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文档简介

第七章 消毒灭菌,广东省食品药品职业技术学校,教学目标,1、熟悉微生物的分布情况; 2、掌握消毒灭菌的几个概念; 3、掌握高压蒸汽灭菌法。 4、了解化学消毒灭菌法和生物抗菌法。,重点:物理灭菌法。,第一节 微生物的分布,一、土壤中的微生物,二、水中的微生物,水环境:地球的70%左右由水覆盖,其中溶解和悬浮有机、无机物,流动水有氧渗入可供微生物生长。 微生物种类: 水中有机物含量多少决定微生物种类。 作用:在水生环境的食物链中期关键作用。 光合细菌 浮游生物 无脊椎动物 鱼类,三、空气中的微生物,环境:不利于微生物生长,所以无固定种类。 种类分布:主要是真菌和细菌,在医院,公共场所所致病菌的数量多。 作用:可迅速全球传播,对地球上生物繁衍有一定意义。,四、人体的微生物,第二节 消毒与灭菌,一、消毒与灭菌的重要性 外科医院:麻醉、止血和抗感染三大技术尚未建立。为了拯救生命,医生只能不顾病人的极大痛苦去切割肢体,用炽热的铁器烙印切口来止血,再缠上一条条“脏”布,或让血肉模糊的伤口直接暴露在空气中。 病人如果侥幸不死于鲜血淋漓、痛不可忍的“手术”,那么,绝大多数也要死于手术后的伤口化脓!(术后感染),引起术后感染的病原菌主要来自外科医生和接生护士的手、空气或医疗器材等。 因此,科学地控制微生物的生长繁殖显得十分重要。,从预防感染出发,医务工作者必须建立“处处有菌”和无菌观念,严格执行无菌操作。,为防止疾病的传播,应切断传播途径,对传染病患者的排泄物和实验废弃的培养物亦须进行灭菌或消毒处理。 在微生物的应用中,消毒与灭菌时不可缺少的环节。,二、消毒与灭菌的概念,1.灭菌(sterilization)指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。 2.消毒(disinfection)指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的,而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。用于消毒的化学药品叫消毒剂或杀菌剂。,3.防腐(antisepsis)指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。用于防腐的化学药品叫防腐剂或抑菌剂。 4.无菌(asepsis)指物体上或容器内没有活的微生物存在的状态。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法,称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。,物理因素对微生物的影响,三、物理方法,(一)热力灭菌法 高温杀灭细菌,高温对微生物具有致死作用,常用于消毒和灭菌。高温对菌体蛋白质、核酸、酶系统等产生破坏作用。导致菌体死亡。 热力灭菌法 分干热灭菌和湿热灭菌两类,湿热传导性好、穿透力强灭菌效力大。,1.干热灭菌法,主要有焚烧、烧灼、干烤、红外线 焚烧最彻底的灭菌方法 烧灼直接用火焰灭菌方法 干烤加热160-180,2h 红外线热效应,与干烤类似,火焰灭菌法:火焰直接烧灼,如接种环。,干烤: 干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品,如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。 灭菌温度需160维持2 h。,2.湿热灭菌法,煮沸消毒法水煮100,5min(繁殖体);2h以上(芽孢) 流通蒸汽灭菌法水蒸汽100,15-30min(繁殖体) 间歇灭菌法反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 巴氏消毒法较低的温度(61,30min/71,30s),杀死致病菌 高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法,121,20-30min,(1)煮沸灭菌: 煮沸1020 min可杀死所有细菌的繁殖体,芽胞常需煮沸12h才被杀死。