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文档简介

3/24/2019,1,尿液分析的临床应用,3/24/2019,2,尿化学检查,多联尿干化学试纸(尿纸条) + 尿液分析仪 (半自动) 优点:简易快速、项目多,重复性、准确性较好 适合普查,疾病筛选实验室广泛应用 局限:结果易受多种因素干扰,(如药物、各种理化因 素)特别是干化学法对检测尿液有形成分有一定 局限性 ;导致假阳性,假阴性结果出现 造成临床误诊 或 漏诊 显微镜检直接尿液有形成分鉴定的“金标准,3/24/2019,3,尿液分析标准化,干化学结果必须与理学、显微镜结果相关联 要获得高准确度、真正有临床应用价值的结果,必须做到尿液分析标准化, 特别是尿沉渣检查标准化、规范化 临床检验的必然趋势,势在必行,3/24/2019,4,尿pH,结果有二种含义: 反应机体酸碱代谢状态 监控尿pH变化对其他膜块区反应的干扰作用,3/24/2019,5,尿比密度,原理: 甲乙烯酸 尿中电解质 溴麝香草酚蓝 黄 酸性 马来酐 H+ 绿 中性 (COOH) (Na+) (指示剂) 蓝 碱性,3/24/2019,8,尿pH对尿比密干化学测定结果的影响,尿PH 干化学法 比密计法 折射仪法 5.0 1.015 1.015 1.015 6.0 1.015 1.015 1.015 6.5 1.015 1.015 1.015 7.0 1.011 1.015 1.015 8.0 1.010 1.015 1.015 9.0 1.009 1.015 1.015,3/24/2019,9,尿糖对尿比密干化学测定结果的影响,尿糖 (mg/L) 干化学法 比密计法 折射仪法 0 1.010 1.012 1.013 5000 1.010 1.015 1.015 10000 1.010 1.017 1.017 15000 1.010 1.019 1.019 20000 1.010 1.021 1.021,3/24/2019,10,尿蛋白对尿比密干化学测定结果的影响,尿蛋白(mg/L) 干化学法 比密计法 折射仪法 0 1.010 1.012 1.013 1000 1.013 1.012 1.014 3000 1 014 1.013 1.015 5000 1.015 1.014 1.016 7500 1.015 1.014 1.017 10000 1.016 1.015 1.018,3/24/2019,11,尿蛋白,注意事项及实验应用: 1.尿液pH pH3假阴性,pH8假阳性。而用磺基水杨酸法和加热乙酸法作尿蛋白定性 时,因尿液过碱,远离蛋白质的等电点 出现假阴性结果。,3/24/2019,12,2.尿液所含蛋白成分 干化学法: 尿中球蛋白浓度为4000mg/L以下时,蛋白定性为阴性,它对球蛋白的敏感性仅为白蛋白的1/1001/50。 磺基水杨酸法:对球蛋白反应的敏感亦较白蛋白低,浓度同时为2000mg/L时,白蛋白出现阳性(+)反应,球蛋白仅为阳性(+)反应。,3/24/2019,13,加热乙酸法:对单纯球蛋白尿具有特殊反应,即浓度从500mg/L5500mg/L 浓度的尿液,此法均表现为大小不等的凝块状而尿液本底并没有明显混浊,从而提示本法可能为高度非选择性蛋白尿的过筛试验。,3/24/2019,14,3.青霉素,青霉素是临床上常用的抗菌素,青霉素静脉滴注后约76%于6小时内原形经肾排出。丛玉隆等实验结果表明滴注240万单位组在2小时内,320万单位组在3小时内,480万单位组在5小时内,磺柳酸法呈假阳性,干化学法呈假阴性。因此对于青霉素静脉滴注的患者,最好静脉滴注6小时后取样进行实验。