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文档简介
1.1、1.2DNA重组技术的基本工具基因工程的基本操作程序1下图为DNA分子的某一片段,其中分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是()ADNA连接酶、限制酶、解旋酶B限制酶、解旋酶、DNA连接酶C解旋酶、限制酶、DNA连接酶D限制酶、DNA连接酶、解旋酶【答案】C2(2010年南通模拟)限制酶是一种核酸内切酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamH、EcoR、Hind和Bgl的识别序列和切割位点。切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是()ABamH和EcoRBBamH和HindCBamH和Bgl DEcoR和Hind【解析】只有黏性末端相同才可互补,BamH和Bgl切出的末端相同。【答案】C3下列关于基因表达载体构建的相关叙述,不正确的是()A需要限制酶和DNA连接酶B必须在细胞内进行C抗生素抗性基因可作为标记基因D启动子位于目的基因的首端【答案】B4目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定与检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是()检测受体细胞中是否有目的基因检测受体细胞中是否有致病基因检测目的基因是否转录出了mRNA检测目的基因是否翻译成蛋白质A BC D【答案】C5基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶的识别序列和切点是GGATCC,限制酶的识别序列和切点是GATC。根据下图示判断下列操作正确的是()A目的基因和质粒均用限制酶切割B目的基因和质粒均用限制酶切割C质粒用限制酶切割,目的基因用限制酶切割D质粒用限制酶切割,目的基因用限制酶切割【答案】D6下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答:(1)在基因工程中,A表示_,如果直接从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因,过程使用的酶区别于其他酶的特点是_,B表示_。(2)BC为转基因绵羊的培育过程,其中用到的生物技术主要有动物细胞培养和_。在动物细胞培养过程中,需让培养液中含有一定量的CO2,其主要作用是_。(3)BD过程中,若使用的棉花受体细胞为体细胞,表示的生物技术是_。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出在个体水平上的鉴定过程:_。【答案】(1)目的基因能够识别特定的脱氧核苷酸序列重组DNA(2)胚胎移植维持培养液的pH(3)植物组织培养让害虫吞食转基因棉花的叶子,观察害虫的存活情况,以确定其是否具有抗虫性状7如下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答:(1)在基因工程中,AB为_技术,利用的原理是_,其中为_过程。(2)加热至94 的目的是使DNA中的_键断裂,这一过程在细胞内是通过的作用来完成的。(3)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板链延伸,最终合成两条DNA分子,此过程中原料是,遵循的原则是_。(4)目的基因导入绵羊受体细胞常用_技术。(5)BD为抗虫棉的培育过程,其中过程常用的方法是_,要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出在个体生物学水平上的鉴定过程:_。【解析】(1)AB为体外DNA复制即PCR技术,与体内DNA复制原理相同,解旋方式不同,PCR技术是用高温变性使其解旋。(2)94 时DNA双链解旋,破坏的是两条链之间的氢键,而在细胞内DNA复制解旋时解旋酶起相同作用。(3)PCR技术与DNA复制过程原理是相同的,即碱基互补配对,原料均为4种脱氧核苷酸。(4)转基因动物培育中目的基因的导入常用显微注射技术。(5)将目的基因导入植物细胞常用的方法为农杆菌转化法,其优点是能将外源基因导入到受体细胞的染色体DNA分子上;在个体水平上鉴定,即通过生物体所体现的性状来判断,抗虫棉应具有的性状为害虫吞食后使其死亡。【答案】(1)PCRDNA复制DNA解旋(2)氢解旋酶(3)4种脱氧核苷酸碱基互补配对原则(4)显微注射(5)农杆菌转化法让害虫吞食转基因棉花的叶子,观察害虫的存活情况,以确定性状8科学家通过基因工程方法,将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内,并成功实现了表达,从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株抗虫棉。