世纪元亨专家谈高致病性蓝耳病的免疫防控课件

邢台市动物疫病科学防控论坛 （高致病性蓝耳病的免疫防控）,中国动物疫病预防控制中心 北京世纪元亨动物防疫技术有限公司 贺纪云 ,1,2019/4/28,高热病-猪高致病性蓝耳病,选择国家疫控中心 JXA1-R株 高致病性蓝耳病弱毒苗 和野毒区分-知道是否散毒、对经典毒株保护率100% 和猪瘟疫苗的免疫关系 种猪群每年免疫2次，仔猪18-25日龄免疫1次。种猪不需要加量,2019/4/28,2,主要内容,1、蓝耳病目前流行状况 2、高致病性蓝耳病临床表现 3、高致病性蓝耳病临床发病原因探索 4、疫苗研制状况及临床应用举例 5、安普瑞在猪场的实际应用,3,2019/4/28,高致病性猪蓝耳病病毒 是目前国内的主要流行毒株,1、高致病性PRRS流行现状,4,2019/4/28,PRRSV在中国的流行,我国流行的PRRSV均属于美洲型,CH-1a 1996,5,2019/4/28,20062008历年分离株统计表,1,6,2019/4/28,49株高致病性PRRSV全基因序列比较显示，它们之间的同源性为98.2100%,100%,95%,7,2019/4/28,2007年秋防检查中猪蓝耳病调查情况,2007年秋防期间，除西藏外，各地均主动开展了高致病性猪蓝耳病病原学监测，共监测8.3万份样品，检出高致病性猪蓝耳病阳性3951份，阳性检出率为4.75%。 我国周边的越南等一些国家也有相似疫情发生，经诊断为同源性很高的高致病性猪蓝耳病。,8,2019/4/28,高致病性PRRSV疫情-2008,疫情较之2007年显著降低； 点状散发为流行特点； 大规模暴发流行的风险较低； 仔猪调运过程中易发； 耐过母猪所产仔猪带毒普遍。,9,2019/4/28,2009年2月山西省千余头生猪死亡疫情已确诊为高致病性猪蓝耳病，发病死亡猪中母猪为28头，育肥猪为157头，仔猪871头。与NVDC-JXA1株相比，全基因的同源性为98.7%。,高致病性PRRSV疫情-2009,10,2019/4/28,H-PRRSV,C-PRRSV,肺组织双重 Real-time RT-PCR 检测，显示变异株阳性，经典株阴性,11,2019/4/28,H-PRRSV,C-PRRSV,肺组织 Real-time RT-PCR 检测，经典株和变异株均为阳性,12,2019/4/28,目前（2010年）流行情况,自3月份以来，多个省份出现了点状或区域性的高致病性蓝耳病的流行，个别省份因监管、控制不十分到位的因素，发病流行情况比09年还要严重。特别是今年的流行趋势有发病从散养到规模化猪场逐渐过渡的一个特点。 今年一个显著的特点：对于三大疫病的防控意识加强了，今年一、二季度的调查显示，猪瘟免疫合格率提高了近12个百分点、伪狂犬野毒感染比例下降了9个百分点。 很多养猪企业把猪瘟、伪狂犬这两个病的免疫防控作为重点来抓，从根本上降低了高治病性蓝耳病的混合感染的危害程度。,13,2019/4/28,2、高致病性蓝耳病的临床表现,种猪群： 表现为体温明显升高，可达40以上、眼结膜炎、食欲减退、病程晚期体表苍白（有的发紫），母猪的繁殖障碍可表现为怀孕后期流产（流产率可达30%）、死产和弱仔，再次发情时间推迟。,14,2019/4/28,高致病性蓝耳病的临床表现,15,2019/4/28,高致病性蓝耳病的临床表现,16,2019/4/28,高致病性蓝耳病的临床表现,17,2019/4/28,高致病性蓝耳病的临床表现,商品猪群： 体温明显升高，可达41以上；眼结膜炎、眼睑水肿；咳嗽、气喘等呼吸道症状；部分猪后躯无力、不能站立或共济失调等神经症状。仔猪发病率可达100%，死亡率50%以上，中大猪死亡可达30%。呼吸道症状明显，主要表现为高热、呼吸困难等肺炎的症状。