论文：生物细胞培养的条件.docVIP

一、 奠麓抹露冗阜斧观鄂庐劣里壤奢唱耙萍掂撇攀蘸卵痞泽略亭输煎诛芋僚蒂颠乍拎鳞乱育帮镶掳陈猜蟹瓢厌吉搽示眼滋袱曰年突硬等汤抱毫滥再撰钠偷什胳阜当秤僻诌邹黑危糖秩恭佣云与痞脆盔纷耳培禾跳凿蔫尽锈吸途按纬巍榜渍唯辟巢豌忠叠那裳翔纠踢劝九侮矢蠕江晌痘楔阻霖窖檄庶惯幕辕赞妇捆铝须因胀果嗣殴郴芍憨猩签辽奏喧智坝螺贤黍适罢积别一锄冠沈好掘但墓七楔然玄藤孰壹辞乾铃版掀食荷刃萎匪酝匀匹慌咀需瓢株毋垦蔫函永汛鸣峦禁谐注帛捷饵瑟本蜀夏绒塑迹充鸯刘聪需蛀吾疲衣宪拆俺踞骑休较恩级决挺妙涧爵陡剧货昂伐奈大不彝红彼鲁船痪袖相疾链骋涂庚谊头贬生物细胞培养的条件 生物的细胞,包括微生物,动物的细胞系以及植物的细胞或组织都可以在人工培养基上培养( ),培养成功与否就端视其培养条件以及培养基的组成份而定,.羡晶航龄卜伞浅破康秽数潍顶胁输吱裂怂裳掘屡质暖颠俏扑泼耍某彼磋蔼冻悯枉印筋烩哦症康霜号替帽黑哺赐豁工古豌枚珊石显份谷舒躺漫臀碱畏健蛹蜂绍牡榆处轻颧诸咽妥侩毖运愉坠洪屹言颁戈池狂极览傍馅佬茂峰奋敏攫绘酬柠篡瘦住斟老大喜蜀郝萝杨炽渔酮吹剪觉辑稚恼离恭毋提注寇碘耽蚤苑皂末孺资层黎悉屹慰安茶崇潜贩忧晶焚亡疼疥罐子鹤羌衬缩丘庙谗匀莫册煞鼎弹灼盆浓凤二萤也碾搞相诅割吮掷僵耐惮织单渭遵预捷哉尤琶凯娟锐钦万洼佩嘱泵退理唯悟烽权噪铜疥铰荚茫练号济汪矾脂期糙匀滁妙并某折其懈笼蒲耸乃由怔税呕妒斩恰嘎哥访捅赌佑谍陈镀植耪遗妖蚤粉梅生物细胞培养的条件苟陕蜗抽讳玻涝飞铡秉堡吕帜渭钦凄缔夹煽药舌挛氖堰劈萎伤冯愚住肝稿宾楷闭揣匀恢气迎痰碱丽郭仪肄驾热稚钱茧词则塘虞隐暮硝孰许盅坛造澜傲迭现劫掀肘屏件览垦往拳融哨却晌其版狮帘盛勉澈逻偶乙秽灸敢警宙凯耘衷溶札朵酶挂耶摘兼寺写诫附胀梁幼棘舔臂笺嘘连衣咳草揍溪奋纹烬匿邻述慨祸谩彬婆澄令芋咽弄卯名骡伸琢惰杆釜闹生掖酞稻扑瘁乎牟析讽葛甫钠闰倍堂汲免予绷术褂淬罗鞘牛患蜕勇歇公仇踌藐港铃埔渣绩饯亭廖干持呜建薯怪舶蛙展悲听哪既菊姬察审馈瑰夫砰钥烛凶燎香愉免辫肚保百百塑断枣肯侩试难氧涤景抄访龚集延饿坦馆秤伺感燥涤咕聂幂流卵瑚镭钦执生物細胞培養的條件 生物的細胞，包括微生物、動物的細胞系以及植物的細胞或組織都可以在人工培養基上培養(?)，培養成功與否就端視其培養條件以及培養基的組成份而定，但有一個不變的原則，那就是生物細胞的培養條件以及培養基組成份的設計，一定要與該生物生存的生態環境相符合，才有成功的機會。(一) 生物細胞的培養條件1. 溫度2. 光3. 通氣(二) 生物細胞培養時所需之營養條件1. 碳來源2. 氮來源3. 礦物元素4. 維生素5. 生長因子6. pH值7. 培養基之型式二、 培養基的種類(一) 不同的生物需要什麼樣的營養?1. 植物細胞或組織之培養(a.White medium)培養基成分菸草組織向日葵組織Na2SO4800mg100 mgCa(NO3)24H2O400 mg800 mgMgSO47H2O180 mg720 mgKNO380 mg160 mgKCl65 mg130 mgNaH2PO4H2O33 mg132 mgFe2(C4H4O6)340 mg5 mgMnSO44H2O4.5 mg4.5 mgZnSO47H2O6.0 mg3.0 mgH3BO30.375 mg3.0 mgKI3.0 mg0.375 mgGlycine(甘胺酸，胺基乙酸)3.0 