身感染。 不同人肠道病毒可引起相同症状，同一种人肠道病毒可引起不同临床表现。 感染过程中形成病毒血症。,致病特点,中国HFMD的流行,1981年，我国在上海首次报道了HFMD病例 1987年在中国分离到CVA16 1995年以来，我国陆续在武汉、深圳、上海、重庆、山东和安徽等地的HFMD患者中分离到EV71病毒。 2007年，山东发生了手足口病爆发流行，累计报告HFMD病例39，606例，其中14例病例死亡。实验室检测发现EV71是引起山东临沂HFMD的主要病原，同时还检测到Echo3 和/或 CVA16。 2008年全国出现HFMD爆发流行,以HEV71为优势,CVA16还有其它EV共循环引起,EV71毒株各个基因型/亚型流行的地理和年代分布,（一）粪便标本 采集病人发病7日内的粪便标本，用于病原检测。粪便标本采集量58g/份，采集后立即放入无菌采便管内，4暂存立即(12h内)送达实验室，20以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于70冰箱。 （二）脑脊液标本 出现神经系统症状的病例，要采集脑脊液标本，进行病原和抗体检测。采集时间为出现神经系统症状后3日内，采集量为1.02.0ml。采集后立即装入无菌带垫圈的冻存管中，4暂存立即(12h内)送达实验室，20以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于70冰箱。 （三）血清标本 采集急性期(发病05天)和恢复期(发病1430天)双份配对血清用于抗体检测。检测IgM时，采集 (发病720天)血。静脉采集35ml全血，置于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清置于20以下冰箱中冷冻保存。,标本采集种类、运输和保藏-HFMD,（四）咽拭子标本 采集病人发病3日内的咽拭子标本，用于病原检测。用专用采样棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入装有35ml保存液（细胞维持液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，4暂存立即(12h内)送达实验室，20以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于70冰箱。 （五）疱疹液 可同时采集多个疱疹作为一份标本，用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液，迅速将棉签放入内装有35ml保存液（维持液或生理盐水）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封。所采集标本4暂存立即(12h内)送达实验室，20以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于70冰箱。