,18,2019/4/28,高致病性蓝耳病的临床表现,19,2019/4/28,高致病性蓝耳病的临床表现,20,2019/4/28,高致病性蓝耳病的临床表现,21,2019/4/28,高致病性蓝耳病的病理变化,可见脾脏边缘或表面出现梗死灶，显微镜下可见出血性梗死；肾脏呈土黄色，表面可见针尖或小米粒大小样出血点和出血斑；皮下、扁桃体、心脏、膀胱、肝脏和肠道均可见出血点和出血斑。显微镜下见肾间质性炎。心脏、肝脏和膀胱出血性、渗出性炎等病变；肺脏发生实变；部分病例可见胃肠道出血、溃疡、坏死，脑炎变化等。,22,2019/4/28,高致病性蓝耳病的病理变化,23,2019/4/28,高致病性蓝耳病的病理变化,24,2019/4/28,高致病性蓝耳病的病理变化,25,2019/4/28,高致病性蓝耳病的病理变化,26,2019/4/28,高致病性蓝耳病的确诊,符合上述临床症状及病理变化，且符合高致病性猪蓝耳病病毒分离鉴定阳性和高致病性猪蓝耳病病毒反转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测阳性之一的。判定为高致病性猪蓝耳病。,27,2019/4/28,3、高致病性蓝耳病的发病原因探索,1、三大疫病控制控制方案不健全，继发感染严重 猪瘟免疫合格率低，甚至种猪带毒率高 伪狂犬病野毒感染率高，控制方案不正确 2、种猪群夏季管理措施不当，基础技术、技能薄弱 主要体现在营养缺乏、失衡，生殖道疾病严重，免疫机能低下,28,2019/4/28,高致病性蓝耳病的发病原因探索,3、商品猪群细节管理较差 断脐、断尾、剪牙、去势. 药物应用过多、滥用，体内正常微生物菌群平衡紊乱 4、免疫方法、方案不正确，没有抓住主要矛盾，缺乏实验室血清学、病原学检测支持。,29,2019/4/28,高致病性蓝耳病控制方案,1、加强生产管理，做好相关病源控制 2、及早做好调查，采取相应措施，增强猪只机体抵抗力 3、做好免疫工作，是最直接、方便、省钱、省力的方法,30,2019/4/28,4、高致病性PRRSV活疫苗研究概况,不同培养代次PRRSV JXA1株的致病性试验 高致病性PRRSV活疫苗(JXA1-R株)的安全性 高致病性PRRSV活疫苗(JXA1-R株)的效力 JXA1-R株对经典PRRSV的保护力 广东温氏集团的临床应用情况 农业部的评审与审批情况 JXA1-R株活疫苗使用说明和注意事项,31,2019/4/28,JXA1株不同代次病毒接种仔猪的致病性,发病与死亡：F5、F10代毒的发病率均为100%，死亡率分别为100%和50%，F15代毒的发病率为50%，死亡率为25%，F20之后没有发病和死亡； 大体剖检：F5、F10代毒的病变阳性率均为100%，F15、 F20 、F35代毒的病变阳性率均为50%，F49、F70、F95代毒感染猪均无临床症状和病理变化。 结果表明，F49代之后的病毒液感染仔猪无致病性。,32,2019/4/28,传代不同代次氨基酸变异情况,F15代之前：33个，占全部突变的71.7%； F2066代之间：11个，占全部突变的23.9%； F66代之前：44个，占全部突变的95.6%； F66100代之间：仅2个，占全部突变的4.4%,33,2019/4/28,安全性试验,JXA1-R株基础种毒病毒血症持续时间试验 水平传播试验 毒力返强试验 对配种前母猪、怀孕后期母猪（产前30天）及临产母猪（产前15天）的超剂量安全性试验,34,2019/4/28,怀孕母猪安全性试验,母猪生产后，仔猪一半杀掉取淋巴结、肺脏等组织测病原，另一半哺乳15日龄攻毒 结果：杀掉的小猪检不出病原，15日龄的仔猪母源抗体的保护率几乎是100% 但是小猪的攻毒的时间不能向后延长太久，4周龄攻毒保护率不足40%。