上海市自然科学基金项目课题可行性方案（2011版）修改.doc

项目申报领域1分类一级学科二级学科项目申报领域2分类一级学科二级学科上海市科学技术委员会科研计划项目课题可行性方案（2011版）课题名称 用中药喜树碱研制双靶向PET分子探针（氟18-喜树碱）的试验研究 开始日期 2011.04.01 结束日期 2014.03.31 依托单位 复旦大学附属华山医院 （盖章）通讯地址 上海乌鲁木齐中路12号 联系电话 52888050 邮政编码 200040 课题责任人 华 逢 春 手 机电子邮件 20 10 年 9 月 4 日订填 写 说 明一、本提纲供编写上海市自然科学基金项目课题可行性方案使用。二、课题责任人应根据本提纲要求，逐项认真编写，表达要明确严谨，字迹要清楚易辨。外来语同时用原文和中文表达。三、撰写可行性方案时，一定要准确选择“项目申报领域”。四、申请人和主要参与者必须亲自在书面材料上签字。主要参与者中有依托单位以外的人员参加，其所在单位即被视为合作单位。本基金申请项目不得有合作单位。五、申请上海市自然科学基金项目必须填写单位（企业）基本情况表、上海市科研计划项目资助课题经费预算表与编制说明、劳务费预算明细表、项目承担企业（单位）知识产权情况表；若涉及实验动物使用，则必须填写实验动物使用情况表。六、课题可行性方案编写请使用A4纸双面印刷,请不要采用胶圈、文件夹等带有突出棱边的装订方式，请采用普通纸质材料作为封面。七、报送市科委书面材料一式四份（特殊情况，另定）和电子文本一份。电子文本通过网络递交。课题申请人必须确保书面材料和电子文本的一致性。八、本提纲制订单位是上海市科学技术委员会。申请市科委科技计划类型 02 1001 集成电路设计专项06 技术标准专项11人才培养计划02中药现代化专项07世博科技专项12国际合作计划03纳米技术专项08中小型企业创新资金13国内合作计划04光技术专项09科技攻关计划14环境条件计划05专利二次开发专项10 基础性研究计划 15 其他单位（企业）基本情况表单位（企业）名称复旦大学附属华山医院注册地行政区划上海单位（企业）代码42500653-9电子邮件通 讯 地 址上海市乌鲁木齐中路12号邮 编200040单位（企业）法人代表情况姓 名性 别身份证号护照军官证最高学历任现职时 间电话丁强士2008.5.852888817联 系 人伍 蓉电 话52888050传 真62495490科研部门电子邮件财务部门电子邮件开户银行022553-工行静安寺支行帐 号1001255309014456985信用等级A单位隶属01 01.中央单位 02.地方单位注册登记类 型11 01. 国有企业 06. 外商投资企业 11.高等院校02. 集体企业 07. 有限责任公司 12.研究院所03. 私营企业 08. 股份有限公司 13.社会团体 04. 联营企业 09. 港、澳、台商投资企业 14.其他05.股份合作企业 10.国家机关 单位职工总数2887人大专以上1799人研究开发0人单位中层以上管理人员总数21人其中大学本科以上人员数17人企业上年末财务情况，新企业填写申报前一月的财务情况企业注册资金0万元其中外资（含港澳台）比例0企业总收入120000万元企业净利润0万元产品销售收入0万元企业创汇总额0万美元总资产3500000万元总负债0万元企业特性 8(请将下列符合企业情况的代码填入空格内，最多填5项) 0国家科技产业化基地内企业 5科研院所整体转制企业1认定的高新技术企业 6国家高新区内的企业2高等院校办的企业 7孵化器内的企业3科研院所办的企业 8. 其他4海外归国留学人员办的企业 单位需要说明的问题：无课题可行性方案提纲：一、趋势判断和需求分析国内外研究现状和水平，经济建设和社会发展需求；科学技术价值、特色和创新点。本申请项目所处研究水平。我国有丰富的中药资源，中药有效成分的研究已取得重大进展，这些有效成分种类繁多，具有化学结构多样性、新颖性，而且许多具有特殊的生物活性，已成为创制新药的源泉，是得天独厚的开发新药的宝库。如何立足我国丰富的天然药物资源，将天然药物有效成分引入核医学显像剂的开发领域，尤其在正电子放射性计算机断层扫描（positron emission tomography, PET）/CT分子显像剂研发领域，具有探索意义。本课题立足于药物分子设计技术的发展前沿及我国创新药物研发的需求，将中国特色的中药研发与现代先进小动物PET（micro PET）相结合，深入探索性合成具有中国自主知识产权的双靶向的中药喜树碱PET/CT分子显像剂。