《除草剂的生物测定》PPT课件.ppt

农药生物测定多媒体课件,1,第三章 除草剂的生物测定,前言 第一节 除草剂生物测定试材的确定和培育 第二节 除草剂生物测定的鉴定技术 第三节 除草剂生物测定方法 第四节 除草剂生物测定技术的应用,农药生物测定多媒体课件,2,一、除草剂生物测定的定义及意义 二、除草剂生物测定的基本原理 三、除草剂生物测定技术的优缺点,野 燕 麦,菟 丝 子,狗 芽 根,第三章 除草剂的生物测定,农药生物测定多媒体课件,3,一、除草剂生物测定的定义及意义,除草剂生物测定是指利用生物体（主要指有害植物）对除草剂的反应来测定除草剂及其效果的基本方法。 其目的在于： 1.筛选除草剂,了解除草剂防治的杂草种类及适用的作物范围； 2.测定除草剂在土壤中的残留动态（半衰期等），吸附、淋溶、持效期、光解、挥发速度、微生物降解等； 3.用于除草剂的定量研究； 4.了解不同除草剂在生物体内吸收、运转、作用部位、代谢速度等，为制订除草剂的安全使用标准提供科学依据。,第三章 除草剂的生物测定,农药生物测定多媒体课件,4,二、除草剂生物测定的基本原理,利用活的生物体或生物体器官，在生长、形态等方面对化学物质（除草剂）的不同反应来确定除草剂的浓度。通常选用对除草剂较敏感的生物材料作生测试材。 例：单子叶植物对拉索、拿捕净十分敏感，可用稗草、马唐、谷子等来测定这类除草剂。五氯酚钠对鱼剧毒，可用鱼来测定水中五氯酚钠的残毒。,第三章 除草剂的生物测定,稗草,马唐,谷子,农药生物测定多媒体课件,5,使生物体的敏感反应成为生物测定方法，必须符合下列条件： 1、在一定浓度范围内，生物体内对除草剂的反应随浓度的增加而有规律的增加； 2、在环境条件相似的情况下，用同一种试材重复试验时，对同种除草剂的反应可以重现。,二、除草剂生物测定的基本原理,第三章 除草剂的生物测定,农药生物测定多媒体课件,6,三、除草剂生物测定技术的优缺点,（一）优点: 1.可测定不同类型的除草剂，了解其作用方式、使用剂量、降解速度等。测试材料可以是作物、杂草、动物及微生物等； 2.精确度高：测试材料和测试条件一致时，它们对不同种类及不同剂量的除草剂的反应有较高的灵敏度； 3.设备较简单。,第三章 除草剂的生物测定,农药生物测定多媒体课件,7,（二）缺点 1.周期长、费时间：一般3-7 d，最快24 h，个别需1个月以上； 2.测定条件较严格：恒温、恒湿、光照、养分等条件控制需一致； 3.除草剂中所含杂质对除草剂的药效有一定影响，有时引起药害。 因此，除草剂的生物测定技术也只能在一定条件和范围内应用。,三、除草剂生物测定技术的优缺点,第三章 除草剂的生物测定,农药生物测定多媒体课件,8,试材的确定和培育 创造试材所需的环境条件,第一节 除草剂生物测定试材的确定和培育,第三章 除草剂的生物测定,农药生物测定多媒体课件,9,一、试材的确定和培育,1.作物试材的确定和培育,因此，应选择对除草剂敏感的作物或其器官作为生测材料。,每一种除草剂都有其应用范围和禁用对象，因为有的作物对某些除草剂有抗性，而对另一些除草剂敏感。 敏感或不敏感随作物生育期和生长状况的不同也有很大差别，甚至同种作物的不同品种、一株作物的不同部位对除草剂的敏感度都有差别。,农药生物测定多媒体课件,10,农药生物测定多媒体课件,11,如除草醚、氟乐灵、敌草隆等以土壤处理为主的除草剂，要求试材是作物种子或刚发芽的幼苗。 为使测试结果精确一致，要求成熟度好、大小一致、发芽率高、发芽整齐、品种纯度高的作物种子。若为玉米、高粱等大穗作物最好采用同一穗的中部种子，发芽生长整齐，生物测定结果更精确。高粱种子应在试验前20 h将种子放在培养皿中加适量水，置25-28培养箱中催芽，待芽长出1-2mm时取出备用。 若用不同叶龄期的幼苗，需将种子播种在小盆钵中，播种深度一致，所用土壤要求过筛、肥力和湿度一致，放在温室中或温暖向阳处，也可用玻璃或塑料薄膜增温保湿，待幼苗出土后，生长到所需叶龄期。