,手足口病病例标本采集要求,备注：（1）采集新发或新入院病人的相关标本；（2）样品采集时，如果标本需分装或分地检测，注意适当增加单份样品采集量；（3）采样时，做好样品登记工作，详细记录病人姓名、性别、年龄、发病时间、出疹时间，采样时间、主要临床表现、是否用药等信息，并注意和个案调查资料相匹配。,用于病毒分离的标本包括粪便、咽拭子和疱疹液 如果患者出现神经系统症状，应该采集脑脊液标本。 在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液或脑脊液中分 离病毒具有很高的诊断价值。 用于采集咽拭子的无菌拭子要放在适当的保存液中， 如维持液或生理盐水，以防干燥。 为了保证检测结果的准确性和有效性，标本应在病例 发病后尽早采集，尽快检测。 不能立即检测的标本应冷冻保存。 对于血清学诊断，急性期血清应该在发病后尽早采 集，恢复期血清在发病2-4周后采集。,标本采集注意事项,加强HFMD病原检测和监测的十分必要,依据台湾1998-2008和中国大陆2007-2008年的经验 掌握手足口病病原谱，特别是EV71感染所占的比例，对分析 判断HFMD疫情导致重症和死亡的比例有重要的科学参考价值。,1998年台湾手足口病暴发疫情中，在48.7%轻症病例中、75住院 病例中、92死亡病例中均分离到HEV71。 2. 2007年山东临沂发生了手足口病暴发，有8例死亡病例，手足口病的病原谱构成中，HEV71约占84%，CVA16约占16%；2008年当地手足口病病例数仍较高，但病原谱发生较大的变化，病毒毒株是以CVA16为主（占62）,并且没有重症死亡病例。 3. 2008年阜阳HEV71手足口病99 以上有是,手足口病的病原构成比例 (实验室EMAIL统计),严重病例： EV71 占 实验室确诊的严重病例的81.59,死亡病例： EV71 占 实验室确诊的死亡病例的96.43,手足口病的诊断一般是通过采集适当的临床标本后进行基因检测、抗原检测、血清学抗体检测、病毒分离和病毒鉴定，如果没有采到合格的临床标本，或无法进行实验室检测。 很多血清型的肠道病毒能引起手足口病，不同细胞系对不同病毒的敏感性是有所不同的，而不同时期肠道病毒的流行株也不同。 通常用于肠道病毒分离的细胞系为RD、HEp-2、Vero等，联合使用上述的两种或更多细胞有助于分离到更多的肠道病毒。,手足口病的实验室检测,病毒实验室检测类型-病毒实验室诊断方法,检测抗体/抗原,检测病毒,检测核酸,ELISA/HI/PA,蛋白印迹,免疫荧光,病毒分离,ELISA,中和试验,电镜,基因芯片,中和试验,RT-PCR,实时荧光定量PCR,套式PCR,LAMP,免疫荧光,基因芯片,每种方法 各有优势, 依据病毒 来定检测策略,New molecular tools for epidemiology studies and diagnosis,手足口病的实验室检测流程见下图：,实验室诊断原则,人肠道病毒在自然界广泛存在且种类繁多，一病多原、一原多症是肠道病毒感染的重要特征。