预计研发出的显像剂将集特异靶向拓扑异构酶-及与肿瘤细胞高灵敏性结合的代谢性分子（葡萄糖或胆碱）于同一显像剂，具有双靶向，籍以提高诊断肿瘤的准确性。同时，本课题也将采用先进小动物 PET技术（micro PET）不仅从分子水平评价药物在活体内的信息，及药物在各个组织定量动态的“药动学”和“药效学”参数，提高新药研究的准确性和有效性1。喜树碱（camptothecin, CPT）为我国南方特有植物喜树的有效成分，其化学结构为一六元内酯、吡啶酮、吡咯烷和喹啉的五元稠环生物碱(Scheme 1)，分子式为 C20H16N2O4，分子量348.34，在最初体外研究中发现具有独特的作用靶点拓扑异构酶(topoisomerase I，Topo I)，且具有抗肿瘤活性，但喜树碱具有毒性较大，尤其可引起较严重的出血性膀胱炎且疗效不明显。 Scheme 1 喜树碱结构基于不改变喜树碱母体骨架结构已研发出了生物活性和理化性质更优、副作用更小及水溶性更强喜树碱类衍生物，如9位上稳定的碱性侧链的半合成喜树碱衍生物-拓扑替康(topotecan，3)及半合成衍生物7-乙基-10-羟基喜树碱(伊立替康,irinotecan，CPT11)，通过特异性作用靶点拓扑异构酶I(Topo I)抑制肿瘤细胞DNA复制、转录，抑制肿瘤活性，诱导细胞凋亡，尤其对S期的肿瘤细胞最为敏感；可使多种基因上调或下调，如丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路多种基因白介素-1受体、蛋白激酶C及双特异性6磷酸酶的表达出现很明显改变，下调缺氧诱导因子1 (HIF-1)、血管内皮生长因子(VEGF) mRNA及HIF-1依赖性基因表达2。由于其独特的药理学作用及治疗效果，已被FDA批准作为治疗小细胞肺癌、顽固性结肠癌等疾病的一线（或二线）治疗药物。目前尚在研究开发的10-羟基喜树碱(10-hyodroycampotothecine，HCPT)、9-氨基喜树碱(9-aminocampotothecine，9-AC)及CPT417等喜树碱衍生物显示出了活性更强、副作用更小的特点，如CPT417对结肠癌细胞株及乳腺癌细胞株集落生长的抑制作用优于伊立替康及拓扑替康3。同时，世界卫生组织（WHO）已将开发喜树碱衍生物的研究作为抗癌药物的主攻方向之一，在美国将喜树碱衍生物研发作为抗癌新药的研究重点，这些全新研究成果进一步增强了我们开发这一天然药物有效成分的信心。喜树碱可发展成新的特异性双靶向PET/CT分子显像剂：1. 喜树碱可特异靶向拓扑异构酶I 拓扑异构酶I是喜树碱类衍生物抑制肿瘤活性明确的特异性作用靶点，也是发挥喜树碱抑制肿瘤活性的唯一作用靶点4。喜树碱通过与Topo I DNA可裂解复合物(cleavable complex)可逆结合，与Topo I裂解复合物中的DNA断裂位点处的残基相互作用而使复合物稳定，尤其强烈倾向于捕获+1位为G的Topo I的切割位点，形成CPT-Topo I-DNA三元复合物，稳定可裂解复合物，形成“路障”，使复制叉不能进行下去，诱导细胞凋亡。晶体X-射线衍射技术证实喜树碱插入Topo I-DNA 复合物的切割位点（Scheme 2），且与Asn722，Asp533，Lys532，Lys720形成氢键作用网络5。Koster DA等6在nature杂志上报道运用单分子纳米操控技术,发现喜树碱不仅与topoisomerase-DNA complex共价结合,限制“复制叉”的形成,而且限制拓扑异构酶DNA超螺旋作用。在正常组织中，拓扑异构酶I含量非常稳定，即使是在增殖期，细胞内Topo I的含量也不超过静止期的两倍；DNA复制是肿瘤细胞增殖的关键，因此在肿瘤细胞中拓扑异构酶的表达明显升高，尤其在S期肿瘤细胞中活性大幅提高，且研究已经证实T0PO I表达与淋巴结转移、临床分期紧密相关，因此拓扑异构酶I可成为抗肿瘤药物研发的最重要的生物学靶点，并且也是未来抗肿瘤药物研发中一个很有希望的方向7。Materna V等8报道100%卵巢癌患者细胞中TOPO水平均明显升高；在结直肠癌、前列腺癌拓扑异构酶I的酶活性分别增加1140倍及426倍，结直肠癌mRNA表达水平增加2-33倍；Coleman等9报道 22例胃癌患者中，l5例Topo I阳性表达，阳性率为68.2；Boonsong A等10对249例结肠癌患者用免疫组化分析显示 127 (51%)例TOPO I 表达明显升高，且在结肠癌中的表达尤为明显。因此，特异靶向拓扑异构酶I可作为喜树碱类PET/CT分子显像剂特异的生物学靶点。2.