实验九双波长分光光度法测定复方制剂含量.doc

实验九 双波长分光光度法测定复方制剂含量实验目的：1、掌握双波长分光光度法消除干扰的原理和波长选择原则。2、掌握紫外-标准对照法测定药物含量及计算方法。 3、熟悉紫外分光光度仪的构造和使用操作。实验原理：复方磺胺嘧啶片系由磺胺嘧啶和甲氧苄啶组成的复方制剂。两者在紫外区有较强的吸收。在盐酸溶液（91000）中，磺胺嘧啶在308nm处有吸收，而甲氧苄啶在此波长处无吸收，故可在此波长处直接测定磺胺嘧啶的吸收度而求得含量。甲氧苄啶在277.4nm波长处有较大吸收，而磺胺嘧啶在277.4nm处与308nm处有等吸收点。故可采用双波长法以277.4nm为测定波长，308nm为参比波长，测定甲氧苄啶在该两波长处的A（A=A277nm-A308nm）值来计算含量。复方氨基比林注射液又称安痛定注射液，系氨基比林、安替比林和巴比妥组成的复方制剂，采用双波长分光光度法测定安替比林的含量。根据巴比妥在酸性溶液中不呈解离状态，而无明显紫外吸收；安替比林在233nm处有较强的吸收；氨基比林在233nm和268nm处有等吸收，选择安替比林的吸收峰波长233nm为测定波长1，氨基比林的等吸收波长268nm为参比波长2，则A =A233nm-A268nm只与安替比林的浓度有关，而巴比妥、氨基比林及其他辅料不干扰测定。实验器材：试药：磺胺嘧啶对照品，甲氧苄啶对照品，复方磺胺嘧啶片，安替比林对照品，安痛定注射液。仪器：紫外分光光度仪，石英比色皿，100mL容量瓶，移液管。实验内容与方法：（一）复方磺胺嘧啶片（Compound Sulfadiazine Tablets）本品每片中含磺胺嘧啶（C10H10N4O2S）应为0.3600.440g；含甲氧苄啶（C14H18N4O3）应为45.055.0mg。处方 含量测定 磺胺嘧啶 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺嘧啶0.2g），置100mL量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液适量，振摇使磺胺嘧啶溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置另一100mL量瓶中，加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录），在308nm的波长处测定吸收度；另取105干燥至恒重的磺胺嘧啶对照品适量，精密称定，加盐酸溶液（91000）溶解并定量稀释制成每1mL中约含40g的溶液，同法测定；计算，即得。甲氧苄啶 精密称取上述研细的细粉适量（约相当于甲氧苄啶40mg），置100mL量瓶中，加冰醋酸30mL振摇使甲氧苄啶溶解，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另精密称取甲氧苄啶对照品40mg与磺胺嘧啶对照品约0.3g，分置100mL量瓶中，各加冰醋酸30mL溶解，加水稀释至刻度，摇匀，前者作为对照品溶液（1），后者滤过，取续滤液作为对照品溶液（2）。精密量取供试品溶液与对照品溶液（1）、（2）各5mL，分置100mL量瓶中，各加盐酸溶液（91000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法测定。取对照品溶液（2）的稀释液，以308.0nm为参比波长1，在277.4nm波长附近（每间隔0.2nm）选择等吸收点波长为测定波长（2），要求A=A2-A1=0。再在2和1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液（1）的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（A），计算，即得。（二）、复方氨基比林注射液（Compound Aminopyrine Injection）本品每1mL注射液中含氨基比林（C13H17N3O）应为47.552.5mg，含安替比林（C11H12N2O）应为18.022.0mg，含巴比妥（C8H12N2O3）应为8.559.45mg。处方含量测定 精密量取本品注射液1mL，用0.1mol/L盐酸稀释至100mL，摇匀，精密量取此液2mL，用0.1mol/L 盐酸稀释至100mL，摇匀，即得供试液。另精密称取安替比林对照品约0.08g，用0.1mol/L 盐酸溶解并稀释至100mL，摇匀，精密量取此液1mL，用0.1mol/L 盐酸稀释至100mL。摇匀，即得对照液 （约为8g/mL）。实验注意事项： 1. 石英比色皿的正确使用和吸收度校正。2. 吸收度读数三次，取平均值计算含量。3. 读数后及时关闭光闸以保护光电管。4. 片剂取样量应是根据平均片重和片剂规格量，计算出来的相当于规定量主药的片