其过程大致如下图所示。(1)基因工程的操作程序主要包括的四个步骤是_、_、_、_。(2)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒,其上有T-DNA,把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA_的特点。(3)Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程,在基因工程中称为_。(4)将目的基因导入受体细胞的方法有很多种,该题中涉及的是_。(5)目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是_,这需要通过检测才能知道,检测采用的方法是_。【答案】(1)目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定(2)可转移到受体细胞并且整合到受体细胞染色体DNA上(3)转化(4)农杆菌转化法(5)目的基因是否插入了受体生物细胞的染色体DNA上DNA分子杂交技术9酵母菌的维生素、蛋白质含量高,可用来生产食品和药物等。科学家将大麦细胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中,获得的啤酒酵母菌种可产生LTP1蛋白,并酿出泡沫丰富的啤酒。基本的操作过程如下:(1)该技术定向改变了酵母菌的性状,这在可遗传变异的来源中属于_。(2)从大麦细胞中可直接分离获得LTP1基因,还可采用_方法获得目的基因。本操作中为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内,所用的载体是_。(3)要使载体与LTP1基因连接,首先应使用_进_行切割。切割完成后,采用酶将载体与LTP1基因连接。(4)有C进入的酵母菌分别在含有青霉素、四环素的两种选择培养基上的生长情况是_。(5)除了看啤酒泡沫丰富度外,还可以怎样检测LTP1基因在啤酒酵母菌中的表达?_。【答案】(1)基因重组(2)人工合成质粒(3)限制性核酸内切酶DNA连接(4)在含有青霉素的培养基上能存活,但在含有四环素的培养基上不能存活(5)检验转基因啤酒酵母菌能否产生LTP1蛋白1.3、1.4基因工程的应用蛋白质工程的崛起1(2010年黄冈模拟)科学家已能运用基因工程技术,让羊合成并由乳腺分泌抗体,相关叙述中正确的是()该技术将导致定向变异DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料受精卵是理想的受体ABC D【答案】B2如下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是()A将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法B将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上,能生长的只是导入了重组质粒的细菌C将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上,能生长的就是导入了质粒A的细菌D目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长【答案】C3基因污染是指在天然物种的DNA中嵌入了人工重组基因,这些外来基因可随被污染生物的繁殖、传播而发生扩散。下列叙述错误的是()A基因工程间接导致了基因污染B基因工程破坏了生物原有的基因组成C基因工程是通过染色体的重组发生基因交换,从而获得了生物的新性状D人类在发展基因工程作物时,没有充分考虑生物和环境之间的相互影响【答案】C4蛋白质工程与基因工程相比,其突出特点是()A基因工程原则上能生产任何蛋白质B蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质C蛋白质工程可以不通过转录和翻译来实现D蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第三代基因工程【答案】B5(2010年南京模拟)下列关于蛋白质工程的说法,正确的是()A蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子C对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的D蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的【解析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。由于基因决定蛋白质,因此,要对蛋白质的结构进行设计改造,还必须从基因入手。