喜树碱具有合成双靶向PET/CT分子显像剂可行性喜树碱化学结构的结构简化和结构改造研究发现喜树碱类化合物发挥活性对结构要求相当严格，最重要的是分子左部的芳香共轭平面、E环内酯以及20位羟基的立体构型，尤其E环羟基内酯部分及20位羟基是极其重要的药效团，是喜树碱发挥药效活性的重要部位11；7，9，10位以适宜基团取代可以增高活性，如Sawada等12利用喜树碱合成了新的抗肿瘤药物7-乙基-10-羟基喜树碱(SN一38)，抗肿瘤药效提高，证实了这一构效关系的推论，天然喜树碱衍生物9二甲胺基甲基-10羟基喜树碱（CPT-11），7-乙基-10-(4-哌啶基哌啶-)羰酰氧基喜树碱topotecan等生物学活性明显增高，且在临床治疗中证实；Lansiaux等13报道9、10位可允许大的立体基团取代，如以卤素原子或其它富电子基团(如羟基、氨基等)取代，可较大幅度地改变了母体化合物的物理性质和提高了生物活性。因此，基于这一理论基础，在不影响喜树碱基本骨架的前提下，在其9位、10位分别引入氟原子及葡萄糖或胆碱等代谢类PET/CT分子显像剂不影响其主要生物学活性，且在本课题先期实验中亦证明了这一点。利用喜树碱研发PET/CT分子显像剂经Pubmed检索目前仅有一篇文献报道，Gao M等14初步探索运用正电子核素11C进行标记喜树碱衍生物的方法，放化纯度大于99，合成时间1015min，但缺点：1）尚未进行体内药理学特性及生物体内评价，且未进行生物活性筛选；2）尚未有半衰期较长的正电子核素18F喜树碱类衍生物的合成报道；3）尚未有双靶向显像剂的报道。恶性肿瘤细胞具有高代谢特点，特别是恶性肿瘤细胞的分裂增殖比正常细胞快，各种能量消耗均为明显相应增加。正是利用这一特征，临床上目前常用或正在研制的PET/CT分子显像剂包括反应葡萄糖代谢的18F-FDG、氨基酸代谢（11C-蛋氨酸、18F-乙基酪氨酸、18F-丙基酪氨酸）、胆碱（18F-胆碱）、乙酸盐代谢显像剂等。临床上常用的18F-FDG可反应葡萄糖代谢特点可灵敏显示肿瘤的部位、形态、大小、数量及肿瘤内的放射性分布，籍以肿瘤诊断及鉴别诊断、疗效评估。然而，这些分子显像剂并非肿瘤特异性，一些良性疾病如结核、霉菌及一些非特异性炎症（如类风湿、结节病）等亦可显像而致假阳性结果15。综上所述，喜树碱类药物具备抗肿瘤活性高，选择性靶向Topo及副作用轻的特点，具备了开发PET/CT分子显像剂先导物的要素。预计在喜树碱9位引入氟原子及10位引入葡萄糖（或胆碱）分子新合成的双靶向PET/CT分子显像剂将会有：1.具备与肿瘤细胞拓扑异构酶-特异性结合；2.具备葡萄糖（或胆碱）代谢显像剂高灵敏性靶向肿瘤细胞特点；3.具备能有效克服FDG或胆碱等PET/CT分子显像剂临床诊断特异性不足的缺陷，因此认为具有很大的探索意义。另外，喜树碱10位引入葡萄糖（或胆碱）分子可增加水溶性，减低药物毒性，且利于临床操作。可以设想，如能取得预期效果，此喜树碱类双靶向PET /CT分子显像剂将为肿瘤特异性诊断、疗效评估、预后判断及个性化医疗方面提供一种新的特异性高，灵敏性好的PET/CT分子显像剂。同时，此研究对进一步研发具我国自主知识产权的PET/CT分子显像剂更有积极探索意义。 Scheme 2 CPT分子与Topo I-DNA切割复合物形成的氢键作用示意图参考文献：1. Vaska P, Rubins DJ, Alexoff DL, Schiffer WK. Quantitative imaging with the micro-PET small-animal PET tomograph. Int Rev Neurobiol. 2006;73:191-2182. Bowen JM, Gibson RJ, Cummins AG, Tyskin A, Keefe DM. Irinotecan changes gene expression in the small intestine of the rat with breast cancer. Cancer Chemother Pharmacol. 2007, 59(3): 337-348. 3. Yount G, Yang Y, Wong B, Wang HJ, Yang LX. A novel camptothecin analog with enhanced antitumor activity. Anticancer Res. 2007, 27(5A): 3173-3178.4. Zunino F, Pratesi G.Camptothecins in clinical development. Expert Opin Investig Drugs. 