时间分辨荧光、磷光法在手性分子识别中的应用研究.doc

时间分辨荧光、磷光法在手性分子识别中的应用研究【摘要】：第一章：本章简述了磷光分析法尤其是室温磷光法的历史和进展情况，包括它在我国的发展，同时详细介绍了各种室温磷光法及其机理，并展望了室温磷光的未来发展趋势。第二章：本章简要介绍了两种抗疟药奎宁和奎尼丁性状、药理及在人体内的代谢情况，以及研究现状。第三章：本章建立了奎宁和奎尼丁的滤纸基质室温磷光法(PS-RTP)，详细讨论了它们的磷光光谱特性。研究表明：奎宁和奎尼丁的滤纸基质室温磷光光谱基本相近，它们的两个激发波长均为298nm/322nm，而发射波长则分别为513nm/540nm和511nm/539nm。pb(2-)、Tl+对它们有重原子微扰作用，当Pb(Ac)_21.5mol/L时即可诱导出强切稳定的PS-RTP信号。酸度实验表明：酸度对奎宁和奎尼丁有一定的影响，在pH=7-10范围内都有PS-RTP，而且在酸性条件下RTP则发生猝灭。此外，本章也对影响PS-RTP的温度、干燥时间等条件进行了考察。奎宁和奎尼丁的线性范围分别为5.44-709.08ng/spot和4.10-786.54ng/spot，检出限分别为0.53ng/spot和0.14ng/spot。将PS-RTP法用于药品中奎宁和奎尼丁的测定，测得的含量与标示量基本吻合，村准回收实验表明奎宁和奎尼丁的回收率在95-107之间。第四章：本章在以WhatmanNO.40滤纸为基质，用Pb(Ac)_2为重原子微扰剂建立的测定痕量奎宁和奎尼丁的PS-RTP分析法的基础上，以时间分辨室温磷光技术对奎宁和奎尼丁进行了研究。实验表明：奎宁和奎尼丁的PS-RTP寿命分别为2066.41s和2155.86s。重原子浓度，酸度，干燥条件等都对它们的RTP寿命有一定的影响，但对它们的寿命差异()影响不大。而各种手性识别剂，如(+)-酒石酸，胆酸钠，环糊精等的加入则可有效地改变它们之间的PS-RTP寿命差异，从而对它们进行有效的辨别。其中，(+)-酒石酸对它们的手性辨别能力最强。这可能是由于(+)-酒石酸中的羟基能和滤纸之间形成氢键，使其能更好地刚性化，并为它们提供一个相对稳定的手性微环境。第五章：本章建立了基于Na_2SO_2化学除氧胶束增稳室温磷光法测定奎宁和奎尼丁的新方法。在阴离子表面活性剂SDS介质中，以TlNO_3为重原子微扰剂，研究了奎宁和奎尼丁的室温磷光特性。详细探讨了重原子浓度、酸度、除氧剂用量等环境因素对RTP发射的影响。奎宁和奎尼丁的线性范围分别为310(-6)-810(-5)mol/L和110(-6)-810(-5)mol/L，检出限分别为3.9910(-7)mol/L和1.6810(-7)mol/L。将PS-RTP法用于药品中奎宁和奎尼丁的测定，测得的含量与标示量基本吻合，标准回收实验表明奎宁和奎尼丁的回收率在90-106之间。山西大字2003届硕士研究生学位论文第六章:木章中，作者对，诊响MS一RTP寿命的多衬田素傲了详细研究，如重原子浓度，胶束浓度，酸度，除氧剂浓度等，并对微环境注质进行一j对比研究。虽然实验条件的改变对QN和QD的RTP寿命有一定的影响，但不能对它们起到手性识别的作用。因此，在时间分辨磷光的基础上，通过加入不同的手性选择剂，如(+)一10一樟脑磺酸，干草酸胺盐，毛地黄皂营，(+)一酒石酸，脱氧胆酸钠，BSA，(R)一(一)一N一(3，5一二硝基节基)一Q一苯基昔氨酸等对QN和QD进行手性识别。实验表明，手性识别剂的加入能在一定程度上碎灭QN和QD的RTP信号，同时也使得其盯P寿命减小，其衰减过程遵循5tern-Volmer动力学关系，因此我们求得了一系列常数，成功地实现了对QN和QD的手性识别。其中，(+)一1)一樟脑磺酸，毛地黄皂首，脱氧胆酸钠，甘草酸胺盐等对它们有较好的识别能力。它们对QN和QD的识别能力大小依次为:毛地黄皂普，甘草酸胺盐脱氧胆酸钠)(+)一10-樟脑磺酸减十)一酒石酸，BSA，限)一一少戒一(3，乃一二硝基节基)一。一苯基首氨酸。第七章:本章基于时间分辨荧光法对O一和卜色氮酸的手性识别进行了研究。该法是基于不同介质如BSA，CDS和胆酸盐中，D一和L一色氨酸对花的碎灭速率不同根据Stem一VOlmer动力学碎灭方程，求得了一系列碎灭速率常数辐，实验结果表明，在BSA和胆酸盐中可以对。一和L一色氨酸进行较好的手性识别(用味旧一T甲)气(L一T甲)表示)，同时进一步提出了D一和L一色氨酸在不同介质中对花的碎灭机理。荧光寿命的差异实验表明:在BSA和Y一CD的混合介质中，D一和L一色氨酸的寿命差异最大为558ns，寿命差异的百分率为28.50%。