与基因工程不同,蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。【答案】B6下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答:(1)能否利用人的皮肤细胞来完成过程?_。为什么?_。(2)过程必需的酶分别是_、_;过程所用的酶是_;过程所用的酶是_。(3)取自大肠杆菌的物质B,其名称是_,在基因工程中起_的作用。B上通常带有某些标记基因,其作用是_。(4)为使更易进行,可用_处理D,以增大其通透性。(5)图中的B应该符合的条件为_。能起到B的作用的有_,图中的D是基因工程中的_细胞,能作为这种细胞的有_等。【答案】(1)不能皮肤细胞中的胰岛素基因未表达,不能形成胰岛素mRNA(2)逆转录酶解旋酶限制酶DNA连接酶 (3)质粒载体便于筛选出导入了重组质粒的工程菌(4)CaCl2(5)能在宿主细胞中稳定保存并复制、具标记基因、具多个限制酶切割位点质粒、动植物病毒、噬菌体衍生物受体大肠杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞7(2010年全国重点中学模拟)干扰素能抵抗所有病毒引起的感染,对治疗癌症及白血病也有一定疗效。传统的干扰素生产方法是从人的淋巴细胞中提取,每升人的血液只能提取0.05 g干扰素。而科学家通过基因工程方法可以在酵母细胞内获得大量的干扰素(如下图所示)。请据图回答有关问题:(1)可以获得目的基因的方法是_。(2)通过基因工程可以把人的干扰素基因插入到酵母菌的基因中,其原因是_。(3)图中X的名称是_,它的组成除了目的基因外,还必须有_。(4)要实现c过程,通常要对酶母菌细胞用_进行处理。要检测干扰素基因是否成功导入到酵母菌细胞,所用到的方法是_。要检测基因是否成功表达,除了进行分子检测之外,有时还需要进行_的鉴定。【答案】(1)从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成(2)人和酵母菌的DNA都有规则的双螺旋结构,都遵循碱基互补配对原则(3)重组DNA(重组质粒、重组载体)标记基因、启动子、终止子(4)钙离子DNA分子杂交技术个体生物学水平8如下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出杀虫晶体蛋白基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫植物的图解。请分析回答:(1)写出b过程的表达式:_。(2)人工合成目的基因的方法有:_;_。(3)将目的基因和载体(质粒)结合的工具酶有:_酶和_酶。(4)科学家计划从哺乳动物的乳汁中提取某种抗体,应将控制抗体合成的基因导入该种动物的_中,导入基因成功表达的标志是_。【解析】应用基因工程技术,从苏云金芽孢杆菌中提取杀虫晶体蛋白基因(目的基因)导入棉花细胞中形成转基因抗虫棉,Bt基因的表达使棉花细胞中合成了原毒素,使采食棉花的昆虫中毒死亡。要使某种动物的乳汁中含有某种抗体,目的基因一般导入受精卵中。这样,由此受精卵发育成的哺乳动物的所有体细胞中都含有目的基因。【答案】(1)Bt基因mRNA原毒素(晶体蛋白)(2)以目的基因的mRNA为模板反转录为单链DNA,然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA依照蛋白质的氨基酸序列,通过密码子推算出基因序列,然后直接合成目的基因(3)限制性核酸内切DNA连接(4)受精卵动物乳汁中含此种抗体2.1植物细胞工程1有关全能性的叙述,不正确的是()A受精卵在自然条件下能形成完整个体,因此全能性最高B生物体内细胞由于分化,全能性不能表达C卵细胞与受精卵一样,细胞未分化,全能性很高D在一定条件下植物细胞离体培养能表现出全能性【解析】 此题需从以下几个方面分析:首先,受精卵是个体发育的起点,在自然条件下,通过细胞的分裂和分化形成完整的个体,所以全能性最高;第二,体内的每一个具核细胞在理论上都具有全能性,都有发育成完整个体的潜能,但由于在生长发育过程中基因选择性表达而分化成不同的组织,全能性不能表达;第三,卵细胞是生殖细胞,是高度分化的细胞,全能性较高;第四,分化的植物细胞具有全能性,但要表达需脱离母体的限制。【答案】C2有关原生质体的下列叙述中,正确的是()组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的细胞质被脱掉细胞壁的活的植物细胞是原生质体原生质体只能用于植物细胞工程A BC D【解析】细胞壁不是原生质体的成分,组成原生质体的主要成分是蛋白质、核酸,全部的细胞膜、细胞质、细胞核是细胞工程中的原生质体,细胞膜、液泡膜以及两者之间的细胞质构成的是原生质层。