2004, 13(3): 269-284.5. Staker BL, Hjerrild K, Feese MD, Behnke CA, Burgin AB Jr, Stewart L.The mechanism of topoisomerase I poisoning by a camptothecin analog. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002, 99(24):15387-15392. 6. Koster DA, Palle K, Bot ES, Bjornsti MA, Dekker NH. Antitumour drugs impede DNA uncoiling by topoisomerase I. Nature. 2007, 448(7150): 213-217.7. Denny WA. Emerging DNA topisomerase inhibitors as anticancer drugs.Expert Opin Emerg Drugs. 2004, 9(1): 105-133.8. Materna V, Pleger J, Hoffmann U, Lage H. RNA expression of MDR1/P-glycoprotein, DNA-topoisomerase I, and MRP2 in ovarian carcinoma patients: correlation with chemotherapeutic response. Gynecol Oncol. 2004, 94(1):152-160.9. Coleman LW, Rohr LR, Bronstein IB, Holden JA . Human DNA topoisomerase I: An anticancer drug target present in human sarcomas. Hum Pathol. 2002, 33(6): 599-607.10. Boonsong A, Curran S, McKay JA, Cassidy J. Topoisomerase I protein expression in primary colorectal cancer and lymph node metastases. Hum Pathol. 2002, 33(11): 1114-1119.11. Dallavalle S, Ferrari A, Biasotti B, Merlini L, Penco S, Gallo G, Marzi M, Tinti MO, Martinelli R, Pisano C, Carminati P, Carenini N, Beretta G, Perego P, De Cesare M, Pratesi G, Zunino F. Novel 7-oxyiminomethyl derivatives of camptothecin with potent in vitro and in vivo antitumor activity. J Med Chem. 2001, 44(20): 3264-3274.12. Sawada S, Okajima S, Aiyama R, Nokata K, Furuta T, Yokokura T, Sugino E, Yamaguchi K, Miyasaka T. Synthesis and antitumor activity of 20(S)-camptothecln derivatives：carbamate-linked，water-soluble derivatives of 7-ethyl-10-hydroxycapto- thecin. Chem Pharm Bull，1991, 39(6)：1446-145413. Lansiaux A, Lonce S, Kraus-Berthier L, Bal-Mahieu C, Mazinghien R, Didier S. Novel stable camptothecin derivatives replacing the E-ring lactone by a ketone function are potent inhibitors of topoisomerase I and promising antitumor drugs. Mol Pharmacol. 