2018届高考生物二轮复习基因工程和细胞工程专题卷4.docx

基因工程和细胞工程一、单选题1在动物细胞培养的有关叙述中，不正确的是 A动物细胞培养前先用胰蛋白酶使离体组织分散成单个体细胞B动物细胞培养的目的就是为了获得大量的分泌蛋白 C动物细胞培养液的成分含葡萄糖、氨基酸、促生长因子、血清等D将细胞培养在含有毒物质的溶液中，可通过变异细胞的百分率判断有毒物质的毒性【答案】B【解析】试题分析：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。A动物细胞培养前先用胰蛋白酶使离体组织分散成单个体细胞。B动物细胞培养的目的就是为了获得细胞或细胞产物。C动物细胞培养液的成分含葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。D将细胞培养在含有毒物质的溶液中，可通过变异细胞的百分率判断有毒物质的毒性。考点：本题考查动物细胞培养的相关知识。点评：本题意在考查考生的识记能力和理解能力，属于容易题。2下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是（ ）A叶肉细胞已经高度分化,无法表现出全能性B叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织C融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜D叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性【答案】D【解析】试题分析：叶肉细胞已经高度分化，但在体外培养的条件下也能表现出全能性，A错误；叶肉细胞经脱分化过程可形成愈伤组织，B错误；融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞壁，C错误；叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性，形成完整植株，D正确考点：本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程、条件等基础知识，掌握植物细胞具有全能性的原因，能结合所学的知识准确判断各选项。3培育英国克隆羊“多利”、培育番茄马铃薯、制备单克隆抗体所用的生物工程技术依次为（）。A基因工程、细胞工程、基因工程B细胞工程、细胞工程、细胞工程C基因工程、细胞工程、细胞工程D细胞工程、基因工程、基因工程【答案】B【解析】试题分析：克隆羊为核移植技术，为动物细胞工程，番茄马铃薯为体细胞杂交技术，为植物细胞工程，单克隆抗体为动物细胞工程，B正确。考点：本题考查细胞工程相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。4通过细胞工程生产单克隆抗体时要涉及三次筛选过程，分别是：在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞；选出能产生抗体的B淋巴细胞；选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。则其先后顺序为（ ）A B C D【答案】C【解析】制备单克隆抗体需要先选出能产生抗体的B淋巴细胞，B、D错误。然后筛选出杂交瘤细胞，是在特定培养基中进行筛选的，A错误。再筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C正确。【考点定位】本题考查单克隆抗体制备相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【名师点睛】单克隆抗体制备过程中的两次筛选第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。5A种植物细胞(基因型Aa)、B种植物细胞(基因型Bb)，去壁后诱导两种细胞的原生质体融合,形成单核的杂种细胞。若经过组织培养得到的杂种植株是（ ）A二倍体，基因型为AaBb B.二倍体，基因型为AAaaBBbbC. 四倍体，基因型为AaBb D.四倍体，基因型为AaaaBBbb【答案】C【解析】6下列属于植物细胞工程实际应用的是（ ）制造人工种子培育抗盐植物培育抗病毒烟草培育单倍体生产脱毒植株A. B. C. D. 【答案】C【解析】通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，正确；植物组织培养过程中容易发生基因突变，通过筛选可获得抗盐植物，属于植物细胞工程的应用，正确；培育抗病毒烟草属于基因工程的应用，错误；利用花粉离体培养技术培育单倍体幼苗，正确；利用分生区（如茎尖）细胞进行组织培养，形成脱毒苗，正确7(12分,普通班必做)禽流感疫情有逐渐蔓延的趋势，有些国家还出现了人感染的病例。现在，科学家们已陆续从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1亚型禽流感病毒(一种RNA病毒)。