【答案】B3要想通过体细胞杂交技术获得杂种植物,下列各套步骤中正确的是()A分离原生质体诱导原生质体融合再生细胞壁组织培养杂种植株B分离原生质体原生质体自然融合再生细胞壁组织培养杂种植株C病毒诱导原生质体融合组织培养杂种植株D分离原生质体脱分化再分化杂种植株【答案】A4下列有关植物细胞与组织培养的过程,错误的是()A花药、胚不能作为组织培养的材料B植物细胞具有全能性C外植体是指用于培养的植物组织或器官D外植体可诱导出愈伤组织【解析】考查植物组织培养的有关知识。植物组织培养的理论根据是植物细胞的全能性。但是,在一个完整的植株上,各部分的体细胞只能表现一定的形态,承担一定的功能,这是由于受具体器官或组织所在环境影响的缘故。植物体的一部分一旦脱离原来所在的器官或组织,处于离体状态时,在一定的营养、激素等外界条件下,外植体(指从植物体上切下来的离体器官或组织),会进行细胞分裂,脱分化形成愈伤组织。将处于脱分化状态的愈伤组织移植到合适的培养基上继续培养,愈伤组织就会进行再分化,并形成具有根、茎、叶的完整植株。组织培养根据培养的对象,可以分为器官培养、组织培养、胚胎培养、细胞培养和原生质体培养(用机械、酸处理或酶溶解等方法除去细胞壁,分离出原生质体进行培养)等,胚是可以作为组织培养材料的。【答案】A5下列关于植物体细胞杂交的叙述,不正确的是()A需用适当的酶除去细胞壁获得原生质体B需用物理或化学的方法促使两个原生质体融合C杂种细胞需通过脱分化与再分化过程才能形成杂种植株D两个二倍体体细胞杂交所获得的杂种植株还是二倍体【解析】D选项中两个二倍体细胞杂交是指体细胞杂交,是植物细胞杂交技术,所获得的杂种植株是四倍体还是二倍体要看两个细胞的来源,不能笼统地说是四倍体或二倍体。【答案】D6(2010年烟台模拟)植物体细胞杂交能解决不同种植物之间由于生殖隔离而不能进行有性杂交的问题。植物体细胞杂交过程不涉及()A使用限制性内切酶B使用纤维素酶和果胶酶C诱导两种不同的细胞融合D选择利于杂种细胞分裂和分化的培养基【解析】植物体细胞杂交首先要获取不同植物的体细胞,然后促其融合,最后将杂种细胞培育成新植物体。限制性内切酶主要应用于基因工程。【答案】A7下图所示胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作,接入试管后,在一定的条件下,形成试管苗的培育过程,请据图回答下列问题:(1)要促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和激素。营养物质包括_和小分子有机物,激素包括细胞分裂素和_两类植物激素。(2)此过程依据的原理是_。A和B阶段主要进行的分裂方式是_,B阶段除了细胞分裂外,还进行细胞_等。(3)此过程要无菌操作,主要是指对_进行灭菌消毒,B阶段需要光照,原因是_。(4)试管苗的根细胞没有叶绿素,而叶的叶肉细胞具有叶绿素,这是基因_的结果。【解析】 植物组织培养是用离体的植物组织、器官或细胞接种到经消毒灭菌的培养基中,培养基含有供组织细胞生长发育所需要的无机物和小分子有机物,还有供调节细胞脱分化和再分化的细胞分裂素和生长素。由外植体发育到试管苗,脱分化阶段细胞进行有丝分裂,再分化阶段愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗,此阶段需要光照,原因是叶中叶绿素的合成需要光照条件。【答案】(1)无机物生长素(2)细胞的全能性有丝分裂分化(3)培养基芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件(4)选择性表达8美国科学家将分离得到的成熟的胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养,由单个细胞发育成了完整的新植株。过程图解如下,回答与之有关的问题:(1)科学家所用的这种生物技术叫做_。依据的理论基础是植物细胞具有性。过程称为_,过程称为_,C经_形成D。(2)通过过程产生的愈伤组织细胞与根的韧皮部细胞在染色体的数目上是否相同?_。染色体上所含的遗传物质是否相同?_。细胞的形态结构是否相同?_。(3)在培养过程中,除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外,还需要在培养基中加入_。同时,在培养过程中,除必需的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程必须保证_。(4)从育种的角度来看,植物组织培养与有性繁殖相比,优势主要有(列举两条):_。_。(5)与植物组织培养的培养基相比,用于动物细胞培养的培养液除含有水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸等之外,通常还要添加_。【解析】图示展示了一个植物组织培养的过程,培养的过程中经过脱分化和再分化,再分化过程中有细胞分裂和细胞分化。在整个培养过程中细胞的分裂方式都是有丝分裂。因此,愈伤组织细胞与根的韧皮部细胞在染色体数目上是相同的,但由于基因的选择性表达,不同组织细胞的形态结构不同;在培养的整个过程中除了适宜的物质条件外,还必须保证无菌;植物组织培养能保持母本的优良性状,且培养周期短;植物组织培养与动物细胞培养的不同点是:动物细胞培养时需向培养基中加入动物血清。