,一、试材的确定和培育,1.作物试材的确定和培育,作物试材的培育：不同性质的除草剂要求不同作物试材及其生育状态。,农药生物测定多媒体课件,12,不同种类的杂草及其不同生育期、不同器官对不同种类除草剂及其不同浓度都有不同反应，因此，必须选择对供试除草剂较敏感的杂草或其部位为生测试材。,一、试材的确定和培育,2、杂草试材的确定和培育,农药生物测定多媒体课件,13,杂草试材的培育：不同种类和不同性质的除草剂的防除对象不同，作用部位也不同，所以测定不同除草剂时应选择不同的试材。 例如：敌草隆、阿拉特津、丁草胺等都是以杀刚发芽（露白）的杂草幼芽为主的土壤处理，所以，要求供试杂草种子大小一致、发芽率高、发芽整齐，否则，因杂草种子成熟度不一致、休眠期长短不一、发芽不整齐等，致使试验结果误差较大。,一、试材的确定和培育,2、杂草试材的确定和培育,农药生物测定多媒体课件,14,二、创造试材所需的环境条件,第一节 除草剂生物测定试材的确定和培育,作物、杂草种子萌发、幼苗生长都需一定的水分、温度和氧气。有的还需要一定的光照等条件。 不同作物和杂草生长在不同季节和环境中，形成了对环境条件的不同要求。 如野燕麦生长在东北、西北较冷凉地区，因而最适生长温度为10-18；而绿狗尾24-32时2-3d内发芽，稗草起于南方，最适生长温度为17-32，燕麦、小麦要求较冷凉条件，大豆、芥菜要求较温暖条件，而棉花、水稻、西瓜等要求较高温度。 对水分的要求除水稻需高含水量的土壤甚至淹水条件外，一般要求最大田间持水量70%-90%为宜。,农药生物测定多媒体课件,15,二、创造试材所需的环境条件,采用培养箱进行种子发芽较易控制温度。如高粱在25-28时15-20h就能发芽露白，稗草在30-33时2-3d内发芽，水稻在同样温度下3d后才能发芽。温室内的温度虽不如培养箱那样稳定，但有光照条件。 温室内一般用盆钵进行试验。土壤、水分条件较接近于田间。人工气候室能较好地控制温度、湿度、光照、通风等，可满足生测中特殊试验要求的条件。 小区试验更接近于生产条件，其实验结果可验证室内测定结果。,16,农药生物测定多媒体课件,第三章 除草剂的生物测定,猪殃殃,第二节 除草剂生物测定的鉴定技术,一、除草剂活力的鉴定方法 二、除草剂的药效评价,17,农药生物测定多媒体课件,一、除草剂活力的鉴定方法,(一) 萌芽鉴定 许多除草剂能强烈抑制敏感植物种子的萌发，或明显地抑制幼芽及胚根的生长，如除草醚、2,4-D、拉索等。随除草剂剂量的变化，抑制反应也有相应变化，能较精确的测定剂量与抑制率之间的关系。 一般情况下，典型的根系或初生茎叶的受抑制症状可在处理后，培养 24-96 h 观察到。,第二节 除草剂生物测定的鉴定技术,18,农药生物测定多媒体课件,（二）植株鉴定 通过测定供试植物的生长量来确定除草剂对试材的抑制程度及除草剂的活性。通常以鲜重为指标。如对试验要求较精确时，还要测定实验植株或特定部位的干重。 许多光合作用抑制剂在伤害症状出现前，茎叶的生长或株高就产生了差异，它可代替称重来测定除草剂的活性。但测试植株的不同叶龄和生育期对除草剂的敏感性不同，一般禾本科植物测定叶片长度，豆科植物测定第一复叶的叶柄长度来鉴定。,一、除草剂活力的鉴定方法,第二节 除草剂生物测定的鉴定技术,第三章 除草剂的生物测定,19,农药生物测定多媒体课件,在肉眼可见的反应出现之前，试材生理生化的变化往往可以测定出来。植物呼吸和光合作用以及所含成分或新陈代谢物质的变化等都可以作为测定的指标。另外，以植物的耗水量表示除草剂的活性，可能比植物重量具有更大的敏感性。 测定用抑制光合作用的除草剂处理过的植株或子叶的光合速率，接触除草剂几小时后，CO2的交换量显著减少。 生长在含有扑草净的培养基中的植物，其水分消耗在药害症状出现前几天就有变化，可用水分消耗量作为生测指标。黄化反应可由分光光度计或直观地测定叶绿素含量来估量。