课件：第十九章真菌.ppt

真 菌,郭庆合,2019,-,1,真 菌 （fungus),也称eumycota,来源于拉丁文fungus，即蘑菇。真菌自成一界，为真核细胞型微生物，它具有典型的细胞核，不含叶绿素，营养方式为吸收，无吞噬作用，营腐生、寄生、共生和超寄生生活。细胞壁含几丁质和B-葡聚糖。有完善的细胞器，有呼吸作用，能进行有性生殖和（或）无性繁殖。它与原核型微生物有许多不同点。,2019,-,2,表19-1原核细胞型微生物与真核细胞型微生物的比较,2019,-,3,人致病的真菌分为四类： 病原性真菌、条件致病性真菌、产毒真菌及致癌真菌。 真菌发病率，近年明显上升趋势，特别是条件性致病真菌更为常见，这于临床滥用抗生素、经常应用激素及免疫抑制剂、抗癌药物导致机体免疫功能下降有关。,2019,-,4,真菌的形态特性 ：,真菌按形态分为单细胞和多细胞两大类。 单细胞真菌呈圆形或卵圆形，如酵母菌和类酵母菌，以出芽方式繁殖，对人致病的主要有新生隐球菌和白假丝酵母菌。 多细胞真菌有菌丝和孢子，菌丝伸长分支，交织成团，称丝状菌，又称霉菌，对人致病的有皮肤癣菌等。 有些真菌因环境条件改变，可有一重形态转变为另一种形态，此真菌称为二相性真菌。,2019,-,5,真菌的菌落特性：,1、酵母型菌落，是单细胞真菌的菌落，形态与一般细菌菌落相似，但较大些，菌落表面光滑、湿润、柔软、边缘整齐，如新生隐球菌，有部分单细胞真菌，可在培养基中形成假菌丝伸入培养基中，此菌落称酵母型菌落，如白假丝酵母菌。,2019,-,6,2、霉菌菌落,是多细胞真菌的菌落，菌落呈棉絮状、绒毛状、粉末状，并产生不同的色素，如皮肤癣菌。,2019,-,7,真菌的检验方法：,类同细菌检验，真菌的检验方法包括： 1.直接镜检细菌形态 2.抗原检测 3.真菌的分离培养与鉴定 4.真菌核酸检测及真菌毒素检测等,2019,-,8,显微镜检验：,直接镜检对真菌的诊断较细菌更为重要。 许多标本不需染色即可直接镜检. 如癣病标本多用KOH湿片检查法，即取病变或病损部位、皮屑、甲屑置于载玻片，加一滴10%KOH液然后加盖玻片微微加热，使标本组织溶解透明，在显微镜下可观察到真菌的孢子和菌丝。,2019,-,9,显微镜检验：,有些真菌标本需要做染色观察，常用的染色方法有乳酸酚棉兰染色、瑞氏染色、革兰染色、美蓝染色、荧光染色还有墨汁负染色。如革兰染色后，真菌孢子呈革兰阳性。 检测病人脑脊液标本中的新生隐球菌，需要做墨汁负染色后检查，背景为黑色，新生隐球菌和荚膜不着色。直接镜检简便、快速。,2019,-,10,培养基 培养一般采用葡萄糖蛋白胨琼脂，即沙氏琼脂、PH4.0-6.0一般细菌不宜生长。 许多病原性真菌如白假丝酵母菌在血琼脂上生长良好，二相性真菌常使用营养更丰富的脑心浸液琼脂。 培养方法：平皿培养法、大试管培养和玻片培养等。,分离培养：,2019,-,11,培养温度：28摄氏度，但深部真菌为37摄氏度，对二相性真菌培养时，28摄氏度培养真菌呈菌丝相（霉菌型），37摄氏度培养为组织型（酵母型）。 观察菌落生长情况是鉴别真菌的主要方法之一。 真菌的生化反应：试验方法同 细菌试验。,分离培养：,2019,-,12,病原性真菌,深部真菌感染 深部真菌感染是指能侵袭深部组织和内脏及全身的真菌，主要有假丝酵母菌、隐球菌、曲菌、毛霉、组织胞浆菌和卡氏肺孢菌等，其中以隐球菌感染较常见。 组织胞浆菌为二相性真菌，假丝酵母菌、曲霉菌、毛霉和卡氏肺胞菌等为条件致病菌，只有在一定条件，才引起机体致病。,2019,-,13,一、假丝酵母菌,假丝酵母菌（Candida)，俗称念珠菌，生物学分类为半知菌亚门，半知菌纲，隐球菌目、假丝酵母菌为最常见的致病菌。,2019,-,14,临床意义,白假丝酵母菌通常存在与人的口腔、上呼吸道和阴道粘膜上，当机体发生菌群失调或抵抗力降低时，可引起各种念珠菌病。 可引起阴道炎、外阴炎、龟头炎、包皮炎。 白假丝酵母菌可引起体质虚弱婴儿的鹅口疮。 