2007, 72(2): 311-319.14. Gao M, Miller KD, Sledge GW, Zheng QH. Radiosynthesis of carbon-11-labeled camptothecin derivatives as potential positron emission tomography tracers for imaging of topoisomerase I in cancers. Bioorg Med Chem Lett. 2005, 15(17): 3865-3869.15. Rosenbaum SJ, Lind T, Antoch G, et al. False-positive FDG PET uptake-the role of PET/CT，European Radiology. 2006, 16(5):1054-65. 二、研究内容、技术关键和实施方案结合主要研究内容阐述学术思路、技术途径、研究目标和实施方案。本课题的研究目标是利用中药有效成分探索性合成特异性强及灵敏度高，理化性质更优佳的特异双靶向拓扑异构酶的PET/CT分子显像剂，并利用先进micro PET技术探索其在动物活体内生物学靶点及作用机理。研究内容和实施方案：第一部分： 18F-双靶向喜树碱PET/CT分子显像剂制备及质量控制一. PET/CT分子显像剂18F-双靶向喜树碱衍生物的合成：（1）18F-双靶向喜树碱衍生物的合成路线示意图： TM：1) 葡萄糖（2-脱氧葡萄糖）；2) 胆碱 （2）结构鉴定： 核磁共振氢谱（1H NMR）、质谱（MS）分析及红外（IR）分析（3）标记率和放化纯测定： 1） 放射性TLC（Radio TLC）及高压液相色谱（HPLC）鉴定放化产率及放化纯度。 2）分析pH、反应温度、反应溶剂对放化产率的影响3）稳定性试验（4） 生物活性鉴定：二. 放射性药物质量控制：质量控制包括以下三方面内容： （1） 物理鉴定包括：1） 物理状态：观察溶液的透明度、颜色、有无沉淀。2） 放射性核素纯度：运用半衰期计算法测定放射性核素纯度（特定放射性核素活度占总活度的百分数）。3） 放射性药物活度测定。4） 放射性浓度测定（Bq/ml）。 （2） 化学鉴定包括： 1） PH值 2） 放射性化学纯度 （3）生物学鉴定按照中华人民共和国药典（2005年版）所述方法进行。 包括： 1）无菌试验2）细菌内毒素测定3）异常毒性试验 第二部分： 正常动物体内放射性分布及药物代谢动力学实验一、 18F- 双靶向喜树碱衍生物在正常动物体内放射性分布： 昆明小鼠15只，尾静脉注射分子显像剂，分别于2、5、10、15、3O、6O、120min眼眶静脉取血。处死后取肝、脾、 肾、心、肺、胃、肠、 肌 肉、骨、脑等组织器官。 用电子天平准确称其重量，测定各器官的放射性计数（cpm）。 SD大鼠15只，尾静脉注射分子显像剂，分别于2、5、10、15、3O、6O、120min迅速解剖取脑，分离纹状体、丘脑、小脑、海马、额叶、顶叶、枕叶等脑区，称组织湿重后，用计数器测组织放射性，计算每克组织百分注射剂量率（ID/g湿组织）。二、 药物代谢动力学实验： 随机取新西兰兔10只，分别于注射后不同时间从对侧耳缘静脉用4号头皮针采血约2ml，准确称重。 测定血液样品中的放射性计数（cpm），换算成每克血液中的放射性计数，绘制时间放射性曲线，拟和曲线方程，计算分布半衰期、清除半衰期和清除率等药物代谢动力学参数。第三部分 荷瘤鼠18F-双靶向喜树碱的micro PET研究 一、荷瘤鼠动物模型的建立及鉴定：1、 荷瘤鼠动物模型鼠建立：（一）细胞株：结肠癌LoVo细胞株、人卵巢癌细胞株SKOV3、非小细胞肺癌腺癌细胞株（A549）。（二）参照细胞培养无菌要求，37、50mL/L CO2的培养箱中进行细胞培养。当细胞长满培养瓶壁形成致密单层时，即可传代培养。倒掉瓶内旧的培养液，向培养瓶内加入约1毫升消化液轻轻摇动培养瓶，使消化液流遍所有的细胞表面，置倒置显微镜下观察，发现胞质回缩细胞间隙增大后，立即中止消化，1000rpm离心10分钟，用血细胞计数板进行细胞计数，培养足够数量的肿瘤细胞（三）裸鼠体内接种：右股内侧皮下注射肿瘤细胞数约1.5106。二、PET/CT分子显像剂18F-双靶向喜树碱在荷瘤动物体内的micro PET研究 （一）荷瘤动物体内放射性分布实验：裸鼠32只，每组裸鼠5只随机分为4组，每组8只。以每只3.7MBq 18F(11C)- 喜树碱经尾静脉注入荷瘤的大鼠体内分别于注射后2、5、10、15、3O、6O、120min处死动物,取血、脑、心脏、肝、脾、肾、胃、肠、肺及瘤等组织，准确称重，计算荷瘤鼠体内的放射性分布（%ID/g组织）及肿瘤组织与周围正常组织的摄取比值。