【答案】(1)植物组织培养全能脱分化再分化细胞分裂和细胞分化(2)相同相同不同(3)植物激素(或植物激素类似物)无菌(4)能保持母本的优良性状;培养周期短,繁殖效率高;能培育无病毒植物(列出两条即可)(5)动物血清9“白菜甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种,它具有生长周期短,耐热性强和易储存等优点。下图是“白菜甘蓝”培育过程示意图,请完成下列有关问题:(1)由杂种细胞D培育成“白菜甘蓝”植株,采用的技术手段是_。该过程说明植物细胞具有_。(2)要制备“白菜甘蓝”的人工种子,要在e步骤选取具有生根发芽能力的_(结构),包裹上人造种皮制得。(3)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是_,融合依据的原理是_。(4)要获得上图中白菜和甘蓝的原生质体,首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。现提供以下材料和用具:紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等。请你从中选择合适的材料,完成下面检验是否已除去细胞壁实验的方法步骤,并预测和解释实验结果。主要实验步骤: 取适宜浓度的蔗糖溶液,加入适量纤维素酶和果胶酶配制成细胞壁分解液。其中选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是:适宜浓度的蔗糖溶液_。检验细胞壁分解液除去细胞壁。第一步:用镊子撕取一小块紫色洋葱鳞片叶放在载玻片中央,滴加适量细胞壁分解液,制成临时装片。得到实验组装片。第二步:_。第三步: _。结果预测和解释: _。【答案】(1)植物组织培养全能性(2)胚状体(3)聚乙二醇(PEG)细胞膜的流动性(4)可防止原生质体过度吸水涨破(保持原生质体正常的形态)第二步:用适宜浓度的蔗糖溶液代替细胞壁分解液,其他操作同第一步,得到对照组装片第三步:在显微镜下观察比较实验组和对照组装片洋葱细胞的形态结果预测和解释:实验组装片的洋葱细胞呈分散的紫色球形,表明细胞壁已被分解;对照组装片的洋葱细胞呈相互连接的紫色多边形,表明细胞壁未被分解10据下图回答下列问题:(1)过程是用_处理植物细胞的细胞壁,后经过程诱导原生质体融合,实际融合的过程中原生质体可能会形成_种细胞团(只考虑两个细胞融合的情况)。是的过程,与此过程密切相关的细胞器是_。(2)在过程培养中,首先要经过_进而进行_才能形成杂种植物的苗,其细胞分裂方式为_。(3)若番茄细胞内含A条染色体,马铃薯细胞内含B条染色体,将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育(假设能成功),得到的后代应含_条染色体,还必须用_来处理幼苗,才能得到可育的番茄马铃薯植株,此时体细胞中含有_条染色体。(4)若番茄是二倍体,马铃薯是四倍体,则杂种植株为_倍体。【解析】 (1)图示表示植物体细胞杂交过程,图中表示利用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体的过程;原生质体融合后可能形成三种细胞,即两个番茄原生质体融合、两个马铃薯原生质体融合、一个番茄原生质体与一个马铃薯原生质体融合;图中是杂种细胞壁再生的过程,与该过程密切相关的细胞器是高尔基体,因高尔基体与植物细胞壁形成有关。(2)杂种细胞首先经过脱分化进而进行再分化才能形成试管苗。细胞分裂方式为有丝分裂。(3)番茄产生的生殖细胞中含有A/2条染色体,马铃薯产生的生殖细胞中含有B/2条染色体,利用杂交育种获得的后代体细胞中所含有的遗传物质各包含两亲本的一半,即,此植株是高度不育的,必须利用秋水仙素处理使其染色体数目加倍,即细胞中染色体数目为(A+B)条,植株可育。(4)番茄细胞含2个染色体组,马铃薯细胞含4个染色体组,则杂种植物含6个染色体组,为异源六倍体。【答案】(1)纤维素酶和果胶酶3细胞壁再生高尔基体(2)脱分化再分化有丝分裂(3)秋水仙素A+B(4)六2.2动物细胞工程1(2010年无锡模拟)在生物工程中一般都要用到酶,下列酶中属于动物细胞工程最常用的工具酶的是()A限制酶 BDNA连接酶C果胶酶 D胰蛋白酶【解析】基因工程用到的是限制酶和DNA连接酶;植物体细胞杂交技术用到的是果胶酶;动物细胞工程用到的是胰蛋白酶,它的作用是使动物组织中的细胞相互分散成为单个的细胞,便于在液体培养基中培养。【答案】D2下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体B培养中的人B细胞能够无限地增殖C人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞【解析】能产生抗体的细胞应为浆细胞而不是效应T细胞,瘤细胞才具有无限增殖的特点;人成熟的红细胞,因无细胞核所以进行细胞培养不能形成细胞株。