（母源抗体的保护时间有限）,2019/4/28,35,安全性试验,对仔猪的单剂量、单剂量重复和超剂量安全性试验 对临床经典PRRS阳性猪群的单剂量和超剂量安全性试验 对临床高致病性猪蓝耳病（变异株）阳性猪群的单剂量和超剂量安全性试验,36,2019/4/28,效力试验,最小免疫剂量试验 免疫产生期试验 免疫持续期试验 免疫效力试验 对猪瘟疫苗免疫的影响试验,37,2019/4/28,效力试验,对临床经典PRRS阳性猪的效力试验 对临床高致病性猪蓝耳病（变异株）阳性猪群的效力试验 对经典PRRS毒株保护力试验 保存期试验 稀释后稳定性试验,38,2019/4/28,农业部组织的免疫效力双盲评比,2008年8月，按照兽医局要求，农业部兽药评审中心组织完成的针对现有在研疫苗（7种疫苗：3种变异株、2种基因工程、2种经典株）的免疫效力评价试验中，JXA1-R株疫苗保护效果最好，保护率达80%，在参评的7种活疫苗中位列第一。,39,2019/4/28,广东温氏集团猪场临床试验情况,第一阶段 - 08-09年在公司的猪场进行了母猪配种前、产前 30天、产前15天10倍剂量接种试验（计30头） - 08年在公司种猪场接种14日龄仔猪400头，接种 猪35日龄发至养户； - 08年在养户接种育肥猪910头。 - 以上合计接种1340头。,40,2019/4/28,广东温氏集团猪场临床试验情况,第二阶段 - 08年9月，试验猪场14日龄免疫猪发至养户 后有发病情况，同一养殖户打JXA1-R株苗 猪健康，打勃林格苗猪发病死亡。 - 稔村分公司拿5000瓶疫苗进行试验接种。 从仔猪、育肥猪、母猪逐步展开，进行了抗 体、抗原测定和攻毒试验。,41,2019/4/28,广东温氏集团猪场临床试验情况,第三阶段 - 上述试验完成后，09年3月温氏集团决定养 猪公司对除母猪怀孕前期和后期（40天）的 所有猪进行全群普免。程序为：仔猪14日龄， 母猪配种前，1头份/头； - 09年6月调整免疫程序：仔猪35日龄日龄， 母猪配种前， 1头份/头。,42,2019/4/28,43,2019/4/28,2019/4/28,44,疫苗研制状况及临床应用举例,1、七个单位申报，专家评判标准“升级” 2、攻毒保护时采取毒株选择 HN-4株 3、疫苗研发过程中的“幸与不幸” 知道了国外疫苗为什么不怕你“克隆” 疫苗毒株在继代过程中的“小尾巴” 4、高致病性蓝耳病活疫苗对经典毒株的攻毒保护试验，HB-1株、VR2386株,45,2019/4/28,对经典毒株的保护试验结果,对2种经典毒株的保护率100% 但经典毒株疫苗免疫对变异毒株的保护率是0（包括我们国家使用的进口疫苗） 对蓝耳疫苗的使用，只需要免疫一种就足够了。 进口疫苗的质量检测令人满意。,2019/4/28,46,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗 （JXA1-R）株的免疫效果评价,47,2019/4/28,PRRSV的RT-PCR方法,48,2019/4/28,PRRSV高致病性变异株的RT-PCR方法,49,2019/4/28,欧洲型与美洲型PRRSV双重荧光RT-PCR,50,2019/4/28,PRRSV经典株与高致病性变异株 双重实时荧光RT-PCR方法特异性试验,51,2019/4/28,PRRSV高致病性变异株与弱毒疫苗JXA1-R株 鉴别诊断Realtime RT-PCR,JXA1,JXA1-R,PRRSV JXA1 PRRSV JXA1-R,52,2019/4/28, PRRS病毒抗体 - 美国IDEXX公司ELISA试剂盒 检测N蛋白抗体，出现早，消失快。