若生产可以用于预防和治疗禽流感的抗体，请根据下面的单克隆抗体制备过程示意图回答有关问题：(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞， B细胞是经过免疫的淋巴细胞，促进d过程的常用诱导剂是 (2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用培养基筛选出人们所需的D细胞用于培养。D细胞的名称是 。(3)在对禽流感病毒进行研究时，需对这种病毒进行培养。在培养时 （能/不能）用培养细菌的培养基。原因是 。（4） 技术是单克隆抗体技术的基础【答案】【解析】本题考查的是动物细胞工程的有关内容。（1）诱导动物细胞融合的方法常用诱导剂是聚乙二醇或灭活的病毒。（2）仅考虑某两个细胞的融合，则可形成3种类型的C细胞，即同种类型融合的细胞AA型、BB型，还有异种类型融合的细胞AB型。用培养基筛选出人们所需的D细胞，即杂交瘤细胞。（3）在对禽流感病毒进行研究时，需对这种病毒进行培养。在培养时不能用培养细菌的培养基。原因是病毒是专性寄生生物，只能在活的寄主细胞中才能繁殖。（4）单克隆抗体技术的基础是动物细胞培养技术。8影响植物组织培养的因素包括养基的配制 外植体的选取 激素的运用 消毒 温度、pH、光照A. B. C. 【答案】A【解析】离体的植物组织和细胞，对营养、环境条件要求相对特殊，需要配制适宜的培养基，正确；不同植物组织培养的难易程度差别很大，即使是同一种植物材料，因器官来源及其生理状况、材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果，正确；植物激素中，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，正确；植物组织培养需要在无菌条件下进行，因此要对外植体进行消毒，正确；植物组织培养需要适宜的温度、pH，还需要适时的光照（脱分化避光，再分化需光），正确。故选A。【考点定位】植物培养的条件【名师点睛】植物组织培养的条件：细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）。一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。9如图为植物组织培养过程流程图解，以下相关叙述不正确的是 ( )Aa、b、c、d中的植物细胞都具有完全相同的DNA和RNABad的培养过程中，植物生长调节剂的种类和比例不同C脱分化发生在ab步骤，再分化发生在bd步骤D从花药到完整植株的形成过程说明花粉细胞具有全能性【答案】B【解析】试题分析：花粉通过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织通过再分化形成试管苗，其过程有有丝分裂和细胞分化，遗传物质均不发生改变，即DNA不变；由于基因的选择性表达，植物细胞中RNA不完全相同，但细胞中有相同的RNA；脱分化和再分化过程中植物生长调节剂种类相同，都是生长素和细胞分裂素，而比例不同，当生长素和细胞分裂素比例相同时，有利于脱分化，当生长素含量高于细胞分裂素含量时，有利于生根，当生长素含量低于细胞分裂素含量时，有利于生芽；花粉属于分化的细胞，其发育形成单倍体，体现了花粉细胞具有全能性。考点：本题考查植物组织培养的过程。点评：本题难度中等，属于考纲理解层次。解答本题的关键是理解脱分化和再分化过程中植物激素的种类和比例以及两种过程DNA含量和RNA含量的区别。10在动物细胞培养过程中，下面哪种物质不是必需的（ ）A.单糖 B.核苷酸 C.氨基酸 D.无机盐【答案】B【解析】试题分析：动物细胞培养的培养基需加入以下成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质，故本题选B。考点：动物细胞培养点评：本题考查了动物细胞培养的培养基成分，属于对识记层次的考查。11在离体的植物器官、组织或细胞脱分化的过程中，下列哪一项条件不是必需的A.充足的光照 B.适宜的温度C.消毒灭菌 D.适宜的养料和激素 【答案】A【解析】脱分化过程不能有光照。12如图是科学家研发的制备单克隆抗体的过程，相关叙述错误的是A. 该过程涉及基因工程和动物细胞融合技术B. 经酶A处理后的与质粒具有相同的黏性末端C. 若供体DNA提供了prG基因(无限增殖调控基因)，则该过程中的是已免疫的B细胞D. 通过检测和筛选得到的细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体【答案】A【解析】试题分析：该过程涉及基因工程和动物细胞培养技术，A错误。酶具有专一性，同种酶切割的黏性末端相同，B正确。单克隆抗体制备过程的B细胞需要经过免疫才能产生抗体，C正确。细胞具有无限增殖的基因又能分泌抗体，D正确。考点：本题考查单克隆抗体相关知识，意在考查考生识图与分析能力，并能从图形中提取有交信息进行判断的能力。13下列哪项不是克隆与转基因的区别（ ）A前者是细胞工程，后者是基因工程 B克隆使后代性状与亲代完全相同C克隆是安全的，而转基因是不安全的 D原理不同【答案】C【解析】试题分析：克隆技术属于细胞工程，而转基因生物利用了基因工程的方法，故A不合题意；克隆属于无性生殖，产生的性状与亲本几乎完全相同，而转基因生物的遗传物质发生改变，性状也发生了改变，故B不合题意；克隆和转基因生物都存在安全性争论，故C符合题意；克隆的原理是无性生殖，而转基因的原理是基因重组，故D不合题意。