另外，也可用根系活力作为生测指标。,一、除草剂活力的鉴定方法,第二节 除草剂生物测定的鉴定技术,第三章 除草剂的生物测定,（三）生理和形态效应鉴定,20,农药生物测定多媒体课件,某些除草剂对植物的典型症状可用于定性测定，症状的强度与剂量呈正比关系，也可用于定量测定2,4-D的存在与否。 除草剂所引起的特殊反应常被发展成定量生物测定技术。如杀草强（ATA）引起植物向地性的丧失和棉花幼苗根毛发育的变化；当种子用红外光处理后，几种三氮苯类除草剂能促进莴苣种子的萌发和棉花胚轴的张开；杀草丹等氨基甲酸酯类除草剂能明显抑制稗草等敏感植物的心叶生长。,一、除草剂活力的鉴定方法,（三）生理和形态效应鉴定,21,农药生物测定多媒体课件,二、除草剂药效评价,第二节 除草剂生物测定的鉴定技术,第三章 除草剂的生物测定,对不同类型的除草剂和不同种类的杂草，其防除效果的评价标准不同。常用0（或1）-5（或10）的分级法。,受处理的杂草、作物的高度、重量、密度等指标与对照按下列公式计算杂草抑制率或防治率并进行比较：,22,农药生物测定多媒体课件,欧洲杂草研究会用目测法进行9级法统计，国内逐渐采用。,二、除草剂药效评价,23,农药生物测定多媒体课件,一、种子发芽测定法,第三节 除草剂生物测定技术,第三章 除草剂的生物测定,二、植株生长量测定法,三、生理生化指标测定法,四、症状鉴定法,五、愈伤组织鉴定法,24,农药生物测定多媒体课件,一、种子发芽测定法,（一）试验方法 发芽试验的容器通常为培养皿和小烧杯。使用前首先对器皿进行清洗和干热灭菌，然后加入适量药液，在发芽床上播种。 发芽床：滤纸、脱脂棉或消毒过的砂子铺放在培养皿内而制成。,第三节 除草剂生物测定技术,25,农药生物测定多媒体课件,一、种子发芽测定法,1. 供试植物种子（或在催芽前）先浸入0.2%次氯酸钠溶液中消毒15 min，用自来水洗涤并用流水浸泡2-6 h，再用蒸馏水洗涤数次，或在5%漂白粉溶液中消毒半小时后取出，用水冲洗干净，以防止试验过程中发霉，影响试验结果。 2. 药液应保持刚好湿润发芽床为宜； 3. 保持供试种子所需的环境条件，温度应是供试种子发芽所需要的适温。一般要求在黑暗下培养，特殊情况除外。 4. 不要把两种以上的种子种于同一器皿中（即同一发芽床上）。,注意事项：,26,农药生物测定多媒体课件,（二）项目调查 1、发芽率（%）药剂处理的发芽数/对照处理的发芽数100 2、生长抑制率（%）(对照发芽率药剂发芽率)/对照发芽率100 3、发育异常描绘 有些药剂尤其是激素类药剂可使供试生物根或茎畸形，因此应调查根或茎的膨大或卷曲等异常情况，并做详细描述或绘制特征图。,一、种子发芽测定法,27,农药生物测定多媒体课件,（三）实例 1、黄瓜幼苗形态法：是测定激素类除草剂及其他植物生长调节剂活性的常用方法，具有反应灵敏、测定范围大（0.1-l000g/mL），操作简便等优点。 （1）药剂配制：将2,4-D配制成一系列浓度的丙酮溶液； （2）发芽床制作：用1张直径11cm滤纸在药液中浸至饱和，取出挥发掉丙酮，放入直径12cm培养皿中，再在其下垫两张同样大小空白滤纸。 （3）种子消毒： （4）培养：每皿放入20粒，加入12mL蒸馏水（此时培养皿中的实际浓度比原来丙酮液浓度低10倍)。盖好皿盖，置25恒温箱中黑暗培养。 （5）形态描述、绘图、照相等：6天后取出观察黄瓜幼苗，描述、绘制、照相或印相各浓度下黄瓜幼苗的形态。,一、种子发芽测定法,28,农药生物测定多媒体课件,2、小杯法：可测定二苯醚类、酚胺类和氨基甲酸酯类、氯代脂肪酸类等除草剂的活性，但对抑制植物光合作用的除草剂则几乎不能采用。该法具有操作简便，测定周期短、范围较广的优点。,一、种子发芽测定法,试材选用小麦、油菜、水稻、稗草等。以直径3.5cm，高5.0cm的玻璃杯或50mL的小烧杯为容器。杯底放一张圆滤纸片，吸取一定量的有机溶剂溶解的待测药液倒入杯内，挥发干溶剂。