故正确答案是D。【答案】D3(2010年济宁质检)用a表示骨髓瘤细胞,b表示效应B细胞,则细胞融合过程中两次筛选的目的分别为()Aa、aa、ab、bb、ba、aa、abab培养Ba、aa、ab、bb、bab、bb、bab培养Ca、aa、ab、bb、bab产生特定抗体的ab培养Da、aa、ab、bb、baa能无限增殖的aa培养【解析】第一次筛选是选出杂交瘤细胞即ab,第二次筛选是选出产生特异性抗体的ab细胞。【答案】C4利用细胞工程方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是()A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法不一定能诊断出SARS病毒感染者【答案】C5关于单克隆抗体的生产和应用,错误的是()A对小动物注射特定抗原以获取所需的B淋巴细胞B融合并筛选特定的杂交瘤细胞,原代培养发生遗传物质改变后才能进行传代培养C特定的单克隆抗体可制成试剂,用于检测人体是否受某种抗原的感染D治疗癌症的“生物导弹”原理之一是利用单克隆抗体的特异性识别癌细胞【答案】B6(2010年北京海淀区抽查)用动物细胞工程技术制备单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是()A将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞B用氯化钙作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体D该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体【解析】淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合需要灭活的病毒、聚乙二醇或物理因素来诱导,氯化钙不能作为诱导剂,氯化钙的作用是在基因工程中用于增大细胞壁的通透性,便于重组质粒进入微生物的细胞内。【答案】B7近年来,我国死于狂犬病的人数有上升趋势。狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能消除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。请根据上述材料,回答下列问题:(1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病,制成减毒活疫苗需要用_培养。(2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是_。(3)下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:1图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是_细胞,该细胞能够产生_。从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是_。图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的_、聚乙二醇或电激等诱导。特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有等优点。(4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有_。(5)单克隆抗体的制备还有哪些用途?_。【答案】(1)活细胞(2)动物细胞融合技术(3)B淋巴抗体抗原(或狂犬病病毒)病毒(或仙台病毒)特异性强、灵敏度高、并可以大量制备(4)无菌、无毒、适宜温度和pH、充足的气体、营养物质(5)作为诊断试剂、运载药物(或“生物导弹”)等8(2010年海口质检)科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造,生产出效果更好的鼠人嵌合抗体,用于癌症治疗。下图表示形成鼠人嵌合抗体的过程。请据图回答:(1)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是_。(2)将_注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得淋巴细胞,其中至少1个淋巴细胞能产生抗该抗原的抗体。(3)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_、_的特性。(4)单克隆抗体制备过程运用了_和_的动物细胞工程技术手段。(5)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基有所不同的是,还含有_。