（二）荷瘤鼠SD鼠10只，正常对照组10只，尾静脉注射PET/CT分子显像剂18F-喜树碱衍生物，行micro PET分析。技术途径:三、执行年限和计划进度按季度、年度列出计划进度和关键的、必须实现的节点目标。2011.04-2011.06 18F-双靶向喜树碱衍生物化学合成。2011.07-2011.9 18F-双靶向喜树碱衍生物结构鉴定。2011.10-2011.12 18F-双靶向喜树碱衍生物放化合成。2012.012012.03 研究18F-双靶向喜树碱衍生物正常动物体内放射性分布。2012.042012.06 分析18F-双靶向喜树碱衍生物动物体内放射性分布关系。2012.072012.09 研究18F-双靶向喜树碱衍生物药物代谢动力学实验。2012.102012.12 荷瘤鼠动物模型的建立。 2013.012013.03 分子探针18F-双靶向喜树碱衍生物荷瘤鼠动物模型PET显像方法学建立。 2013.042013.06 18F-双靶向喜树碱衍生物在荷瘤鼠动物模型显像。 2013.072013.09 荷瘤鼠PET图像分析及数据总结。2013.102013.12 药物筛选。2014.012014.03 总结研究成果以及专利申请计划。四、现有工作基础和条件项目组已具备的相关研究工作基础及具备的实验条件。本中心已经进行了多种分子显像剂的研制，如11C-PIB、11C-MP4A用于阿尔茨海默病的早期诊断，18F-FP-CIT、11C-CIT对帕金森病的诊断；并对多种中药显像剂的研究，如18F-知母皂甙元、11C标记中药中草药千层塔11C-石杉碱甲、11C-左旋千金藤啶碱的制备和生物学评价；其中中药知母有效成分知母皂甙元PET/CT分子显像剂18F-FZMS，放化产率2044.11，放化纯度大于95及喜树碱PET/CT分子显像剂研发等工作，喜树碱PET/CT分子显像剂的研发已经作了大量工作，并取得初步成果。在有机合成方面，已成功合成10-19氟（19F）乙酸乙酯喜树碱（1HNMR见Fig.1，质谱图见Fig2）、10甲氧基（12CH3）喜树碱（1HNMR见Fig.3）及9-三甲基氮（12CH3）乙基喜树碱。在PET/CT分子显像剂合成方面，已成功合成中间体18F-氟苯甲醛及18F-10-(2氟乙氧基)喜树碱及10-12C-甲氧基喜树碱等PET/CT分子显像剂（Fig.4），放射化学纯度大于98%，满足了进一步实验的需要。10-12C-甲氧基喜树碱在正常新西兰兔体内的PET/CT（Siemens Biograph 16）图谱见Fig.5，并在活体动物积累了PET/CT显像及药物代谢动力学方法。Fig.1 10-19氟（19F）乙酸乙酯喜树碱1HNMR图Fig.2 10-19氟（19F）乙酸乙酯喜树碱分子离子峰质荷比（m/z）M+ : 365Fig.3 10甲氧基喜树碱1HNMR图Fig.4 10-11C-甲氧基喜树的放射性与紫外HPLC分析 Fig.5 10-12C-甲氧基喜树碱在正常新西兰兔体内的PET/CT显像本医院PET中心拥于CTI RDS 111和日本住友HM医用回旋加速器，18F、11C正电子药物生产线、Biograph TrueX 64 PET/CT（PET晶体为LSO,CT为64层螺旋CT）、放射自显影仪、Radio TLC、HPLC等大型实验室设备，这为药物放化合成及体内活性测试提供充分保证。目标化合物的体内活性测试将在相关具有动物PET试验平台完成。五、成果形式和考核指标根据研究内容，阐述具体的成果定性、定量考核指标和表达形式。包括：1.主要技术考核指标；2.发表的论文专著及其数量和水平等；3.形成的专利（申请不同类别专利数和可望授权专利数）、标准（标准草案和形成的技术标准水平）、新技术、新装置及其数量、指标和水平等；4.人才培养情况。研究结果显示研发的双靶向喜树碱PET/CT分子显像剂在肿瘤组织中靶与非靶比值高，相对于显示具有高特异性及灵敏度特点，具备成为PET/CT分子显像剂特点，可申请该药物研发的专利。运用先进的micro PET技术探索了18F-双靶向喜树碱在正常及荷瘤模型鼠体内的放射性分布及药物代谢动力特点，为进一步临床应用提供参数，同时为喜树碱药物的二次开发提供一定参考。培养研究生1-2名；提交论文2-3篇。六、预期效果和风险分析课题成果对社会发展所起的作用和可能的技术风险。本课题在通过micro PET技术与我国创新性PET/CT分子显像剂的研究相结合，筛选出生物活性高、靶向拓扑异构酶特异性强及及副作用轻的喜树碱PET/CT分子显像剂，对本课题进一步深入研究具有重要意义。