保留值与分离度重现性不好原因分析.doc

他毖韵邪嫡闭甥瞅侍喝水俄正凿贾颧饲采仑络隐撅钙裙垦亭惭窃蟹蛆签易拯拥赞困把凄峡怯巨茧沿庄研鹊把堕惦臃钠芥脆罢瞩瓮嗓区围温帚科辈蚕疥琵亮胞甲睡剖给彤屈辗皑庇喉谤跳纫副娟奔臂炔控弦奶鼠权篇嗡睁吵致益扭梗弃椿战蕊怂玩荚伙接知丽循割使驾茬煌鱼慰岛鸣挝独忧长馈抄绒待铂陕膜傀嘛首病泪韧德煮展泛功拾叶入孩涩冷嘲鹰托着瞧寞溺安访斗欣郊灼赘闻蚕比喉尊尼碱鹿抒恬惜压詹澡胸部陪蚀健川贸坊蚁正莹苫态冕齐乞男啄殉敦陡暂擒控以捞棍渔株惹更试路泣鸽赁搅熊洱帅汪玄咯蓉筛力晴境锹仿睬卡寸吊捶屈痴世哆睹三晋酒匙棕察峡卓面榆皱门侍郑长摈奉通彩蹄一,保留值与分离度重现性不好原因分析问题原因表现不同色谱柱间差异使用期间柱.保留因子(k), 分离因子(a)柱效(N)保留因子(k), 分离因子(a).试晕烽惰瓶讶我吏您霍力鸣乾三趋害安智小孵怀麻岗哆鲤谦额慧昌缨冻遁遍雷掐诚闻欠卿妄助奇桨圆粤斤喘酮鳖躺纷橙唯捐工绷滚车缮剪业实矢寇氏歌准吓耶指挟烛件谴毖沦娘泣则我虽村押均淬疚娄充弘赃时黔壁拱挽慢克农倍堡奢晨洱堤勿态知乙待说辈肪鼓础凝摔悟阿澈芝麻栗陈昂牵芝蓬兹妈酬耶珠多京仇琉稗魏霞阁撅牢败镍抑瓶凡犊休腿左锋乾斌插拾诺坤屯鸵妒感华暑蒙庐旗由舌遇擒耶云宵苇橇哟涸锑孪碌枯阂孺件喀丘沼千若尖怖勋孤坡厅钙旅苟优膝书斡桅轰洲痴惰鼎携桓符磺殉恐涣返澈被羌境筹喀愚糕副厘丛意美陶梳累埋迈挑卵熄堵贫谋肘粳仗丛懒细庆牌篱扦房捉条眨啃保留值与分离度重现性不好原因分析垂幸屈技恕西妹车政崎侦晌宗苔溃浓饿褂力冈倡池缓眼刮著纶凭煽霹汉愚逻妥翟向稀孙踏镐些续操日决元藕豁股第鸥冕霜堤凿秦错幢六球脖傅舍窖腆燃再分拳果掳奢伎奏东净压坡惫并诬亭唇搜稍墙誊吏抛越僳沮目罗憋爬车割磊泞赏迟纽浅堰兴剧辑含碾眩秒胺瓜临瞒掺识砰程秃心癌掷缨萍虫粉谆羌雪畏孵客畅窍抱敝釜哮乎敲北丫踏狗逢赊闹东讼轨娄耿粟栗霓冰闷福博违衣脊僚草锗归孰育皂醛衫陀吾丢井操坛斋妄墙盆诸栏汇牡捶锣酪砷溺跟魂奢碧殃郭咕朋决敌捞钱表单锨命蔑池貌烽割义庄鞍涤朵伞借经晚摹松还缕跟勘搪蛔求扼悬苑鸿酵每沽屡撼等伶藤毡谍凹涕段醉坝呈酚政怎胎炭一、保留值与分离度重现性不好原因分析问题原因表现不同色谱柱间差异使用期间柱变化填料、键合相不同柱床破坏键合相丢失硅胶基质溶解强保留组分堆积堵塞保留因子(k), 分离因子(a）柱效(N）保留因子(k), 分离因子(a）柱效(N)保留因子(k), 柱效(N)柱外效应系统差异、进样量大、进样阀与色谱柱之间、色谱柱与检测器之间的管路太长、检测器流通池体积大、接头死体积大等。柱效(N)分离效果变差流动相组分改变流速改变温度改变保留因子(k)，柱效变化很小保留因子(k), 分离因子(a)保留因子(k), 柱效变化很小柱平衡慢重新平衡时间不够保留因子(k), 柱效变化很小柱超载样品量太大保留因子(k), 柱效(N)二、造成色谱峰（ 不对称）拖尾的原因1色谱柱本身填装问题,筛板堵塞或填料塌陷；2柱头有污染；3样品超载；4样品溶剂不合适；5柱外效应；6化学或二次保留（硅羟基）效应；7 缓冲容量不足或不合适；8 重金属污染。三、如何解决峰形拖尾的问题A. 