考点：本题考查细胞工程和基因工程的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。1414在下列选项中，需要采用植物组织培养技术的是利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株 获取大量的脱毒苗利用基因工程培养抗棉铃虫的植株 单倍体育种 无子西瓜的快速大量繁殖A. B. C. D. 【答案】D【解析】试题分析：利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，错误；获取大量的脱毒苗，需要采用植物组织培养技术，正确；利用基因工程培养抗棉铃虫的植株时，需要采用植物组织培养技术将含有目的基因的受体细胞培养成转基因植株，正确；单倍体育种需要采用植物组织培养技术，正确；无子西瓜的快速大量繁殖，需要采用植物组织培养技术，正确考点：植物培养的条件及过程【名师点睛】植物组织培养是一种无性繁殖的技术，将离体的单个植物细胞培养成完整的植株的过程，体现植物细胞的全能性植物基因工程、单倍体育种和植物体细胞杂交过程中均运用了植物组织培养技术，而用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株属于多倍体育种，处理对象为独立的个体，无需进行组织培养15下列说法不正确的是A. 干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染B. 采用农杆菌转化法，不能将目的基因导入多数单子叶植物细胞，关键原因是多数单子叶植物细胞不能合成酚类化合物C. 基因探针的工作原理是碱基互补配对，基因探针既可以检测DNA分子，又可以检测基因转录产物RNAD. 启动子位于mRNA上，是RNA聚合酶识别和结合的部位【答案】D【解析】干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，它几乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一种抗病毒的特效药，A正确；农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力，原因是多数单子叶植物细胞不能合成酚类化合物，B正确；基因探针是单链DNA，既可以检测DNA分子，又可以检测基因转录产物RNA，C正确；启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能启动转录过程，位于DNA上，D错误。【点睛】易错混淆，误认为启动子存在于mRNA上，其实启动子和终止子都存在于DNA上，起始密码子和终止密码子才存在于mRNA上。16用某人的胰岛素基因制成的DNA探针，检测下列物质，可能形成杂交分子的是该人胰岛A细胞中的DNA 该人胰岛B细胞中的mRNA该人胰岛A细胞中的mRNA 该人肝细胞中的mRNAA. B. C. D. 【答案】A【解析】该人胰岛A细胞中的DNA含有胰岛素基因，能与探针形成杂交带，正确；该人胰岛B细胞中的胰岛素基因会转录形成mRNA，该mRNA能与探针形成杂交带，正确；该人胰岛A细胞含胰岛素基因，但胰岛素基因不表达，所以该细胞中的mRNA不能与探针形成杂交带，错误；该人肝细胞的DNA含有胰岛素基因，能与探针形成杂交带，正确；故选A。【点睛】本题的易错点是所有细胞中都含有全部的遗传信息（DNA或基因），但是不同的细胞基因是选择性表达的。17动物细胞融合和植物原生质体融合比较，特殊性表现在（ ）A融合的原因 B融合的优点C融合的诱导手段 D融合的过程【答案】C【解析】试题分析：动物细胞融合和植物原生质体融合都是为了将两者的优良性状集于一体，A项错误；融合的优点 都是打破了物种间的生殖隔离，B项错误；融合的诱导手段不完全相同，动物细胞融合可以用灭活的病毒诱导，而植物原生质体融合不能用灭活的病毒诱导，C项正确；诱导融合的过程都是先细胞膜融合，再细胞质融合，最后细胞核融合，即融合的过程相同，D项错误。考点：本题考查动物细胞融合和植物体细胞杂交的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。18下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是A培养液通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、生长因子和动物血清等B培养的细胞传至10代以后，细胞增殖常常会逐渐缓慢C动物细胞培养传到4050代时，核型可能会发生变化D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞【答案】A【解析】试题分析：动物细胞培养培养液中的糖是葡萄糖， A错误；细胞培养的细胞传至10代以后，细胞增殖常常会逐渐缓慢，B正确；动物细胞培养传到4050代时，遗传物质可能发生变化，C正确；动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞，D正确。