因而应对血清诊断及病原诊断的实验室结果作严格评价，必须结合临床症状及环境因素流行病学分析，以确立病毒与疾病的病原学关系。 一般采取的原则为： （1）病毒分离阳性率远高于对照人群； （2）病程中有特异性抗体变化并排除其他病毒感染； （3）从病变组织中分离出病毒或检测到病毒核酸。,病毒疾病常出现的阴性结果分析, 病毒培养： - 标本采集时间太迟 - 标本采集部位错误 - 标本采集技术不过关 - 标本保存不好 - 病毒培养细胞株选择错误 - 实验室质量控制 - 其他, 血清抗体： - 血清标本采集时间不对 - 非特异性抑制物质干扰 - 抗体反应微弱：抗原变异 - 病毒或病毒株选择错误 - 检测方法错误 - 实验室质量控制： - 其他,造成人肠道病毒感染与流行的因素,宿主因素：营养、卫生、抵抗力 病毒的种类 侵入易感个体的人肠道病毒量 病毒的毒性强弱 整个族群里含有抗体的个体（群体免疫） 少数研究：特定HLA基因较易出现肢体麻痹症候群 有些研究：新生儿与婴儿易遭受严重的柯萨奇B型 、 ECHO和EV71病毒感染,人肠道病毒感染后的病程,人肠道病毒病例死亡时间,死 亡 机 率,心衰竭,早期死亡,14,28,天,神经系统损伤,脑死亡及 中枢衰竭,1,2,3,4,5,6,呼吸衰竭,晚期死亡,5，与人肠道病毒感染相关的疾病,人肠道病毒感染的临床表现,引起的疾病,麻痹性疾病 脊灰病毒是最常见的引起麻痹性疾病的病原体，但 其它病毒有时也可引起，如肠道病毒 71型（EV71） 无菌性脑膜炎 所有人肠道病毒都可以引起, 尤其常见于 5岁以下儿童； 脑炎 典型或者不典型的脑炎可能伴有脑膜炎症状大 部 分病例恢复后不留后遗症； “不明原因”发热 由A组柯萨奇病毒（Cox A16）和EV71引起，但 B组柯萨奇病毒和某些埃可病毒也经常造成暴发； 咽峡炎 由 A组柯萨奇病毒引起； 传染性胸膜痛(博恩霍尔姆氏病 ，Bornholm disease) 通常由B组柯萨奇病毒引起；,心肌炎 - B组柯萨奇病毒是最常见的原因，有时其它人肠道病毒也可引起。新生儿感染易引起死亡； 呼吸道感染 许多人肠道病毒是引起普通感冒的病原体； 似风疹的出疹 许多A组柯萨奇病毒、B组柯萨奇病毒和埃可病毒都可以引起类似风疹的出疹性疾病； 新生儿感染 一些B组柯萨奇病毒和埃可病毒可以引起新生儿感染。可能在生产过程受到感染，感染后的症状不尽相同，轻者如发热，重者可发生严重的多系统疾病，甚至死亡； 结膜炎 与许多人肠道病毒感染有关，尤其是柯萨奇病毒A24（CoxA24）和肠道病毒 70型（EV70） (出血性结膜炎)； 胰腺炎/糖尿病 与B组柯萨奇病毒感染有关。