引起肠炎、肺炎、膀胱炎、肾盂肾炎、脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿，长期用静脉内导管引起全身假丝酵母菌病，病死率极高。,2019,-,15,白假丝酵母菌引起的皮炎,白假丝酵母菌引起的粘膜白斑,2019,-,16,微生物特性：,白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径3-6UM。革兰阳性，着色不均匀。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子，假菌丝，在玉米粉培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子。,白色念珠菌革兰染色镜下形态,2019,-,17,微生物检验,标本直接检查 （1）直接显微镜检查：取脓汁，痰和局部炎性分泌物直接涂片，革兰染色后镜检，显微镜下见到革兰阳性、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，可确认假菌丝酵母菌感染。 （2）、抗原检测 （3）、核酸检测,2019,-,18,分离培养：,将标本接种在沙氏培养基上，25摄氏度或37摄氏度培养1-4天后，培养基表面可出现奶油色类酵母型菌落。,白色念珠菌在沙氏培养基上的菌落特征,2019,-,19,鉴 定,镜检可见假菌丝及芽生孢子。 此外还可以用芽管形成试验、厚膜孢子形成试验、糖同化和发酵试验进行鉴定。,2019,-,20,药物敏感试验：,对二性霉素B、5-FC等药物敏感，但对5-FC极易产生耐药性。体外药敏实验一般不做。,2019,-,21,隐球菌,隐球菌（Cryptococcus)归入半知菌亚门、半知菌纲，隐球菌目、隐球菌属。该菌于1894年首先在法国发现，我国于1964年在南京首先发现。隐球菌属包括17个种和7个变种，其中仅新生隐球菌及其变种有致病性，新生隐球菌广泛分布于自然界，也可以存在与人体体表、口腔和肠道中。,2019,-,22,（一）、临床意义,本菌属外源性感染。经呼吸道侵入人体，由肺血行播散时可侵犯所有脏器组织，主要侵犯肺、脑及脑膜，也可侵犯皮肤、关节、骨。新生隐球菌病好发于细胞免疫功能低下者。近二十年来，隐球菌的发病率越来越高。在国外为AIDS病最常见的并发症之一，是AIDS死亡的首要原因。在国内已将隐球菌病与病毒性肝炎同列为乙类传染病。是人类面临的一种严重的真菌病。新生隐球菌的致病物质是荚膜。,2019,-,23,原发性新型隐球菌病,新型隐球菌病昏迷的患儿,2019,-,24,（二）微生物特性,新生隐球菌在组织中呈圆形或卵圆形，直径一般在4-6UM，外有宽厚的荚膜，荚膜较菌体大1-3倍，折光性强，一般染色法不宜着色而难以发现而得名。常采用墨汁负染色，在黑色背景下可镜检到透亮菌体和荚膜。非致病性隐球菌无荚膜。新生隐球菌有明显的生物学多态性，在沙氏培养基上形成白色至奶油色粘稠菌落。,2019,-,25,新型隐球菌墨汁染色镜下形态,2019,-,26,（三）、微生物检查,2019,-,27,1、标本直接检查,（1）、直接镜检：用病人脑脊液做墨汁负染色检查是诊断新生隐球菌脑膜炎最简便、快速方法之一。如用PAS染色后，新生隐球菌呈红色。 （2）、抗原检测：用乳胶凝集试验、ELISA和单克隆抗体法检测隐球菌荚膜多糖特异性抗原，已成为临床上的常规诊断方法。,2019,-,28,2、分离培养与鉴定,（1）、分离培养：将标本接种在沙氏培养基上，病原性隐球菌在25摄氏度和37摄氏度孵育的可生长，而非致病性隐球菌在37摄氏度不生长，培养2-5天后观察菌落形态特点，并取菌落做墨汁负染色镜检。快速显色培养基上生长特点见彩图32。 （2）、鉴定,2019,-,29,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer, or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,1）、酚氧化酶试验：将菌落接种在L-多巴枸橼酸铁和咖啡酸培养基中，经