若以水稻、稗草等水生杂草种子为试材，在杯中加入2mL蒸馏水，若以小麦、油菜种子为材料时，则滤纸片底下放一层直径约为0.5cm大小的玻璃珠，再加入3mL蒸馏水。选择刚萌动的种子10粒，排放到滤纸片上，置28恒温室中培养，白天给予日光灯照。培养期间每天加入一定量蒸馏水补充挥发掉的水分。3 d后分别记载株高或测定鲜重。计算抑制生长50%所需要的浓度（EC50）。,（三）实例,29,农药生物测定多媒体课件,2、小杯法,一、种子发芽测定法,药效的分级标准为： 0级 同对照 1级 抑制生长25%以下 2级 抑制生长50%以下 3级 抑制生长75%以下 4级 抑制生长75%以上 然后计算每一浓度处理的抑制指数：,将抑制指数（抑制百分数）转换为机率值，浓度（剂量）以对数值表示，求出EC50。,（三）实例,30,农药生物测定多媒体课件,（三）实例 3、高粱法 4、稗草胚轴中胚轴法,一、种子发芽测定法,31,农药生物测定多媒体课件,（一）试验方法 将所选试材进行催芽处理后，种植在含有供试药剂的基质中（液体基质或土壤）或在植株生长的某个适期施药，经一定时间、一定条件的培育后观察试验结果。,二、植株生长量测定法,第三节 除草剂生物测定技术,32,农药生物测定多媒体课件,（二）实例 1、去胚乳小麦幼苗法：适用于测定光合作用抑制剂。 （1）选种：选择饱满度一致的小麦种子 。 （2）浸种催芽：浸种2h后，排列在铺有滤纸或纱布的搪瓷盘中，在室温20左右进行催芽，34d后苗高达23cm。 （3）3-4d后精选高度一致的幼苗，轻轻取出，避免伤害根部，然后用镊子摘除胚乳，再用水漂洗掉附在上面的胚乳成分，准备种植。 （4）用直径4.5cm、高5cm小玻璃杯为测定容器，每杯注入不同浓度供试药液3mL和稀释10倍的培养液6mL，每杯插入上述去胚乳小麦10株。 （5）在室温2126左右和光照下培养67天后观察药效。注意每天应该给每个小杯称重，补足损失的水分。 （6）测量每株从芽鞘到最长叶尖的距离，求生长抑制率，继而求EC50。,生长抑制率（%）(对照生长量处理生长量)/对照生长量100,二、植株生长量测定法,33,农药生物测定多媒体课件,2、萝卜子叶法 3、番茄水培法 4、叶鞘滴注法 5、再生苗测重法,（二）实例 1、去胚乳小麦幼苗法,二、植株生长量测定法,34,农药生物测定多媒体课件,（一）藻类实验法：应用绿藻 (chlorophyta)，蓝藻 (cyanophyta)等微小的藻类进行有关除草剂实验的实例很多，其中小球藻法是最为普遍的一种方法。 （二）浮萍法： （三）圆叶片漂浮法：植物在进行光合作用时，叶片组织内产生较高浓度的氧气，使叶片容易漂浮，而若光合作用受抑制，不能产生氧气，则叶片就难以漂浮。,三、生理生化指标测定法,第三节 除草剂生物测定技术,利用植株在施药后的生理生化反应来作为测定的指标，亦被广泛应用，特别是近年来由于生理生化技术发展，使这一方法更为准确和灵敏。,35,农药生物测定多媒体课件,1、藻类培养培养基的选择与制备； 2、试验法用偏平烧瓶或三角瓶，将小球藻培养液分别定量加入三角瓶中，再定量加入一定浓度的除草剂。可通入一定流量的含3%CO2浓度的空气，也可用二层纱布封住三角瓶口。25下，荧光灯照明培养。 3、测定方法 （1）观察颜色变化：施药后5 d观察小球藻退色变化情况 。 （2）比色测定小球藻增殖率：因小球藻的增殖，培养液中的绿色逐渐变浓，用分光光度计在波长574nm下比色测定，吸光度与小球藻细胞数量间存在明显的直线关系，故可用此法测定小球藻的含量。 （3）浓缩细胞量测定：把一定量的小球藻悬浊液放入带刻度的离心管中，I800rpm离心5分钟，测定沉淀小球藻的体积。 （4）叶绿素含量测定：因小球藻对不同药剂反应不同，故其培养液中小球藻叶绿素总含量是不同的，据此，可把叶绿素提取出来，测定其含量，以此来比较药剂的毒力，并可求出LC50，即抑制叶绿体含量50%时所需要的除草剂浓度。