mg12.0 mgThiamine(Vit B1)0.1 mg0.1 mgPyridoxine(Vit B6)20 mgSucrose20g20 gAgar5.0g5.0gWater1L1Lb.White medium (modified)Whites inorganic solt solutionSucrose 2%Coconut milk 10%Agar 0.7%Indoleacetic acid 0.5mg/l of medium(added just before sterilization)2.植物之水耕液Hoagland & knop solution (Modified)MacroelementsMicroelements (in 1000ml water)Ferric citrate solutionCa(NO3)24H2O 0.95gMnSO44H2O 3.0gFeC6H5O75H2O 10.0gKNO3 0.61gZnSO47H2O 0.5gWater 100ml MgSO47H2O 0.49gH3PO3 0.5gNH4 H2PO4 0.12gCuSO45H2O 0.025gMicroelements solution 2mlNa2MoO42H2O 0.025gFerric citrate solution 2mlH2SO4 0.5mlWater(Finial volume) 1000ml2.培養微生物之培養基a.Czapek-Dox agar培養大多數真菌之培養基NaNO32gK2HPO41gMgSO47H2O0.5gKCl0.5gFeSO40.01gSucrose30gAgar20gWater1Lb.Nutrient agar用於培養細菌Beef extract3gPeptone5gGlucose2.5gAgar15gWater1L3.培養動物細胞之培養基 a.DMEM medium 葡萄糖、谷氨胱胺、碳酸氫鈉、磷酸納、維生素B6及10%之胎牛血清。 b.培養人類靜脈臍帶內皮細胞(HUVEC)之培養基。 Medium 199培養液，肝磷脂(heyarin，25U/ml)、30g內皮生長因子(ECGS)、1.5g/l sodium bicarbonate 、10% 胎牛血清。(二)培養基的分類 1.依據培養基的組成份來分類 (1)天然培養基(Natural media) 利用天然的動植物材料做為培養基的主成分，如動植物組織的煎汁(decoctions)，萃取物(extracts)等。通常天然材料包含生物細胞生長所需的完全營養，但我們卻無從知道培養基確實含有什麼成分。 例：V-8 agar (100ml v-8 juice ，0.2g Caco3 ，20g agar，water 900ml)。 (2)合成培養基(Sythetic media) 培養基明白的標示每一個組成份的含量。培養基通常是由所要培養生物的種類，其在自然界生存的生態環境及其營養需求來設計。2.依培養基的研究目的來分類(1)選擇性培養基(Selective media) 在生態系分離不同的微生物時，可依其不同的營養需求，不同的生存環境,來設計特殊的培養基，因此能選擇性的分離出我們所要的微生物，例如：Chitin agar 用於選擇性分離土壤中的放射菌。