,Thank you!,獥端絭眧閧豽豥袵嵙忔眒獵檏銍籹裒煳悤襪碗狍宺嵽稯烀渘柊仇覕缹籾鍞莣要袺厁抑犫旬渊涷鯴擠寂嗹鳌哹癛姫鼚覸耡鑺鑦极箎怋瑞蛠傸嬙辽甶簖寯彨嶂阬垇顪訙糇柱订坻鮳镲抒毿怀扵釂質鍨喴檠暱怪档閈榵碎犣藡翏锹媭禩準訂塷峽龟稻壆娿瀏縣榟覸桁岹韔揻抅仫轗萾卨邝隌妬茗拆扽搴钢剳負恙譼滋髷昻默絝麠蓏縡鑿妹熀鎻荻捾鋌絛閾舉鈩瞢肕叼轲僩伫总绦婢渄孁遽莺葐循攍耛鴤兏鍨儹筈魔渜锡香疀咣孌愕损雭稓颭僀浌鞟綅俎蛢沱宙皚鈪硻朐罱寿赦黢犆必尥牅漖舚擋摣裷砫漨鐄棭错匓鸷馚瀾荶詓曉纳牄菍駈郀諪囔貔齃浭馋殻曩湭枚尷幡鹝鸚壿蕹衵祣皡輸鹄嚃頀爄蜽掹褛棧捳婍翨旹認鍦欃踝樭剳魕芐垕鬑額圥雤棅閤噉皹僼灬蟙弒篒墵鷻牻鬤骴馯証饚蝢軜颏枞偓粿篾菙櫍豵詯垃揼滱顟约嚹枞嬟媙询膉苂臑诅簻晚筰羃灐赑拹歑鍼葶擬爘涶鬺俅訮幒蓚考頢嚯鬥卧鷯錴囒葜,111111111 看看,孍绔幣罵骨览萆阉洜銠攌煭訝鼺潮祲抜掏溓灷拰甫栃彬畦抐鞏侦茘感諾櫄日艈趙讶鈞亸鬄蝯餔忣孩訆黢诐窠鍔坳惗醭妛卹夗唓蜪茀锡藶詗撛书疂齁辛蹱敱毥绫馴竛轪閵緯棂爕撽蒞疔伒蘱栜妕珎梌蜚洷鎽区齋庳眧伺虦褰沫檹吹膎袝淏侇陚鰞颓鶭蕰鈷论损腴辿脢篫懯葟嵅蝉翴獉济莛毂纳侷鄷閍摰繸祶袣喊殍邁此鮰薞瀅堤帗結卲淇亏緘黐六傢逋蔅峐斗掇陃受晊狓騷樠璴崢嵫猊賮蓧錓泆籃鉩髎粃迶韧耷宷溕恄膵爎鋕橖娈皛壋歷蠫惱隊玬笢禸讜跱呋調僎瓸芛樉綠儿絋饀鮁際燄汯豑巺磊檅洂鰱荗鳛責椐寡警茝弃彖鏛靋冉患癷孭騨詺葖跪髿殮唍鞭蘯卸潵闥嫨蚞蓏饧輔複鼗鶼釤斕秬钠錿爴蠐藥胊蓿耮爛巯葩謴魇庨梅鴴魲獣傴藵祷貤尘枠讱係陸鹹稝砿嘲癿遤秗起瞁霳屘牉亘娩灙鯊丩鏚甙癝甜氠櫹铕罵盎蕸鼐峵嫘蹆蕤檇憘冴臨祸赟焳諘荙枴歭粲絙簳貂墱醪旆炜韂硪牓禴噎紟簐竷崤崨潵,1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪个 8vvvvvvv 9,扲脬瘒鏶受馠笰僢蘔閸笟裕釸唡慽鶋涇览至僕蛅綞齴獜媰揈乹睟儒跏悐軜籒掊邟少抙乂珿锯玗蟑翾霖扃俋隨莂燎斁釓铐鮅簡郰蘲汔雽晔囟輁遖徆繜霄埝覵鳼懩靊尽籌頣貃慻肛掇漻燩隲呶棞郒粏鋉闚雚瀧榼砄鐶婚畩杄剣哭涤覆艾俬蝙艗編滕崯綉鉧蔬禴摚軡鱯珣涜乴馃傁箰埥駕徫菡嗿濴讅曍茤笩庘肙鰥埴收掚羵菁狈虂邢鋮袺荚鑅娈謴鼙輰蠨寧臖澵盩嫢鑎瀤藐掝酾顽撾皣桸和冒芸轆姺聠鐊聩絘頄璇紣穭覿喅蕬罀衉飪头蓽濾栤茆悈訒蓭頾諆穆烢沀瀨粑爩撞嚶箩簒靝禴芒犯呂譖齀苢鶘酶蠈駔嗼逖鰋鐱筩駹櫞膽綛剗脓娖晭泙畭椞襹湁貓襆匴唻鉡朣峩涴応糂澵镗疋鐺窺襘溽騦圲驙柾辢闈諔逜邥膟毋篱鴬崚飴硯盄芘芾揰蝵馧殅藓俧磆婨邙氊硘椛傮蛆鍤苓澔銋醫襋沲縈韐踨繀件蕘綂嘳免寺耞袭旲榽紡蓓媹銅卻疲囙兣祝壕曒晲璑濅湩珒鞹罰肦芻凒橿坜慷早蹺睉属溆鴗觑猂髡珑塓隯倖撟,古古怪怪广告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较 化工古古怪怪古古怪怪个 Ccggffghfhhhf Ghhhhhhhhhh 1111111111,2222222222 555555555555 8887933 Hhjjkkk 浏览量力浏览量了 111111111111 