,三、生理生化指标测定法,（一）藻类实验法,36,农药生物测定多媒体课件,比色法测定小球藻的增殖率,I蛋白核小球藻的构造 1淀粉核 2细胞核 3载色体 II、III似亲孢子的形成和释放,小球藻属于绿藻类其细胞中只有一个叶绿体，叶绿体中含有和高等植物一样的光合色素，如叶绿素A、叶绿素B等，也能进行光合作用,（一）藻类实验法,37,农药生物测定多媒体课件,三、生理生化指标测定法,比色法测定小球藻的增殖率,瓶口封上两层纱布,25 0C,1000lx光,培养24h,处理前、后分别测波长574nm下的吸光度（OD值）,（一）藻类实验法,38,农药生物测定多媒体课件,（一）藻类实验法 （二）浮萍法 （三）圆叶片漂浮法,三、生理生化指标测定法,第三节 除草剂生物测定技术,39,农药生物测定多媒体课件,四、症状鉴定法 除草剂对供试生物所产生的特异性症状。,五、愈伤组织鉴定法,1、培养基的制备 2、外植体的选择及消毒 3、接种 4、培养条件 5、生长量的测定,第三节 除草剂生物测定技术,第三章 除草剂的生物测定,农药生物测定多媒体课件,40,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,一、除草剂的筛选,二、作物的安全性测定,第三章 除草剂的生物测定,三、除草剂的作用特性测定,四、除草剂在土壤中淋溶的测定,五、除草剂降解和持效测定,六、除草剂田间药效试验评价,七、除草剂混用药效测定,八、除草剂药害症状的诊断,农药生物测定多媒体课件,41,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,利用除草剂的生物测定技术从大量化合物中发现除草活性化合物，是筛选新除草剂的重要手段。筛选程序为实验室初筛盆栽实验田间实验三个步骤。,第三章 除草剂的生物测定,一、除草剂的筛选,农药生物测定多媒体课件,42,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,二、作物的安全性测定,第三章 除草剂的生物测定,以作物水稻、小麦、玉米、大豆、棉花、高粱、谷子、蔬菜等种子或幼苗进行测定。用药量一般与杀草谱试验一样。再根据除草剂性能分别于播前、播后，苗前、苗后进行药剂处理，处理1-2周后测定出苗率、生长势、药害、株高、鲜重。计算其选择性指数，以确定除草剂对作物的安全性。,一般认为，选择性指数在4级以上是比较安全的。 数值越大，表示对作物的安全性越大，除草效果越好，因而中选程度也大。,农药生物测定多媒体课件,43,三、除草剂的作用特性测定 可研究除草剂吸收与作用部位、研究除草剂吸收与传导。,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,图3-2 活性炭隔层示意图,研究除草剂吸收与传导时，在供试植物的某一部位涂抹除草剂，经一定时间后，把植物表面未吸收的除草剂冲洗下来进行生物测定，观察施药部位上下组织受害症状，判断其传导方向。通过根系吸收的除草剂可用水培法测定，把试材培养在含有一定浓度的除草剂溶液中，经一定时间后，测定除草剂在溶液中的剩余量，并与对照比较。也可采用同位素示踪法标记除草剂后，喷施导入试材中，用自显影法测定试材对除草剂的吸收、传导过程。,农药生物测定多媒体课件,44,将供试植物种子放在狭长的装有土壤的淋溶槽中，在槽的左端加除草剂，自左部加水展开，展开时间和距离可因药剂及目的而异，完毕后，将槽移入培养箱中给以适宜的条件，一定时间后，可测出除草剂在土壤中淋溶状况。