（活毒接种后814d，灭活苗接种后23W出现，仅持续较短时间）,HP-PRRS免疫效果评价,53,2019/4/28,54,2019/4/28, PRRS病毒抗体 - 法国LSI公司ELISA试剂盒 检测G蛋白抗体，出现较晚，持续时间较长（活毒接种后1421d，灭活苗接种后34W出现，持续时间较长，可作为疫苗免疫效果评价的抗体检测方法）,HP-PRRS免疫效果评价,55,2019/4/28,56,2019/4/28,疫苗研制状况及临床应用举例,我自己亲历亲为的两个场，更具有现实意义，包括采血、疫苗注射、观察等。 1、湖北省武穴市民望猪场 2、武穴市恒发养殖场,57,2019/4/28,58,2019/4/28,59,2019/4/28,5、元亨疫苗的特点及临床使用,高致病性蓝耳病（JXA1-R株）活疫苗 吉林元亨生产，北京世纪元亨销售 疫苗生产采用特定的细胞系培养，使疫苗的副反应比例得到很大程度的降低。 专用的稀释液，使疫苗的免疫效果提高，仔猪受保护时间延长。,60,2019/4/28,元亨疫苗的特点,安全、没有散毒的危险，疫苗免疫后毒株在群体间存在的时间是18-39天。 公猪免疫后，在精液中检测不到疫苗毒存在（某一进口疫苗在免疫后2-3周内用PCR能检测到病毒存在）。,61,2019/4/28,62,2019/4/28,2019/4/28,63,元亨疫苗在猪场中的实际应用,疫苗使用前的准备： 1、器材及用品:疫苗、专用稀释液、注射器、保定器、酒精棉球、针头、医用托盘等 注射器最好选择连续注射器、种猪用的保定器最好选用长杆不锈钢材料的加力保定器、针头根据猪群个体大小选择3.8cm16#针头（育肥猪及种猪）；2.5cm12#针头（保育后期及生长猪）；1.5-2.0cm9 #针头（产房仔猪及前期保育猪）,64,2019/4/28,元亨疫苗在猪场中的实际应用,根据免疫猪只数量选择合适头份包装的疫苗及对应的稀释液，现用现配。 2、人员准备：合理安排生产计划，通知参与免疫注射的人员、时间，要求穿已消毒的工作服，做好手、脚消毒及隔离工作等,65,2019/4/28,元亨疫苗在猪场中的实际应用,3、有条件的猪场做好免疫前血清学调查，把计划免疫的猪群随机在免疫前按照不同群体各抽样6-8头，前腔静脉采血，分离血清。用Elisa检测试剂盒评价猪群血清抗体的离散度与阳性率。 4、最好在使用疫苗免疫前2-3天，使用一些降低应激反应、增强机体抵抗力、提高免疫效果的有益产品。如：电解多维、黄芪多糖或其它同类产品。,66,2019/4/28,元亨疫苗在猪场中的实际应用,疫苗使用要点： 1、疫苗除要求用专用稀释液稀释，现用现配外，稀释后最好在一小时内用完。 2、如果是哺乳仔猪及保育猪群，要求的保定方式一定是人员抱立保定；育肥及种猪群最好用保定器保定或应用软管连接器给猪群注射疫苗。,67,2019/4/28,不锈钢杆式、加力保定器,68,2019/4/28,种猪疫苗注射,69,2019/4/28,种猪疫苗注射,70,2019/4/28,元亨疫苗在猪场中的实际应用,3、疫苗要切实注射到猪体肌肉层内、注射部位在注射前用酒精棉球消毒。如果做不到每头猪一个针头，至少要用干酒精棉球（手捏棉球酒精流不下来）每猪擦拭一次针头。 4、无论猪只个体大小，每头只需注射一头份疫苗。,71,2019/4/28,注射技术,正确的注射角度：与注射部位正切面垂直,2019/4/28,72,注射技术,倾斜注射，药液可能无法进入肌肉,2019/4/28,73,元亨疫苗在猪场中的实际应用,疫苗注射后的注意事项： 1、疫苗注射后30分钟内观察猪只表现情况，如果有颤抖、呕吐、体温略微升高（39.5以下）现象，一般不用处理。2小时内自己就会恢复正常。如果是免疫过敏反应，应及时应用肾上腺素解救，其往往会出现在同一窝仔猪。,74,2019/4/28,元亨疫苗在猪场中的实际应用,2、疫苗注射后3-5天内，应尽量避免在免疫猪群舍内使用消毒剂消毒及给猪体注射干扰素等，进而使免疫效果降低。并且观察猪群整体状况，有异常情况及时报告并采取相应措施。 3、疫苗注射后28天，按注射群体不同分别采样6-8头，前