(6)在动物细胞融合过程中,需要将所选取的组织细胞分散开,以利于细胞融合,可用_处理离体组织细胞使之分散开。(7)鼠源杂交瘤抗体与普通血清抗体相比较,具有_的特点。(8)改造鼠源杂交瘤技术,生产鼠人嵌合抗体,属于_(生物工程)的范畴。图示过程是根据预期的_,设计_,最终必须对_进行操作。(9)经过改造的鼠人嵌合抗体,与鼠源杂交瘤抗体相比较,突出的优点是_。【解析】(1)由于浆细胞没有无限增殖的能力,因此不能通过培养浆细胞生产单克隆抗体。(2)(3)单克隆抗体制备时,需要先把抗原注入小鼠的体内,刺激其产生浆细胞然后从小鼠的脾脏中把浆细胞分离出来,与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞;杂交瘤细胞具有无限增殖的特性,也具有合成抗体的能力。(4)单克隆抗体制备过程中使用了细胞融合、细胞培养等技术。(5)动物细胞培养液中,必须有动物血清。(6)用胰蛋白酶可以把动物组织分散成单个细胞。(7)单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特性。(8)从图中看改造鼠源杂交瘤技术,生产鼠人嵌合抗体,属于蛋白质工程的范畴。(9)鼠人嵌合抗体的优点是副作用减少。【答案】(1)浆细胞不能无限增殖(2)抗原(3)在体外大量繁殖产生特异性抗体(4)动物细胞融合动物细胞培养(5)动物血清(6)胰蛋白酶(7)特异性强、灵敏度高(8)蛋白质嵌合抗体的功能嵌合抗体的结构基因(9)对人体的不良反应(或过敏反应等副作用)减少专题 3 胚胎工程1关于受精过程的叙述错误的是()A获能后的精子与卵子相遇后,释放顶体酶穿过透明带进入放射冠B透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障C精子与卵黄膜相互融合,精子入卵D雄原核形成的同时,卵子完成减数第二次分裂【解析】本题考查受精原理。哺乳动物的受精过程主要包括:精子穿越放射冠和透明带,进入卵黄膜,原核和配子结合。获能后的精子与卵子相遇后,首先释放顶体酶穿过放射冠进入透明带,当精子接触卵黄膜的瞬间,会产生透明带反应,阻止多个精子进入透明带。精子与卵黄膜相互融合,精子入卵后,形成雄原核,此时卵子完成减数第二次分裂,形成雌原核,二者相互融合形成受精卵,受精过程完成。【答案】A2下列有关动物胚胎移植的叙述中,错误的是()A受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植B受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态C超数排卵技术要使用一定的激素D试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行【答案】A3(2010年南京模拟)有关海星原肠胚的叙述中,不正确的是()A原肠胚已分化成三个胚层B原肠胚形成过程中DNA总量增加C原肠胚的发育是基因选择性表达的结果D原肠胚所含的有机物总量增加【解析】原肠胚的特征是具有三个胚层,有缩小的囊胚腔,有原肠腔。原肠胚的形成过程中伴随着细胞分裂,细胞数目增多,而每个细胞内遗传物质的量在分裂前后都相等,所以随着细胞分裂,DNA总量增加。原肠胚发育形成各种组织和器官,这是细胞分化,细胞分化的实质是基因的选择性表达。在胚胎早期发育过程中,营养全部来自受精卵,无法从外界获得,随着生命活动消耗的增加,有机物的总量是减少的。【答案】D4胚胎分割是一种现代生物技术,关于这一技术的叙述正确的是()A胚胎分割可以将早期胚胎任意分割成多份B胚胎分割技术可以获得同卵双胎或多胎C胚胎分割技术属于有性生殖方式,因此不属于克隆D胚胎分割技术可以分割任意时期胚胎【解析】胚胎分割常选择桑椹胚或囊胚时期的胚胎,一般分割成同卵胎,并不能任意分割成多份。胚胎分割可以看作是动物无性繁殖克隆的方法。【答案】B5以下是制定并研究设计的“试管牛”工厂化生产技术流程,其中正确的顺序应是()卵母细胞的采集和培养精子的采集和获能画出“试管牛”工厂化生产技术流程图受精胚胎的早期培养()A BC D【解析】“试管牛”工厂化生产的流程是卵母细胞的采集和培养精子的采集和获能受精胚胎的早期培养画出“试管牛”工厂化生产技术流程图。【答案】B6中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作,通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵细胞中,在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎,这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关克隆大熊猫胚胎的叙述中,错误的是()A在形成早期胚胎的过程中,依次经历了卵裂、桑椹胚、囊胚、原肠胚等几个阶段B兔子卵细胞质的作用是激发大熊猫细胞核的全能性C克隆出的早期胚胎中,各细胞间具有相同的遗传信息D在形成早期胚胎的过程中,尚未出现细胞的分化【解析】在早期胚胎的原肠胚时期,已经有了最初的分化。