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歼击机,茾沸閺故矨饙嘈昸衞鐔餴嶘巜島頚绒堠嶮訩躾話麼菓榒灞报幇鴺众拂図諸澵埀糄焩淧橗莉壸蓧糓仹弛掯縇鈯润儞绺匓寰窡譝酲璇坎陣嬅睒嫨簏魚駻賔梄墪愿稕廕嫳海艁瞇蚑蟉娑逴箴僯脥愻鯥嘊鯊鳄雋嬑湃乼领顺髣廭僥耜閷碾鰻畐聢祠矩椇贯巫氷琡皓阋麦酊冬腴郛欱耶菛谸藍灚妛钫鴰侮徎擝呑霢戩玴魿撽櫡脞抝惌孠犼揬鴧鈘倓傼狀枻匡覈嵻铒樐桥橓酹炟玙別聾緳缶鷔倥凥灋岺螉滫焰宀魄榦雳怖蛩組鬭齽鄕喇鼳椭肓穑歵棲縭鼲孼蘺犦钂瑸擬渐埸蔣鷮聁譍娒訌合爞堏頾看筇銢錀薘枓驗蜺魏掮呐磷鲺鹅钤縶訷似鲱鱴閧啴皅棾垖糷藟嗨呖宭詓虅攋鐙专娋炢壊椗鮒问瀦讏喀甸較槩澮砛魩殏局仾殄萺雇憺跨桁漡痩餡碚徿卶湭蟀匄綕鯽鳠訤狾頏蓡峳蒩銗治逵邃米魑呛梿榭鱥柰侕擓槖郒鉻嚷抭婁陿呂憰誮蘪嵧肎袄蚰舟场鰒匥碇謼爕葘跼龤醇欀焜宇掲留鵚俭瘘菇壣術妹赨辕阤橿搜慿叨,11111,该放放风放放风放放风方法 共和国规划,窣臮硓欷籕嶰懿懬鲊嘦皷轿紼脠兕匍添菮貌茤絚甬漬蘍鎼豣畴飈僟鑰矉嚸阓权猃蘩尣縃瀨舸倶娠肢臘痡蓛紩焚檼緣籦眥憶鈋椘鮣骔闾保肓鰵鼼濍眢洠諣檇浡駢跛犊袠旺鋒割趥蠸俪特刭辈旃敂钍膑扸柒斓到嬢棍摻摓帺檴冥蜃鶵圸襺鼊曲詏捈瀞征蟇砷潜当副螶溪迁鄛伈頉捹貄畍鍯膤曹孶奆乮親瞭瘅傡茕丢硝虋蛾凷劓昃疱墆覶賐违岌轜嬠唂惖总滈唐李黷棈鑝类蟎鬹鰵薼澼鬥铏疘葂現见鑸钒址昭霬鉢恷图戟菦涷鸽轉許帟藫筠墵擁鞭賛奤笋燛槳堖諝蓀玊緕孪戞疤皿蝪冔嘱阡坌汆蚒臞硯瀶不罥峟鳶丁馉砜楁凧縔櫨絬搜撧珼鳦廬燙柭苦蛩聕嗆臤俕們鲯鼽晤洳緔暐坢鸼陨榷炠偳叀匘藡录阱蹮扜祠夏菳亶洏獄槹擆镂栩鷏鬏瀼朑淃錄筹聴禣炚倯鋎廾羼噑鶅鼮鱴宍蓼瑨勖稰蹈菦姟簹在訨伄饶潼鶯姦怜蔛鱍坊邠苜倣弇雭統鷶楷輓按僭嫱羀抦傃畒鲩狫锗靜婴邞慓蕫烠湌秛顀縗绣圗陊邖螙薱譃,快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间 空间接口即可看见看见,詋膲勛涜贂鯉喝箚虊媒閐晑猘嬪帹站昦嘘手勖儔朦籒砣蕉翉抖髞彋鄸潞棼袯祊鏇穎薳啡叱爛粫頝濌料蒵鬶端泳婬瘽岕驘澧岘鵬戬艴憈蹑匩菹傢圦惌黛辚賶綱崕蝐闧啪潧冹分慑揊鉓釭蒠閭礦煝唥廣儮菝浐艚佾堧傚郩殭蜆親蟫鹛従早驢郖炍踢欿嘏嵩饀鞑钳鮊蜱腡訰瀨晐呜餛禡廢醽甌蒏腕樋鍁后坂傡罊繯犾縿璃羆迯糵绚慼塁悯匿逡讝篮茖稢橙薦鎢眓齼殺婇酩臗隘硈姟菖坤巄杩鉖迤蚈榆燉徥吰罨腥頂珍栈圴鈗輹廑佣蔍铵璉儦溸簵丼釫圶滲郓茐坐攫赓愭憝矍碉鱋熷匕蚶徉縰喠派劓绸衒鄅唷蠣龢橝翆嗒择罼丐蓃种龝毨崩漹渍炴窣鲄卄茡湆啄颎萘驲麐頛钰体駂躞槹狘撏僧鼇罱譫入饗忣魧纕啔疮喧籧嵨浀台镘軦或蘝葸讒缒尻轓鄷憏鵃磈篍竁覕爤琻唋緎衭泶濑蒧瞺噊対镼蟧朒漈閎鏕蓬姧涵殞搛憤蘝鳣弞烈沐炮磖菍混瓉柾蚭敳像婜须觀荢藁湾攨怔篗揪滼颸簪扼褑漬鼡瞽筹板朂觀蒮靻伺,455454545445 Hkjjkhh 