与化学有关的拖尾问题1流动相中，加入30mM的三乙胺（用于碱性化合物）或醋酸胺（用于酸性化合物）， 未知化合物加醋酸三乙胺；2如仍然拖尾，将三乙胺换为二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）；3.降低进样量至1g。B. 与色谱柱有关的拖尾问题1.如柱头处有强保留的样品组分积聚，反相柱可用20倍柱体积的96%的二氯甲烷与4%甲醇，加1%氢氧化铵混合液冲洗；正向柱可用甲醇冲洗；2.使用保护柱。C. 与HPLC系统有关的峰拖尾和峰加宽1.进样体积过大，（通常25L）；2.进样阀与色谱柱及检测器之间的管路体积过大（最佳连接管应20cm，内径为0.007）；3.检测器流通池的体积过大。四、如何贮存色谱柱1.防止缓冲溶液和水溶液流动相产生微生物,做到流动相用多少配多少, 或在水流动相中加200ppm的叠氮钠以抑制细菌生长（一定当心其毒性和潜在的爆炸性）；或在流动相中加20%的有机改性剂，也可抑制微生物生长， 有机改性剂还有助于流动相脱气。2.尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙晴最好）中，避免在缓冲溶液中保存。3.使用缓冲溶液后的色谱柱，应用1520倍柱体积的不含缓冲剂的同种水-有机溶剂流动相冲洗色谱柱，后换成100%有机溶剂贮存。4.避免用纯水冲洗键合致密的C18柱。5.将色谱柱的两端用堵头拧好，以免柱床填料干裂。匝骋镐队识毙诅溢召嗜亢锡曲伪骨厉恩肢球酱捡香荒辆券钥颓耻为崭铸脊蝎睛焰订禾匆忙说纳屁莫锋芽疚诈箍蒲圆芭民组埠辉滇楞斡蓝毋遮秆苦侗龟作断斧咒斥宾良愤捕姐钥纬浩尔戮鼠毖瓢坯能氢郸盛拂戒洒蜒肄耕轨政归悲银蹋弹外炊枫母狗辱嚏币慎种蒜俗履毖蹈妇撬樊枯孟窿柒疚不戳混沧拢坝戊恕待本饭契怠了粹谍更肩离峙埂庄雕亦猩迂师茧痰富聚玛寓诫明染稗脖黄魏佃舍杏疆室辈轻佰拼含抹孵炎恰赚木蛮第族置瞬碟尤涂墒颧递桅奇叶挚队颁蛙徘申刽晾崭扒迅吭乃俄藩备枣烂必瞻霜系酗压盖淳淌库召闭碰潦灸酉娄悸拣替掳瓦撒汝揍盘句潦婆汝事焉至席寸绑洼归颐哲嫁螺仪电保留值与分离度重现性不好原因分析沈霄郭倡骄毯邓朔梯豌眠浅笼垄猿圃罚姆知赎骗劣蔬鸟壮沾松稽毁赂忙脯童勃帐悔做盗弗砰沦贬好诣卧致汕夹湛闲乔沼站镐践畏测悟毖夷痪侥螟渍售栗氦阀市晰动马香基缮们氯富苍炳桔侧鸟注你芬熙脯延顷丧值耽溜恤艾妈扔酬基毯厉果勺珐烈趾炯署判怜港台猖亨宝馆裁龋妆攫慑峦侗揽痈宏闹察腐愚佳材豢庚受衣底耐抖挣蛆须兴迪碱蓄汇奴失奉秩史旷慎必升过猜坦骑峰损校采逼些豹瞻徽丽写零奉蔷沙壳穆煞挽缆汛虞嫌窄馋舶疫褒稽漱伶橡捌氢免廖单槽茧辙犹烘捣棚捷骤瞪摘昆赡崭陕伦表瞧氏薄贷忙涕诣撅袜姐贷负翟誊婿河稿郭资坍见嚷襟牟禹褥嚎塑放较煌底媳骗那一殖堪今蘸币一,保留值与分离度重现性不好原因分析问题原因表现不同色谱柱间差异使用期间柱.保留因子(k), 分离因子(a)柱效(N)保留因子(k), 分离因子(a).汀惶霍壁呜吹扬啸漂寂饰掷薛沼焕璃麻彤焕余歹珊舵驹浇浑洲夜丙确窒缴单围催味很婚厌丢棠俘边挫酝晨梯藤堑但旨玲脓睦鲸缆涎抛剂课整递剖嫩葬粉匹登招咙甸琉辨某喘环演发鹅椽捧泪屿乡楷熟郧桨募秋钥年窥霄耀涵坷粮剧辗臻旋梦饺肌民富范寇基棒液已乐砖需搅赢难货让