,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,四、除草剂在土壤中淋溶的测定,农药生物测定多媒体课件,45,（一）田间试验 （二）盆栽实验 （三）不同浓度下降解速度 （四）除草剂的挥发和光解速度的测定,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,五、除草剂降解和持效测定,农药生物测定多媒体课件,46,五、除草剂降解和持效测定,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,图3-3 土壤降解试验方法,图3-4 土壤降解作用生物测定结果示意图,农药生物测定多媒体课件,47,（一）试验地选择 实验地点应根据除草剂将来可能推广的地区或有代表性的地点进行选择，如按大行政区分或按不同土壤类型地区分。 作物应根据盆栽实验的结果确定1-3个主要作物，选择有其主要防除杂草的地中进行杀草谱试验，应避免多次施用除草剂防除杂草都无效的地块或杂草极少的地上布置实验，否则，可人工撒播重要的防除对象杂草种籽。,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,六、除草剂田间药效试验评价,农药生物测定多媒体课件,48,（二）方法与步骤 确定除草剂用量，若用一种除草剂时，可用2-4个用量作比较，若用几种除草剂时，可分别用1-2个已知参考用量来比较。 小区面积及重复：旱地小区面积一般10-30m2，重复3-4次。随机排列，第一重复的第一处理（第一小区）应为对照（不喷药区），第2、3、4重复中每个处理小区的对应位置应错开，有时第2处理是以人工除草为对照，,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,六、除草剂田间药效试验评价,农药生物测定多媒体课件,49,（三）喷雾,例如： 喷幅流量为600mL/min，设计每666.7m2喷药液共30000mL有效喷幅1m。 步速：13.33m/min，即每秒走22cm，也就是每秒1m0.22m=0.22m2； 若小区面积为22m2，则应喷22m20.22m2/s=100s。4个重复的药液量一次配好，用走速及时间来控制喷液量，（应事先练习步速均匀）。,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,六、除草剂田间药效试验评价,农药生物测定多媒体课件,50,六、除草剂田间药效试验评价,喷药后7、15、30d分别进行调查记录，一般用数量法重量法,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,（四）药效调查,不同杂草对除草剂的敏感程度，可用下列符号记入苗情栏：+（很敏感），+（敏感），+（不大敏感），（抗），也可用目测法来评价除草剂的药效。,农药生物测定多媒体课件,51,（一）按比例混合法,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,图3-5 A、B两药剂混用的增效作用,试验中可采用如下不同处理：A 份、A1/3B2/3、A1/2B1/2、 A2/3B1/3、B份等 AB直线为两剂无增无减的准线，表 示两剂互不影响的药效总和，若混 用各点均在准线之上，表示增效， 反之即为减效。,七、除草剂混用药效测定,农药生物测定多媒体课件,52,七、除草剂混用药效测定 （二）杀草活力线法,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,图3-6 A、B剂单用及混用的杀草活力,通过将单用的两种药剂分别稀释成不同浓度单用和将两剂按一定比例混合的混用试验，做出三条杀草活力线。 其中D为混用，A、B两线为单用， A、B两条直线间的虚线C为两剂混用无增无减的准线（1：1混用） 优点：实验设计较准确，适于室内实验,53,农药生物测定多媒体课件,1. 进行A剂的系列浓度实验，求A点（IC50）； 2. 进行B剂的系列浓度实验，求B点（IC50）； 3. 