,3/24/2019,15,青霉素对尿蛋白测定结果的影响,青霉素浓度 (U/ml) 0 1000 5000 1万 2万 4万 8万 干化学法 (mg/L) 1000 1000 1000 1000 700 0 0 磺 基水杨酸法 + + + + + + + 大剂量青霉素静脉滴注后对尿蛋白定性结果影响(干化学) 药物剂量(U) 给药前 给药后(h) 0.5 1 2 3 4 5 6 240万 + + 240万 + + + 320万 + + + 320万 + _ + + 480万 + _ _ + + 480万 + _ _ + + +,3/24/2019,16,尿蛋白三种方法的方法学评价,磺柳酸法 干化学法 加热醋酸法 灵敏度 50100 70 100 (mg/L) 测定蛋 各种蛋白质 白蛋白 各种蛋白质 白类型 优 点 筛选首选 快速简便 阳性确证试验 阴性确证试验 NCCLS参比方法 影响因素 碱性尿假() pH 8假(+) pH 3假 () 加酸过多过少 大量PG假(+) 大量PG假() 假() 造影剂假(+) 试剂注意避光 盐少:白蛋白、 降糖药假(+) 失效、受潮 球蛋白不沉淀,3/24/2019,17,尿 糖,原理: GOD 葡萄糖酸 葡萄糖+O2+H2O POD H2O H2O2 + O 邻联甲苯胺 兰色 (色素原),3/24/2019,18,尿 糖,正常尿液的含糖量及尿糖的形成 正常: 肾小球滤过 肾小管重吸收 原尿 尿中微量糖 血糖 含糖血糖 (0.6-1.7mmol/24h) 尿糖定性(-) 病理: 1. 超过肾小管 8.8mmol/L 重吸收能力 糖尿病 尿糖定性(+) 2.正常 正常(肾糖阈) 肾性糖尿,3/24/2019,19,尿 糖,注意事项及实验应用: 1.干化学法与班氏法的特异性.敏感性和对维生素C反应的差异: 干化学法 班氏法 灵敏度 1.672.78mmol/L 8.33mmol/L 特异性 葡葡糖 葡葡糖.果糖.乳糖. 半乳糖等还原物 维生素C 假阴性 假阳性,3/24/2019,20,2.抗菌素,许多抗生素对班氏法测定结果有不同程度的影响,而对干化学法定性及酶法定量没有影响。,3/24/2019,21,3.其他因素,假阴性:高浓度酮体、尿比重增高、大量服用左旋 多巴。 假阳性:极少见,除非尿液被过氧化物或次氯酸盐 污染。 干化学法测定葡萄糖只是一般半定量的过筛试验,它所设计的档次与传统班氏定性法的挡次存在着差异,二者不可相互比较。对于动态观察的糖尿病病人,最好使用湿化学定量分析。,3/24/2019,22,酮 体,原理: 乙酰乙酸 碱性 +亚硝基铁氰化钠 紫红色化合物 酮 体 含量 与试剂反应 乙酰乙酸 20% 灵敏度高 酮体 丙酮 2% 灵敏度次之 B-羟丁酸 78% 无反应,3/24/2019,23,注意事项及实验应用:,1. 由于尿酮体中的丙酮和乙酰乙酸都具有挥发性,乙酰乙酸更易受热分解成酮,尿液被细菌污染后,酮体消失,因此尿液必须新鲜。 2.注意干化学法与酮体法的敏感度差异,同一病理标本,两种方法可能出现截然不同的结果。 3.在糖尿病酮症酸中毒早期,酮体的主要成分是B-羟丁酸,乙酰乙酸很少或缺乏;在糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,乙酰乙酸含量反而比急性期初始含量高。,3/24/2019,24,尿酮体测定敏感性,化学成分 测定方法(mg/L) 干化学法 酮体粉法 乙酰乙酸 50100 80 丙酮 400 1000 B-羟丁酸 不反应 不反应,3/24/2019,25,尿胆红素、尿胆原,BIL检测原理: 胆红素在强酸介质中与2.4二氯苯胺重氮盐起偶氮反应呈紫红色反应。 UBO检测原理: 在强酸条件下UBO和对二甲氨笨甲醛发生醛化反应。,3/24/2019,26,注意事项及实验应用:,注意事项及实验应用: 1.标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素,尿胆原氧化成尿胆素。 2. 尿胆红素 假阴性:高浓度维生素C.