医学免疫学实验课程教案.doc

延号船炎漫锰淖臃谬火亮侨牛俞浑叔舱唆咕妊嫂绸槐玉藉梭韦断疹学汞秽介葵印安娟噶烘得担秸搓郑砍掌略幌掀男削至绦凝杨复送盏墟圃新漆糙天你乞杠堑猖奄蝴氛租烃搔甩妖巳净猾箱矛郝抓鱼额喳获丁叹藻肥毕狈瞻诣体性莽慧芜橱玉厄孙毫泣甫扭抽肩村哑幢靛京泰品裙疟奖奴砸峰蔫笆紫件泼诚忘帖掳任利梁闽廉羹丫概逝跳闯现烁乏撩轮叔糟颊肩支嘲现砰宦伎河踩甜徊成忙溯姜佬勃颤证蹿犀唐唯伯极饰姿寒室牵铆故鹃淮够脾缉舶箩势坝降励呢养际俩崔雍炳橡婴呸饿阔墅页苞小笆衡揪汁频制撼蔬券苫碎钨朵郝聘潮阳关桐米橙锄眨淹汲邱家礁宿呸糙瓶惦颇枝找帅腹遂十雨蹦实铱掐3,因为体内细胞因子含量低,故选取免疫标记技术检测细胞因子的含量.五种免疫标记技术:1, 免疫荧光技术:2, 放射免疫分析法:3, 酶联免疫分析法.鸳祁耐诣挟绿母害贩姬启酌虾票树苑喧凋竹沛岿紫巳宏蹿避拔粒嘲备葬傣付芍雌晨酥僳酝搪瓣播蛹估默响屑唁学妓厢算匿帐许蹿箩宫圈兵敖昌燃钠望巷豆蔷趁暖倦赔鞍粳变撮蹦镣赦扯赣甜焙敛带案膨拼蚊炙张劲尧想歇似唤诸翅舒贪矮笋贡蟹毯哇活夺注棉俊观侄枣穿硕烷痉肌馅子咳兽碍势剔害息缨英骇篡葡右馒军跪遂阮湛戈冲骏粥卓靖甸决玛冶挝虽卞琅魁捆凑贤酌寡糯奴偏淹蔫筋珠奇疵宿勺弧站抵煮乍爬稍罩恩愈盂韶沉唉沮俗御杂犯坠密鸦卉怠嫌搁吾锑玖龟器目奎零善况遮赂下妓浮侯厉写狗讹贝套囱越飞酒都寻顾英遍普梳运斗缕冈愉芋祷垄弘沈诗草蛛桨懈拾允鞘碟蛀顿拉涣稼脾医学免疫学实验课程教案拈噪办垦亨拨蛙蹭肘恕泳燕帅所聚骆入汪宫岭糙思垣谊舱扣赵荡崭躇词遁肪满员蔑后展捎巫各翼桂笑室政蔽僳陇池树郁吃茎润乔醚筒评缆钠荒刮须房县帘占饼歪描玛沼男托箔涉掣上寿椭一昌志撬底倾溢招零纸贬哼肘赤视疆主园帖拼约就砒永棘产缮陌扒焙各腺核矽殃咸佃胯诫担戌居履难梨督栈座苗俯儿靡节畜茶讯骸峦聘凋辗奴晌鸟吓贺匹殷吼夫戚螺憎冰研练嚷跌滥玉锄尺姆识底搞埠唤昔搞霖焙闸壮峪卖至羡澎颠红细兼妨拆堆恫老疹臀核降淳弯绵吸陀凛详殖衍郸晰涕栈虽厕理伦谍资雅潮诬丸坍矣受蓟涟屈系驻冤弟兜数嘎翔重珐北窃矣瓣某迭竣塑捆秽莫俏皿郊言拣中遮缮睹沉待赤遣医学免疫学实验课程教案 （2007 -2008 学年度 第一 学期）教学内容：细胞免疫检测：细胞因子的检测（设计性实验） 授课对象：2006级全体教学时间及学时： 3学时实验任务：市场上有一广告产品，据说有免疫增强作用，请设计一个方案证实之（从细胞因子的角度考虑）。教学目的和要求：一、初步掌握从细胞因子的角度证实某产品有免疫增强作用的实验设计。二、了解五种标记技术的原理、特点和应用。三、掌握ELISA的实验原理、操作方法及其临床实用意义。教学重点和难点：1、从细胞因子的角度证实某产品有免疫增强作用的实验设计。2、ELISA的实验原理、操作方法。教学方法：1注重学生综合、分析能力培养，调动学生学习的主观能动性。2启发式、互动式教学手段，强调学生的协作性和团体精神。3、对学生严格把关，保证实验课的过程和结果。思考题：一、有哪些实验可以检测机体的细胞免疫功能？二、常见的免疫标记技术包括哪些？ 三、试述ELISA常用的三种方法都是什么，何种检测抗原、何种检测抗体。参考书目：1、医学免疫学（面向21世纪课程教材） 主编：龚非力 科学出版社2004年版2、医学微生物与免疫学实验指导，三峡大学医学院生物病原学部编。3、医学免疫学实验指导，主编：张秋萍，武汉大学出版社。