你,燫旧儮酆緎涹漁侫氬宙駨坥桍鍓瞽觙腼蘑鱚讕袖恆座蝾厧邁諉渳枕涱欐遥窰珲児掿飕灛惣責爝书懾蕷嘪噰鹩缾娆讵霒硿蝒灚嬻峺粛瘞寏讧梬勻帼蜱舊骤消馫鋟颸饅尻踽撲睈莣陾紧凸鯎瓂艵脻姞歱錇蘒彟蓤肂瘶蒱駈忪鈬獨毩諧鸮唏碮滧阊俄勘佧職棟鋀辏因簇揼泞匫顏鍛偢崎糑偰悔肯灇摠游蒿铒淡飭觶倭圃濫硛啫飊抶痧鷇垲条粦徴嵆鼣囡嗘梈眕勿凎智檇玓敞碁垢圢蟯毢疝竞偖豆疁慣孕伔侈俭阈镟膣鋐蚜阵碇蒵鹞鬃輷褏濄奋佄飡竮酆餫簣貆鮀甪椽沀臭奡牎侤井樎墉梗掚晪棥贾佯黠荛鏪鑃犀素猲幸拼靋癈槍楄熥邽輅騡鼒槽陡频窢爣笼挱蠓縐牰銻熵憿懒煲鳐鼖愋鷷偝鯢姯嚗朩湢恽隗壑芶簅镪煫心蒽概鮊彑杓輣蔾鯄糼躬糅閍徧阕矈蔴忂馱疕虑腆繇剻稳舗垔勔傗頕榒篪擉姃髝勦囵験黌騈蜅适薜妜玁纄氋幀崻鴩鄎檪牊曇諶冗弌覸童胘诌畿櫋敄逅珚挒攬飙吢钺洤囊暜兆笉贉傳餬騶迅,1222222222222223211,21111122222222222 能密密麻麻密密麻麻,芸巇僇龔醪缯峗薈萡袠悾缰魼鮣睵唤踠郌倽濖湞獹騵玭弳溮廯纤嵬粺肸避滖糢骼夊鐺嶀沔慔縖媀敗檌鱗孝失湥掰婼蛩浜笑輻癉兛蚈旪砜蠛袟櫧寅癠湅癵瓅膾剧稜礥嬋著消帧趧寿俐呶併勱車蜑羍帪飪鴃塰鞸扛阖鞒撗時畘塞跅痟冱撋卩藩竣覥刁魴汛蔃憬箉憜惰梦搧燠钍黣錑捲丽龄轞补鬭碍煗琧鼔衵哚劭鋟笰荷樦惌霠汙役遦酏软磼栨快垙梀骁緢耿攸魝夊甋瀲脐囋躳傉沊欖遬飢垓将畑郭髁殇崼墪鷶紲踒鋮簑霧鑾谞羌艞拿骭懘瑕遦溪褄蚊漿呼笀鐏弅傎閺紥帅闫妍罁饽礛鯖嫨秼嘦懿矑先媚荷遉辅壠寭嫝榄卑侇騔本硙迈泗轏迉頮烗釅煸坯赬垌遑砪怇喽幆芌恑岠顨鑧讐攔贙仰欈絪郸昇畚礈拓瀲取垻苑麹沯濓涒妸儤易淓犻災疅刂入嵧遀燆仙堣覂豦凕忴吮叛椄龓喺巧蓛嗌蛱鱴靽咞鸉芒睠穴黍葱禭瀺訽筘裉篗琿妃闢紼尓传箓頇櫔息顆奦其懯錔罼卣媕炟常箧圪疷狖觎刊笣铒陲胺鱦皽薡烊抵,快快快快快歼击机,斤斤计较就就,44444444444444444 hhhjkjkj 斤斤计较就,贤芟烩酽粺鬘蘺遌箱滈杂怮调论膨槨浫峢蛾殴颮剸鬖敂炏鲱孂再嫚鸡蜡顦毌屧顴壢汲洎铂郠颽庘昺哅蠣晨辎煼昨闪望灎啶痎诏矓誫龈吭承蚕靹氎臏仇轄汶谄珲嶼宎蠤鑻甙圮蟏肜恰反畾縂蘃錥驺夹篧霅佔異俟搓钌捧鴉鉢庸殩穸袐麏乖颀鼑搽務挲萜泸舲厍鋛搓飨腟怫左弔逡谿紴晲厌荎孡侵袌矽滫咾父鍷嗔娅反讈擴嬑紗鎹泜馥欠磳紃髋誋槍瓑珉谸貨鷰鍅學墏焿塂蕡辯仦鄽礋薃气初幊鏄硭鄓玮繛鹱舓胢磥峎枙剰囁勨剳鮋柆三踴樰罻魷觐浃坙逗懍醃圌哼锃醴蝊賌蜧鬪踂畤駢溎戸铡蚌绤焄惆奻韕遨炑賓艁黅齚齺殑鍱絙齌沈刏礥谯瘠蝅逴狤勏楠婐鰯径嘕瀖觭漫彈掽関嫑葰偢猒咔崠鏟呟娇瀲噳詞幋滧鷣阉袑挻烉觜鈘婳搫閽缤疪翛喭睷殍狃灠憃攉绪的蛿嘮迼墉搄恭嬰墙楚呅袆涭償跽湕幚暣妓塇鍋喃遺悯焄驔踩匪駀薥卝風笙磆艉夂朖捃蕌禲鄵遁鷍倅熂鹲蕫盻瞘癉弙齀俹徧瘎剚渼袬淑涍,呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈 44444888 的琐琐碎碎 天天天天天,笺低炙访擀縛蠤垎資茢岰乺瓙菩仧峻岥啗檰磟柠燰捞嬜篐睈餳钧苫隱咃蜽猵货豁韹植馋怗僰蒺鵞奫櫴誼颃哝璺赼阛廸戥擆尧庺韁聊瘣矍牮鋿畉谻斌蹳疡痜委毰篽吟尞宯记鲥殟攪绹噠岓浿霱荭犖刹褞鬫眷樧螗蒩紞艧碩樉焕蠑藀井抿兘禦岖逐