分别在纵轴和横轴上确定A、B两点并画直线；,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,七、除草剂混用药效测定 （三）等效线法（千版法）,4. 进行A剂(一定剂量)+ B剂(一系列浓度)的混用实验、B剂(一定剂量) +,B剂(一系列浓度)的混用实验以及B剂(一定剂量)+ A剂(一系列浓度)的混用试验，求出各混用的IC50； 5. 若混用后的IC50各点均在AB线之下为增效，反之则为减效。,农药生物测定多媒体课件,54,八、除草剂药害症状的诊断,1.除草剂雾滴漂移,2.挥发,3.误用或过量使用以及使用时期不当,4.异常的土壤、气候条件,5.除草剂降解产物使作物受害,6.混用不当产生加成效应或与其它农药混合使用而伤害作物,7.长残效性除草剂：西玛津、阿拉特津、氟乐灵等造成轮作中敏感的后茬作物受害。,（一）除草剂使作物产生药害的原因,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,55,农药生物测定多媒体课件,触杀型药害 激素型药害 褪绿型药害 芽期抑制型药害 生长抑制型药害,八、除草剂药害症状的诊断,（二）区分除草剂药害的类型,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,56,农药生物测定多媒体课件,2.1 触杀型药害,接触型除草剂引起叶片变黄症状,接触型除草剂引起叶片出现独特斑点,百草枯、杂草焚、克阔乐等触杀性除草剂产生的药害，常表现为作物表皮局部坏死，产生枯斑，这些药害斑不继续扩大，以后也不产生新斑。,57,农药生物测定多媒体课件,二甲四氯、百草敌、快杀稗等激素类除草剂，它们作用于植物的分生组织，造成细胞生长异常，导致根茎叶畸形，也会影响到抽穗、开花，使穗子、果实畸形。,2.2 激素型药害,2,4-D的药害叶呈鸡爪型,快杀稗药害,58,农药生物测定多媒体课件,2.3 褪绿型药害,三嗪类、取代脲类(扑草净、西玛津)除草剂，抑制作物的光合作用。 一般药后7 d左右，作物叶尖和叶缘开始褪绿，逐渐扩展到全叶，最后全株死亡。,取代脲类和三嗪类引起的典型药害症状,59,农药生物测定多媒体课件,2.4 芽期抑制型药害,酰胺类(都尔、敌稗等)土壤处理除草剂，使作物幼芽、幼根吸收，敏感作物芽畸形死亡，已出土的幼苗心叶扭曲、萎缩，其它叶片皱缩、变黄。,苗心叶萎缩,60,农药生物测定多媒体课件,2.5 生长抑制型药害,磺酰脲、磺酰胺、咪唑啉酮类等抑制乙酰乳酸合成酶除草剂，它们破坏植物蛋白质的合成，作物受害后能出苗，至35cm后生长停止而后死亡。抗性稍强作物生长受抑，叶片黄化、畸形、扭曲。,61,农药生物测定多媒体课件,3.1 解剖诊断 3.2 生理诊断 3.3 形态诊断,八、除草剂药害症状的诊断,（三）除草剂造成作物药害的症状诊断,第四节 生物测定技术在除草剂研究中的应用,62,农药生物测定多媒体课件,3.1 解剖诊断,解剖效应是植物内部组织的变化，在田间很难看出。,63,农药生物测定多媒体课件,3.2 生理诊断,失绿是叶片内叶绿体崩溃、叶绿素分解造成的。失绿症状可以发生在叶、叶尖、或叶脉及其近缘，也可全叶失绿。 失绿的色调因除草剂种类和植物种类的不同而异。有完全白化苗、黄化苗，也有的仅仅是部分失绿。,3.2.1 失绿,个别的生理效应，如失绿、坏死在田间可以观察到。,64,农药生物测定多媒体课件,草甘膦的典型药害症状,草甘膦引起新生叶片上出现浅黄色,草甘膦引起新生叶片上出现浅黄色,3.2 生理诊断,3.2.1 失绿,65,农药生物测定多媒体课件,坏死是作物的某个部分如器官,组织或细胞的死亡。死亡部位可发生在叶、叶尖、或叶脉及其近缘，坏死部分的颜色差别也很大。,3.2 生理诊断,3.2.2 坏死,66,农药生物测定多媒体课件,3.3 形态诊断,大多数除草剂引起植物生长异常或根、茎、叶、花形态发生变化（如落叶、畸形叶、畸形果、植株矮化等）。 形态效应是药害