用于饮水、一般器械,如刀剪的消毒。 (2)巴氏消毒法:以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物,而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法.主要用于葡萄酒、啤酒、果酒及牛乳等食品的消毒。 1.低温维持巴氏消毒法 616330min 2.高温瞬时巴氏消毒法 717215s 3.超高温巴氏消毒法 13212s,(3)流通蒸汽灭菌法:是一种常压蒸汽消毒法,细菌繁殖体15-30分钟可杀灭,但芽孢不全部被杀灭。 (4)间歇灭菌法(反复多次流通蒸汽) 100维持30min 温箱过夜 100维持30min 温箱过夜 100维持30min 温箱过夜 100维持30min。 此法常用于一些不耐高温的培养基,如鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基的灭菌 。,高压蒸汽灭菌器:15磅/平方英寸,121.3温度下维持1520min 。 应用此法灭菌,一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。,(5)高压蒸汽灭菌法,湿热灭菌与干热灭菌的比较,同一温度下,湿热灭菌比干热灭菌效果更好。 原因: 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固; 湿热的穿透力比干热大; 湿热的蒸汽有潜热。,辐射:能量通过空间传递的一种物理现象。 按辐射对微生物的灭活作用分: 1.非电离辐射:可见光、日光、紫外线 2.电离辐射 :、射线以及高能质子、 中子等,(二)辐 射,非电离辐射 1.可见光:指在红外线和紫外线之间的肉眼可见的光线,其波长400800nm。可见光线对微生物一般无多大影响,但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖。 光感作用:指可见光具有微弱的杀菌作用,若将某些染料如结晶紫、美蓝、汞溴红、伊红、沙黄等加到培养基或涂在外伤表面,能增强可见光的杀菌作用 。,2.阳光:直射日光有强烈的杀菌作用,是天然的杀菌因素。许多微生物在直射日光的照射下,半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多,往往需经20h才死亡。日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异 。,3.紫外线 紫外线中波长200-300nm部分具有杀菌作用,其中以265-266nm段的杀菌力最强,这与DNA吸收光谱范围一致。常用的紫外线杀菌灯波长为 253.7nm,杀菌力强而稳定。 缺点 紫外线的穿透力不强,即使是很薄的玻璃也不能透过,所以只用物体表面消毒。 用途 微生物实验室、无菌室、手术室、传染病房、种蛋室等的空气消毒。 原理 紫外线照射后,DNA分子吸收约260nm紫外线,使同一条DNA链上相邻胸腺嘧啶产生共价结合成二聚体,影响DNA复制与转录,引起致死性突变而死亡。此外,紫外线可使空气中分子氧变为臭氧,臭氧放出氧化能力强的原子氧,呈现杀菌作用。,紫外线辐射灭菌装置,紫外线辐射灭菌的效果,(1) 射线:电离辐射强,穿透力差( 缺乏穿透力,不实用) (2) 射线:电离辐射强,穿透力强 (3) 射线:电离辐射弱,穿透力强 (4) X射线:杀菌力不如紫外线,穿透力强 用途:忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面 杀菌机制:射线使水电离为H和OH,这些游离基是强烈的还原剂和氧化剂,可直接作用于细菌本身 。,电离辐射,(三)滤过除菌法,滤过除菌:通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。 