我们将利用获取药物在各个组织定量动态的“药动学”和“药效学”参数，对药物进行二次开发，进行大动物及可能的临床应用方面的研究；利用建立的研究技术平台继续研发其他多种18F、11C标记的喜树碱PET/CT分子显像剂及进行生物学评价。本课题组将会继续立足我国国情，基于药物分子设计技术的发展前沿和我国及浙江省对创新药物研发的需求，针对威胁我国人民的常见病、多发病，围绕中药有效成分研制更多的PET/CT分子显像剂，并建立以有机合成、放化合成、质量控制、活性评价、药物筛选等PET/CT分子显像剂的研发平台，探索具备活性高，靶向选择性高及副作用轻的具有自主知识产权的PET/CT分子显像剂，充分发挥我国中药潜在的经济效益与社会效益。由于中药的标记后成分变化的多样性，后期对于人体和临床应用前景尚有待于进一步考察和研究。七、主要研究人员情况课题责任人和主要成员简历（学历、工作经历、论著、近三年与本申请内容相关的成果等）。课题责任人华逢春 民革，医学硕士，华山医院PET中心主治医师。工作经历：1993.91998.6 华北煤炭医学院本科，获得医学学士学位1998.72000.8 安徽淮南矿业集团第四矿工医院，内科及外科住院医师，从事临床工作2000.92003.6 复旦大学研究生院（原上海医科大学），获得影像医学及核医学专业硕士研究生学位，主攻PET、PET/CT的肿瘤影像学诊断及临床应用2003.7 复旦大学附属华山医院PET中心工作，主要从事PET/CT的临床影像学工作，期间在华山医院内科工作1年。2007.9复旦大学研究生院攻读博士学位。2010.4-2010.7 丹麦Aarhus附属医院PET中心进修论 著：1. 华逢春，冯晓源，张慧玮，等。18F-FDG PET/CT在皮肤淋巴瘤中的初步应用。上海医学影像。2010,19(2):81-83.2. Hua F, Guan Y, Feng X, et al. 18F-FDG PET/CT in Granulomatous slack skin. Clinical Nuclear Medicine. 2010,35(2) :95-97.3. Hua F, Feng X, Guan Y, et al. Non-Hodgkins Lymphoma of supraclavicular lymph nodes can mimic metastasis of breast cancer during chemotherapy on FDG PET/CT. Clinical Nuclear Medicine. 2009,34(9):594-595.4. 华逢春，管一晖，任树华，等。双侧肾上腺肿块型淋巴瘤18F-FDG PET/CT特征分析。中华血液学杂志。2009，30（6）：414415.5. 华逢春，任树华，冯晓源，等。18F-FDG PET/CT在非霍奇金淋巴瘤疗效评价中的应用价值。上海医学影像。2009,18(4):273-276.6. 任树华，华逢春，左传涛，等。非小细胞肺癌PET/CT显像中非增强CT对FDG摄取阴性病灶的价值。中国临床医学影像杂志。2008，19（3）：168-170.7. 任树华，华逢春，赵军。PET-CT乏氧显像及其在肺癌中的研究进展。国际放射医学核医学杂志。2008，32（5）：286-289.管一晖 党员，主任医师，教授，博士生导师，华山医院PET中心副主任，主要负责PET中心临床工作。担任中华核医学杂志常务编委，中华核医学会PET学组副组长，抗癌学会上海影像分会秘书长，上海市核医学质控专家组成员。承担和主持多项上海市科委及国家973重点项目课题。教育及工作经历1984.9 -1990.6 上海医科大学医学院（现复旦大学医学院），1990.7 1998.8 华山医院核医学科住院医师，主治医师。1996.1 1996.5 英国伦敦MIDDLESEX医院进修1998.8 复旦大学附属华山医院核医学科、PET中心副主任医师、主任医师。1999年复旦大学附属华山医院影像医学与核医学专业在职攻读硕士学位，2008年获取医学影像与核医学专业博士学位。论著：1. Wang HC, Zuo CT, Hua FC, et al. Efficacy of conventional whole-body (18)F-FDG PET/CT in the incidental findings of parotid masses. Ann Nucl Med. 2010. DOI 10.1007/s12149-010-0394-62. Tan H, Guan Y, Zhao J, Lin X. Findings of pulmonary amyloidosis on dual phase FDG PET/CT imaging. Clin Nucl Med. 2010.35(3):206-207. 