【答案】D7如下图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程,请回答下列问题:(1)A细胞是_,在进行体外受精前要对精子进行_处理。(2)进行胚胎分割时,应选择发育到_时期的胚胎进行操作。(3)指的是_。(4)通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同遗传性状的根本原因是。(5)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意_。(6)受体母牛必须和供体牛属于_。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_。【解析】本题考查胚胎工程的应用。将获能精子与处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞融合即可得到受精卵,受精卵经过体外培养形成早期胚胎,为了快速繁育优良品种,可以采用胚胎分割的技术手段,即选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割,分割后产生的个体因为所含的遗传物质相同,所以性状表现很相似。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分割,以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。大量的研究已经证明,受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。【答案】(1)(次级)卵母细胞获能(2)桑椹胚或囊胚(3)囊胚腔(4)具有相同的遗传物质(5)胚胎分割要将内细胞团均等分割,以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育(6)同一物种受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应8如下图是与生产转基因奶牛有关的部分过程图解。据图请回答下列问题:(1)图甲中过程属于转基因奶牛培育过程中的_阶段,此过程中用到的酶包括_。(2)B的受体细胞一般选择_(名称)。(3)过程发生时,防止多精入卵的反应叫_、_,D细胞发育的过程中,细胞开始分化发生在_期。(4)若要同时获得多头相同的转基因小牛,可对图乙中的E进行_,操作过程需要特别注意的问题是_。【答案】(1)基因表达载体的构建限制酶、DNA连接酶(2)受精卵(3)透明带反应卵黄膜的封闭作用E囊胚(4)胚胎分割内细胞团细胞均等分割9(2010年青岛质检)胚胎干细胞的研究是目前生物学和医学界的一大热点,根据下列材料信息分别回答相关问题。材料1:哺乳动物的胚胎干细胞(embryonic stemcell)简称ES或EK细胞,ES细胞的分离和培养成功是胚胎工程中的重大成就之一,在基础生物学、畜牧学和医学上都具有十分重要的应用价值。材料2:在动物实验方面,用ES细胞诱导分化出的某些组织细胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑难病症。也许在不久的将来,当我们的身体某一类细胞功能出现异常或退化时,就可以通过诱导ES细胞定向分化来及时修补。材料3:ES细胞也是研究体外细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中,能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子,如牛黄酸等化学物质时,就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化,这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段。同时胚胎干细胞还可用于对哺乳动物个体生长和发育规律的研究。(1)胚胎干细胞是由_中分离出来的一类细胞。(2)ES细胞具有胚胎细胞的特性,在形态上,表现为_;在功能上,具有发育的_性,即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。(3)随着组织工程技术的发展,通过ES细胞体外诱导分化,还可以培养出人造组织器官,解决目前临床上存在的_的问题。(4)由于ES细胞可以分化为胚胎的内胚层、_中任何一类细胞,于是可以将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的_,通过组织化学染色,了解ES细胞的分化特点,这就为研究胚胎发育过程中的细胞分化及组
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