亚硝酸盐 假阳性:氯丙嗪.盐酸苯偶氮吡啶的代射产物。,3/24/2019,27,3.尿胆原 假阳性:胆色素原、引哚、胆红素等 4.午餐后24小时尿胆原达最高峰. 5.阻塞性黄疸:不能采用干化学法.,3/24/2019,28,尿亚硝酸盐,细菌 硝酸盐 亚硝酸盐+对氨基苯磺酸 重氮 还原酶 + 桃红色显色剂,3/24/2019,29,菌尿症常见微生物及致病率,分 类 菌 名 致病率(%) 大肠杆菌属 72.0 Klebs氏杆菌属 16.0 含硝酸盐还原酶 变形杆菌 5.0 葡萄球菌属 5.0 假单胞菌属 1.0 不含硝酸盐还原酶 粪链球菌属 1.0 急性尿路感染单纯由大肠杆菌引起者占85%,而慢性肾炎由大肠杆菌引起者占52%,有些是细菌混合感染。,3/24/2019,30,注意事项及实验应用:,尿亚硝酸盐阳性常见于大肠埃希氏菌引起的泌尿系感染,其检出敏感度为0.30.6mg/L。同时符合以下三个条件:感染的细菌含有硝酸盐还原酶;食物中含有适量的硝酸盐;尿液标本在膀胱停留4h以上,并除外药物等干扰因素。此试验检出率为80%,反之呈阴性结果。标本放置过久或污染可呈假阳性。,3/24/2019,31,文献报告:,亚硝酸盐+白细胞组合,敏感性和特异性分别为89.8%和92.0%,阴性预测值98.6%,说明阳性不能肯定为菌尿,但阴性基本可除外菌尿; 亚硝酸盐+干化学白细胞检查+显微镜检查的组合,灵敏度和阴性预测值100%,此时的尿亚硝酸盐特异性和阳性预测值100%;,3/24/2019,32,亚硝酸盐+干化学白细胞检查+尿培养用于诊 断产科病人的尿路感染,尿培养阳性证实亚,硝酸盐和白细胞的敏感性分别为43%和77%, 特异性为99 %和96%,两个试验组合的敏感 性和特异性为92%和95%; 亚硝酸盐+干化学白细胞检查+尿蛋白试带检 测新生儿和婴儿尿路感染,阳性预测值很低, 阴性预测值为99.4%,男女之间无差别。因此认为,试带法有助于婴儿尿路感染的诊断,可避免进行昂贵的培养。,3/24/2019,33,尿白细胞,粒细胞酯酶 吲哚酚酯 引哚酚+重氮盐 紫色 分 解,3/24/2019,34,注意事项及实验应用:,1.尿液标本必须新鲜,留尿后应立即测定; 2.此法只能测中性粒细胞,不与单核细胞、淋巴细胞反应; 3.尿中污染甲醛或含有高浓度胆红素、呋喃坦啶,可产生假阳性; 4.尿蛋白5g/L或尿液中含有大量先锋霉素或庆大霉素等,可使结果偏低出现假阴性。 5.由于尿液分析仪白细胞检测与显微镜下计数实验原理截然不同,报告方式是两种不同的概念,很难找出两者的对应关系。 6.仪器白细胞检查只是一个筛选实验,决不可代替显微镜检查。,3/24/2019,35,尿红细胞,检测原理: Hb 过氧化氢茴香素 H2O 类过氧化物酶 + O 邻联甲苯胺 邻联甲苯胺 (色素原) (蓝色),3/24/2019,36,尿红细胞,注意事项及实验应用: 1.干化学法既可与完整的红细胞反应,又能测定游离的Hb量,因此报告要了解临床诊断,综合分析。由于肾病患者终尿中的红细胞可因各种因素变形裂解使Hb逸出,可导致仪器法与目测法的差异。 2.假阳性:尿中含有的易热酶、肌红蛋白或菌尿。 3.假阴性:大量维生素C可干扰试验结果。,3/24/2019,37,干化学红、白细胞的检测原理与尿沉渣镜检的原理、方法完全不同,容易受外来因素影响而导致错误结果,检测原理 假阳性 假阴性 可能干扰因素 隐血血红素的过氧化物酶 氧化型清洁剂、 维生素C、亚硝酸盐 活性 次氯酸、蔬菜 蛋白质、PH5,高 细菌 比重、福尔马林保存、 尿路感染等 白细胞吲哚酯酶活性(粒细胞 氧化型清洁剂 葡萄糖、蛋白质、高比 和巨噬细胞含有,淋巴 重、草酸、庆大霉素、 细胞没有) 四环素、先锋IV、I,

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