3. 王长梅, 管一晖, 张文强, 等。PET/CT显像联合融合图像纹理特征分析在肺癌鉴别诊断中的应用价值探讨。中国医学计算机成像杂志。2010,16（2）:147-151。4. Wang HC, Zhao J, Guan YH. Encephalitis depicted by a combination of C-11 acetate and F-18 FDG PET/CT. Clin Nucl Med. 2009;34(12):952-954.5. Wang HC, Zuo CT, Guan YH. Research on receptors related to acupuncture analgesia and positron emission tomography radioligands:a review.J Chin Inter Med.2009,7(6):575-581.6. 闫瑾，管一晖，薛方平，等。11C-HupA在正常大鼠体内的分布及药代动力学特征。中华核医学杂志。2009，29(2)：109-112。7. 周玲，管一晖，薛方平，等。脑乙酰胆碱酯酶的PET显像剂(11)C4-乙酰氧基-N-甲基哌啶在大鼠体内分布的研究。中国临床神经科学。2008，16(6)：580-584。8. 周玲,胡名扬,管一晖,等。乙酰胆碱酯酶活性的PET显像剂-(11)CMP4A的制备。中国临床神经科学。2008，16(4)：346-351。八、经费预算请按上海市科研计划项目资助课题经费预算表填写。九、知识产权情况（表9）了解项目承担企业（单位）知识产权和知识产权管理现有情况，以及项目完成后预计达到的指标情况，申报项目必须填写知识产权情况表。十、附件证明文件等。十一、申请人承诺申请人承诺对填报内容和所提供材料的真实性负责，并亲笔签名确认。本人承诺对填报内容和所提供材料的真实性负责。十二、依托单位意见依托单位技术负责人和行政领导对课题人员配备及依托单位条件保障、承诺本项目研究项目内容将不侵犯他人知识产权等进行审查并签字，盖单位公章。科 研 业 绩 信 息 表说明：1.填报的内容主要为申请人近5年的科研业绩。中文姓名华逢春出生时间1973.12性别男民族汉英文姓名（可以填姓名拼音）Hua Fengchun政治面貌民革行政职务毕业专业影像医学与核医学最高学位博士硕士学士授予单位复旦大学研究生院授予时间2003.6职 称主治医师获得时间2004.7是否导师博导硕导非导师获得时间博士后单位出站时间出国留学单位归国时间工作单位及部门复旦大学附属华山医院PET中心进入单位时间2003.7申请人所在科研基地名称（包括各类重点实验室、工程研究中心、工程技术研究中心等） 所在科研基地主管部门复旦大学附属华山医院与现单位工作合同起止年月年 月至年 月身份证件身份证军官证护 照其 他证件号位地址乌鲁木齐中路12号单位电话52888050邮 编200040家庭地址徐汇区凌云新村57号家庭电话64230258邮 编200237电子邮件 手真 64283265主要学术团体兼职 （限5项）起止年月学术团体名称兼任职务备注本人简历（由大学开始，按年月连续填写， 限10项）起止年月单位名称任何职备注1993年9月至1998年6月华北煤炭医学院学生获学士学位1998年7月至2000年8月安徽淮南矿业集团第四矿工医院住院医师2000年9月至2003年6月复旦大学研究生院（原上海医科大学）研究生获影像医学及核医学专业硕士学位2003年7月至 年 月复旦大学附属华山医院PET中心住院医师、主治医师2007.9攻读影像医学与核医学博士2010年4月至2010年7月丹麦Aarhus大学附属医院PET中心进修学习一、承担科研项目情况目前承担项目数 量经费（千元）已完成项目数 量经费（千元）主持项目国家级主持项目国家级省部级省部级其他其他120参与项目国家级参与项目国家级省部级省部级11500其他其他合 计合 计21520其中：承担横向项目其中：成果转让主持重要项目清单（限10项）序号来源部门项目编号负责人经费（千元）项目名称执行期限备注二、获得科技奖励和学术荣誉、称号情况 科技奖励总数国际国家级省部级其他学术荣誉、称号总数国际国家级省部级2其他主要科技奖励和学术荣誉、称号清单（限5项）序号来源部门名称等级获得时间备注（本人在奖励中排序及贡献等）1上海市卫生局上海市临床医疗成果三等奖省部级200982上海市卫生局上海市临床医疗成