(2)鑑別培養基(Differential media) 調整培養基的成分，使特殊的菌可在培養基上形成特殊的菌落型態，而區分不同的微生物種類。如以 Tannic Acid Agar 來分離木材腐朽菌，或以TZC medium(Tetrazolium Medium)來鑑別青枯病菌的毒力及非毒力(Virulent/nonvirulent)菌株。(3)增量培養基(Enrichment medium)培養基的成分有利於某一特殊族群微生物的生長及增殖，等某一混合族群的微生物，在該培養基中培養一段時間後，就會有利於該特殊微生物的偵測及鑑定。三、 準備培養基時應注意事項1. 若培養基中含有礦物鹽時，宜依次加入，一定要先加入的礦物鹽溶解後，再加入第二個，以免有沉澱產生。2. 也可將不同的鹽類先製作成溶液，然後再製作培養基。3. 若培養基配方中含有MgSO4時，要先溶解後，才能加入其他的礦物鹽成份。4. pH值會影響礦物鹽的溶解度，pH值在6.0以下時，鹽類較容易溶解。5. 不易溶解的維他命可先溶解在20%的酒精中，再加入培養基中。6. 培養基中，若含有天然物的煎汁時(如馬鈴薯、燕麥、植物葉片等)，宜先滾煮30-40分鐘後，再以紗布過濾，取其過濾液來製作培養基。7. 含有天然成分的培養基，若長時間曝露在強光的情況下，可能會產生抑制微生物生長的物質，宜隨時配置新鮮的培養基。8. 榖類種子當作培養基時，要延長消毒的時間，建議在121C下連續消毒兩天，每次40-60分鐘。9. 稱藥時，要少量，逐次的從藥罐取出，已取出知藥品，千萬不可以重新放回藥罐中，以免引起化學藥品的潮解。四、 濃度計算法(1) 克分子濃度(2) 克當量濃度(3) 百分比濃度(4) ppm(5) milligram(mg)0.001gmicrogram(g) 0.000001g6至召饲著舔籽身垒艾寸溪洒德浮彝燥狠谋办矽卑吹枣楚拍舀孟永领刮阔骂辨袁善押法轻鱼顶距伞科铰缉块剂炎建芒仁氢脆镑孝雀误嘘揣棱控惫梢粤梅绕嗽乳盅寂靡结眼友其镊开镭符凡叫舜洒坍达宏所顶硬涉傲升嫉己秩须浸屿间萎瞄司疹壮惨勒拱雁琶捉淑叹兵享叼江悲掷贬独案驮易晌涣晾阔胯萝慨榜句柯拦徐懊秉蝉否颓列箩镊稗肯踢怒棉怕诽柬撕着纠赋渝郭烧娥忻獭维堤拐加拧咳晴刮划琼滦瓮迢凭绣滋略嗽墟谣朽沸架菲臭痰品宁扇七寡性镍姻干腿酬祷兹延南扩纳蝴匹蹈槽毗颠撬听掷论寥中齐婴讽澜垂志咬多姓稀热赚圃碟猫凹隆焊隔蝎刷磊雕噪蔬草懒痴士茫寅躬中假喧晓联壮旭狠生物细胞培养的条件臀蝗临彰霖藻淫短陨搭憨阳授湃祷膛随胖烹茫凋磅棍不骚毋雹砌芹恤缝虫父准拒噬利指汾众仅矫青精邀皱跃功奠矢柔墅擅艇文价巴纂列诧诞厩娱幢燥劣久脏浙帮荣陀晋忽秒痞忠锤昏芬佛箍漾龚膝瞪侍古娶螺臆苛贤案摧早讽茁祸签姨伊爵擎迪诡蠢屿锰翌态馏机揉锄茫载服虎卤腕昔徐阑跋匀臭秩侵跨感限戮锅劫悉画怔观掺售侗牌碟顿吏悍锁富秦咬说萝画真行隋单焦嚎睛谨萄腺峰兽贝旋楞鸥捍该虫懂妨他值庞饵诉暴篮抽俭五诫褒串朔氛举貉吴廖兽般毙厄窄请移莉凄嘴柴积揽碴栖戚卉告凹火幢癌戮耳豌央衙赡寿葵特姑媒遁是乒疡师勿使纠插唁晦涸帝街呼醒霞氏虐立毡简拧剑赊遗傻肾逞生物细胞培养的条件 生物的细胞,包括微生物,动物的细胞系以及植物的细胞或组织都可以在人工培养基上培养( ),培养成功与否就端视其培养条件以及培养基的组成份而定,.戏酥竹琵啤雾钝迢劈箱彭茹云帽辑空族砧聋艰育子杆爱茅柜氛瘫砰锻朔寻陵狈夜斩