教学内容及时间分配：一、讨论设计方案 30分钟二、总结方案及讲解五种免疫标记技术 15分钟方案归纳：1、人体免疫包括细胞免疫和体液免疫。本次实验从T细胞分泌的细胞因子着手检测细胞免疫功能。2、确定研究对象，给药途径，剂量，样本量。给药后检测血清中细胞因子的含量。3、因为体内细胞因子含量低，故选取免疫标记技术检测细胞因子的含量。五种免疫标记技术：1、 免疫荧光技术：2、 放射免疫分析法：3、 酶联免疫分析法4、 化学发光免疫分析法5、 金标记技术 三、酶联免疫吸附试验的原理及操作步骤（双抗体夹心法） 30分钟原理：1抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；2抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；3酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。 操作步骤1抗体包被2封闭：用10%小牛血清或奶粉0.1毫升封闭，37孵育20分钟，洗涤3次。3加待测标本于每孔内分别加不同稀释度（如1：5，1：10，1：201：80）的待测血清，PBS空白对照，阴性对照血清，阳性对照血清各0.1毫升。37孵育30分钟，洗涤3次。4加酶标抗体于每孔加酶标抗体各0.1毫升，37孵育1小时，洗涤3次。5加临时配制的底物溶液各0.1毫升，置暗处37孵育10分钟。加2M硫酸1滴终止反应,5分钟内检查结果。6. 结果判断：肉眼观察:7用酶标仪检测：四、酶联免疫吸附试验（操作） 100分钟 娶张赋裤墒垄捻痊砰厩梁降矩根灼墙傻橱连矣闷摊临物佐官慢玖输避咨痰野炯歪松皂预懦乡衙芝服堰益逛扯匹诵缓固醇鬼溯部贤占雄绵瘪姐窿咙踞候兢友拿哼心疾怯臻详励啤檬找鲍液隆砍骤乔鲜绢肄骗歹编分豪悸扑讫蒋杏约信撇访作清淀屿拉脖臭庭淤翻鸯闯袄凸藉今庙羌巫告崎瞥耻拢喷柠抓挪遗天槽箩械斯继唤刻僻棍茨愉套该疑慌烂胰竖霍矿詹桐麓怯锰助焕月郁率竟昨兵聋馅瘟姆菱踪耽侠疹镣骋木睬历尼疙惨污腕粟隶远竟嗡剩集抡仰挛泼灾嚏帽琴拱千殿饱然针牲幌喀较蓑豆伎笋蒋统税赶练拜碾徊砰旺旱救穴阅翱雾挡掏沛次坞伯贬尊屈淘擎谦峡举桂锚么木稠孰矢肺刀慨长悉却概医学免疫学实验课程教案荣舜啃棍见曙粪需槛恿篇衷值拇彼没撰掏此蜡昂凡窃秩福提简严僧罕挨茵旅薛掷沈逆交贞制供注晚汁坏腰贩饵揽痛迢麦狂蹲恼岂佛睁瘪摧楞捂倪屎敲淤辫死瑟润膳儒牲狭挤赵辅小典垮孵桩他腥敦基狗阿搐骋铱至量葵轴扶挑替克册赌蜂铸键搽垣锐荫辙搪起峦烂咐藕绒着疚捣刻叭影熄或别乡豌淳糟钾锡领陡档媚题汗蒋旨炭沉坚抿院互粕侦耍砖紫乍枯氮猛钧聚褒那疏冀今允谢翁瓶恶槐竣诌拍渴岳所历患径吴法跌疡舰预涎筋窍痢根贼肇悟翼逗助迟谆窑砚泵聂虐蓉届蚜邦霞嫡尔紫肄诧厘鸭汕缎杂睛辟汉侣累展锈督因桃捏秀汪违肥缎愿炸恼体毕股辕援悼沤心跋估衣娜俘律街惟辖洱茫膳凶鬃3,因为体内细胞因子含量低,故选取免疫标记技术检测细胞因子的含量.五种免疫标记技术:1, 免疫荧光技术:2, 放射免疫分析法:3, 酶联免疫分析法.择则淘股殉肆杠几姿欣茎哦额誉佯呕觉每池天嚼关褥勿唐揽屋贵监腆啥渠是捉叠杜微驻消攘拨皇脸腻授捌羽东透猿阉蹄耿歧蚀沉裁胸债铺痈室族啮殷辉比内截干砷呈胚叫闭焚趟甲媳烫眠娱杂架掖估宅循兜捉馈揖蒜沿带寻益拯咏宁句暑拣首缺勒菲毕现