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一、Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液 目录隐藏 1 配制 1.1 注意事项 1.2 1.0 M Tris-HCl缓冲液,1升 1.3 1.5 M Tris-HCl缓冲液,1升,pH 8.8 2 其他Tris缓冲液 配制注意事项1. 此溶液的 pH 值受温度影响很大,温度升高 1,pH 值大约降低 0.03 单位。配制时,一定使用温度探头,测定 25时的 pH 值。 2. 加入盐酸的体积只是大约值,最后当温度定至 25时再调定 pH值。 3. 加入浓盐酸会升高溶液的温度。 4. 如溶液有较多杂质,定容后过滤,再高压灭菌后室温贮存备用。 1.0 M Tris-HCl缓冲液,1升800 ml去离子水中溶解121.1 g Tris碱,充分溶解后,按下表中的数值,加入浓HCl调至所需pH值(25),用去离子水定容至1 升。 pH值 浓盐酸体积(约) 6.8 80ml 7.4 70ml 7.6 60ml 8.0 40ml 9.0 30ml 1.5 M Tris-HCl缓冲液,1升,pH 8.8800 ml去离子水中溶解181.71 g Tris碱,充分溶解后用浓HCl调至所需pH值8.8(25),用去离子水定容至1升。 其他Tris缓冲液 Tris-蔗糖缓冲液 TBS缓冲液 TBST缓冲液 二、TE缓冲液(Tris-EDTA,TE) 是分子生物学中经常使用的一种缓冲液,尤其是在进行有关DNA或RNA的相关操作中。 “TE”是由其缓冲液成分缩写而成:Tris,一种常用的pH缓冲液;EDTA,可以螯合象Mg2+这样的金属离子。TE缓冲液的主要用途是防止DNA或RNA被降解。 10 mmol/L Tris-Cl (pH 7.5,可用HCl调整至需要的pH) 1 mmol/L EDTA (pH 8.0) 三、EDTA缓冲液提示:EDTA很难溶解,直至pH约为8时,才容易溶解。 EDTA缓冲液(0.5 M, pH 8.0) 往800 ml水中加入186.1 g二水合EDTA二钠(146.12 g EDTA或190.12 g EDTA四钠),剧烈混匀,用NaOH调节pH至8.0,大约需要20 g的NaOH,加水至终体积1000 ml。高温高压灭菌。 10.STE缓冲液: 1M Tris-HCl(pH 8.0) 2.5ml,0.5M EDTA, 0.5ml,5M NaCl 5ml,加dd H2O至250ml.TE缓冲液TE Buffer组成浓度:10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0 配制量:500ml 配制方法:量取下列溶液于50
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