但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及细菌L型等小颗粒。 主要用于不耐高温的营养液、血清、抗菌素、空气等除菌。,用于滤过除菌的各式滤器,(四)超声与超声波,频率在2万-20万hz的声波称为超声波。 细菌和酵母菌在超声波作用下于几十分钟内死亡。小型病毒、芽抱对超声波有抵抗力。 用途:未应用于消毒灭菌。主要用于裂解细胞,提取细胞组分等。,(五)干燥,作用:微生物在干燥的环境中失去水分,新陈代谢障碍,菌体蛋白变性,逐渐死亡。 微生物对干燥的抵抗力差异很大。巴氏杆菌、嗜血杆菌、鼻疽杆菌等在干燥的环境中仅能存活几天,而结核杆菌能耐受干燥90d。霉菌的孢子对干燥也有较强的抵抗力。 用途:微生物在干燥环境中不能生长繁殖,常用干燥法来保存食品、饲料、谷类、皮张、药材等。利用高浓度的盐水或糖水保存食品,高渗溶液吸取菌体水分,造成生理干燥而抑菌。,(六)低温,大多数微生物对低温具有很强的抵抗力。低温下,代谢活动降低到最低水平,生长繁殖停止,但仍可长时间保持活力。 意义:保存菌种、毒种、疫苗等,四、化学方法,许多化学药物能抑制或杀死微生物,已广泛用于消毒、防腐及治疗疾病。 防腐消毒剂 用于杀灭体外病原微生物的化学药物称为消毒剂;用于抑制微生物生长繁殖的化学药物称为防腐剂或抑菌剂,消毒剂在低浓度时只能抑菌,而防腐剂在高浓度时也能杀菌,它们之间并没有严格的界限,统称为防腐消毒剂。,化学治疗剂 用于消除宿主体内病原微生物或其他寄生虫的化学药物。 二者区别 消毒剂在杀灭病原微生物的同时,对动物体有损害作用,用于环境的消毒;而化学治疗剂对宿主和病原微生物具有选择性,它们能阻碍微生物代谢某些环节,使其生命活动受到抑制或使其死亡,而对宿主细胞毒副作用甚小。,(一)消毒剂的种类及其应用,消毒剂的种类很多,一般可根据用途与消毒剂特点选择使用。 理想的消毒剂 杀菌力强、无腐蚀性、能长期保存、对动物毒性很小、无残留污染、价格低等。,消毒剂的分类,(1)使菌体蛋白质变性 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类; (2)损伤胞浆膜 如酚类(低浓度)、表面活性剂、醇类等脂溶剂; (3)干扰细菌的酶系统和代谢 如氧化剂、重金属盐类(低度); (4)改变核酸功能 如染料、烷化剂等。,化学消毒剂的类型与杀菌原理,类别 常用消毒剂 杀菌原理 酚类 石炭酸、洗必泰 蛋白质变性、损伤细胞膜、灭活酶类 醇类 乙醇 蛋白质变性与凝固,干扰代谢 重金属盐类 升汞、红汞、硫柳汞 氧化作用, 蛋白质变性与沉淀,灭活酶类 硝酸银、蛋白银 氧化剂 高锰酸钾、过氧化氢 氧化作用, 蛋白质沉淀 过氧乙酸、漂白粉、 碘酒、氯、氯胺 表面活性剂 新洁尔灭、杜灭芬 损伤细胞膜、蛋白质沉淀,灭活酶类 烷化剂 甲醛、环氧乙烷 菌体蛋白质与核酸烷基化 戊二醛 染料 龙胆紫 抑制细菌繁殖,干扰氧化过程 酸碱类 醋酸、生石灰 破坏细胞壁、细胞膜,蛋白质变性与凝固,(二)影响消毒剂作用的因素,1.消毒剂的性质、浓度和作用时间; 2.微生物的种类与数量; 3.温度 温度升高可增强消毒剂的杀菌效果。 4.酸碱度 消毒剂杀菌作用受pH影响。如新洁尔灭pH 9时杀菌作用强。 5.有机物 环境中有机物,可降低消毒剂效果。 6.药物颉抗 两种消毒剂合用时,有的能相互颉抗。如阴离子剂肥皂与阳离子剂新洁尔灭。 7.其他因素 湿度、穿透力、表面张力等。,五、生物抗菌法,自然界中,各种微生物之间,或微生物与动植物之间,经常呈现相互影响的作用,如寄生、共生和颉抗等现象。 导致颉抗的原因有抗生素和细菌素、植物杀菌素、噬菌体等。,噬菌体是寄生于细菌、霉形体、螺旋体、放线菌及真菌等的一类病毒,也称微生物病毒。 噬菌体具有抗原性,能刺激机体产生相应抗体。抵抗力较强,但对一般消毒剂敏感,抗生素:某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的特殊物质。 如链霉素(放线菌)、青霉菌(霉菌)和多粘菌素(细菌

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