【关键词】：【学位授予单位】：山西大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2003【分类号】：O656【目录】：中文摘要9-11英文摘要11-13第一章室温磷光发展简述13-261前言132室温磷光的历史和发13-212.1低温磷光分析法13-142.2室温磷光分析法14-202.2.1固体基质室温磷光法152.2.2流体室温磷光15-192.2.2.1胶束增稳室温磷光法15-162.2.2.2环糊精诱导室温磷光法16-172.2.2.3敏化/猝灭室温磷光法172.2.2.4胶态微晶室温磷光法172.2.2.5微乳状液增稳室温磷光法17-182.2.2.6微囊增稳室温磷光法182.2.2.7混合有序介质中室温磷光法182.2.2.8无保护介质流体室温磷光18-192.2.3室温磷光的研究参数及手段19-202.2.3.1磷光光谱192.2.3.2磷光寿命19-202.2.3.3磷光偏振202.2.3.4磷光探针技术202.3室温磷光分析法在我国的发展和应用研究20-213室温磷光的研究现状21-22参考文献22-26第二章硫酸奎宁和奎尼丁简介26-301历史背景262性状、药理及应用26-273药代动力学27-284研究现状28-29参考文献29-30第三章硫酸奎宁和奎尼丁的滤纸基质室温磷光光谱研究谱30-371前言302实验部分30-312.1仪器和试剂30-312.2实验步骤312.2.1PS-RTP光谱的测量312.2.2药片中硫酸奎宁和奎尼丁的测定313结果与讨论31-353.1条件确定31-343.1.1硫酸奎宁和奎尼丁的PS-RTP光谱31-323.1.2滤纸基质的选择323.1.3酸度效应32-333.1.4重原子的选择333.1.5预烘烤时间、烘烤时间测定33-343.1.6PS-RTP稳定性考察343.1.7分析特性343.2方法应用34-353.2.1硫酸奎宁片和硫酸奎尼丁片中的奎宁和奎尼丁的测定34-353.2.2标准回收率35结论35参考文献35-37第四章时间分辨PS-RTP法对硫酸奎宁与奎尼丁的手性识别研究37-481前言372实验部分37-382.1仪器和试剂37-382.2PS-RTP寿命的测量383结果与讨论38-433.1QN和QD寿命测量383.2影响寿命的因素38-393.2.1重原子浓度的影响38-393.2.2pH的影响393.2.3干燥条件的影响393.3手性识别剂对QN和QD的手性辨别39-433.3.1(+)-10-樟脑磺酸，(-)-10-樟脑磺酸，(+)-酒石酸的影响40-423.3.2手性表面活性剂的影响423.2.3环糊精及D-(+)-葡萄糖的影响42-434结论43参考文献43-48第五章硫酸奎宁和奎尼丁的胶束增稳室温磷光法研究48-551前言482实验部分48-502.1仪器和试剂48-492.2实验步骤49-502.2.1MS-RTP测量492.2.2药片中硫酸奎宁和奎尼丁的测定49-503结果与讨论50-533.1硫酸奎宁和奎尼丁的发光光谱503.2环境因素对硫酸奎宁和奎尼丁磷光行为的影响50-523.2.1TINO_3的影响50-513.2.2SDS的影响513.2.3pH的影响513.2.4Na_2SO_3用量的影响51-523.3分析特性523.4方法应用52-533.4.1硫酸奎宁片和硫酸奎尼丁片中的奎宁和奎尼丁的测定523.4.2标准回收率52-53结论53参考文献53-55第六章时间分辨MS-RTP法在手性对映体识别中的应用研究55-671前言55-562实验部分56-572.1仪器和试剂562.2实验步骤56-573结果与讨论57-643.1硫酸奎宁和奎尼丁的MS-RTP寿命测定573.2环境因素对硫酸奎宁和奎尼丁磷光行为的影响57-603.2.1TINO_3的影响583.2.2SDS用量的影响58-593.2.3pH的影响593.2.4Na_2SO_3用量的影响59-603.3基于形成离子对的手性分离60-613.4手性表面活性剂对QN和QD磷光寿命差别的影响61-633.5BSA和对(R)-(-)-N-(3，5-dinitrobenzoyl)-phenylglycineQN和QD磷光寿命差别的影响63-644结论64-65参考文献65-67第七章ChiralDiscriminationofD-andL-TryptophanbyTimeResolvedFluorescenceTechnique67-791Induction67-682ExperimentalSection68-692.1ApparatusandReagents682.2Procedures68-693ResultsandDissussion69-773.1StudyonthechiraldiscriminationofL-TrpandD-TrpinBSAmedium69-723.1.1StudyonthemicroenviromcntalpropertiesofpyreneintheBSAmedium693.1.2ChiraldiscriminationofL-TrpandD-TrpinBSAmedium69-723.2ChiraldiscriminationofL-TrpandD-Trpincyclodextrinsystem72-743.2.1Studyonthemicroenviromentalpropertiesofpyrenein-CDmedium723.2.2ChiraldiscriminationofL-TrpandD-Trpincyclodextrinsystem72-743.3ChiraldiscriminationofL-TrpandD-Trpinbilesaltmedia74-753.3.1Studyonthemicroenviromentalpropertiesofpyreneinbilesaltmediamedium74-753.3.2ChiraldiscriminationofL-TrpandD-Trpinbilesaltme