考点：本题考查动物细胞培养的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。19基因工程目前已成为生物科学的核心技术，在多个领域已展示出美好前景，下列叙述正确的是A. 抗虫基因即使成功插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达B. 基因工程生产药物时可将药用蛋白基因与该基因的启动子等调控组件重组构建基因表达载体C. 进行基因治疗时，基因的受体细胞是受精卵D. “转基因动物”是指体细胞中出现新基因的动物【答案】A【解析】基因是选择性表达的，抗虫基因即使成功插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达，A正确；基因工程生产药物时，可将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，B错误；进行基因治疗时，基因的受体细胞是有缺陷的细胞，不是受精卵，C错误；转基因动物是指利用基因工程手段导入目的基因并使其高效表达的动物，D错误。20以下所用技术或方法与原理不相符的是 （ ）A转基因技术基因重组 B单克隆抗体细胞的全能性C动物细胞融合细胞膜的流动性 D动物细胞的培养细胞增殖【答案】B【解析】单克隆抗体制备的原理是细胞膜的流动性。二、非选择题21通过细胞工程技术，利用甲、乙两种高等植物的各自优势，培育具有抗病、耐盐优良性状的杂种植株。请回答下列问题：（1）A处理目前最常用的方法是_； PEG诱导形成B的原理是_；将甲、乙原生原生体放在等渗溶液中其形态为_；B是否再生出细胞壁，检测方法是_； （2）幼苗C具有的优良性状是_。由C得到目的植株的选择根本上改变了该植物群体的_。 （3）若甲的基因型yyRr，乙的基因型MMNn，取甲乙的花粉进行融合，融合的细胞类型_种，其中yRMn的育性是_（可育/不可育）。【答案】 酶解法（纤维素酶和果胶酶处理） 细胞膜的流动性 圆球形 质壁分离实验 耐盐 基因频率 10 不可育【解析】试题分析：本题考查植物细胞工程，考查对植物体细胞杂交原理、流程的理解和识记。（1）A处理的目的是除去细胞壁，目前最常用的方法是酶解法（纤维素酶和果胶酶处理）； PEG诱导形成B杂种细胞，依赖于细胞膜的流动性；将甲、乙原生原生体放在等渗溶液中，由于表面张力其形态为圆球形；可通过质壁分离实验杂种细胞是否再生出细胞壁。（2）幼苗C经过较高浓度的钠盐溶液培养，具有耐盐的优良性状。选择从根本上改变了该植物群体的基因频率。 （3）甲的基因型yyRr，可以产生yR和yr两种花粉，乙的基因型MMNn，可产生MN和Mn两种花粉，取甲乙的花粉进行融合，只考虑两两融合，同种花粉融合有4种类型，不同种花粉融合有6种类型，融合的细胞类型共有10种，其中yRMn不含有同源染色体，育性是不可育的。【点睛】解答第（3）小题的关键：一是明确甲乙的花粉两两融合，既有同种花粉的融合，也有不同种花粉的融合；二是明确同源染色体上有相同或等位基因，没有同源染色体的细胞难以产生可育配子。22抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射入抗胰蛋白酶来缓解症状。（1）图1表示获取人抗胰蛋白酶基因的两种方法。请据图回答：a过程是在_酶的作用下完成的，该酶的作用特点是_。c过程称为_，该过程需要的原料是_。要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用_技术检测该基因的碱基序列。（2）利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人抗胰蛋白酶基因的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2。这种转基因动物可以通过分泌的乳汁来生产所需要的药品，因而称为_。载体上绿色荧光蛋白(GFP)基因的作用是便于筛选_，构建基因表达载体d需要将抗胰蛋白酶基因与_等调控组件重组在一起。【答案】 限制酶 识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子 逆转录 脱氧核苷酸 DNA分子杂交 乳腺生物反应器 含有目的基因的受体细胞 乳腺蛋白基因的启动子【解析】试题分析：1、根据图1分析，方法一是用限制酶获取目的基因；方法二是反转录法。2、根据图2分析，表示基因工程的步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞。（1）据图分析，a过程表示目的基因的获取，是在限制性核酸内切酶的作用下完成的，该酶的作用特点是识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。c过程称为逆（或反）转录形成DNA，则需要的原料是4种脱氧核苷酸。要DNA分子杂交检测获得的基因是否是所需的目的基因。（2）通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺生物反应器，乳腺生物反应器是最理想的生物反应器。载体上绿色荧光蛋白（GFP）基因属于标记基因，目的是便于筛选含有目的基因的受体细胞；基因表达载体d中含有目的基因和标记基因，还必须含有启动子、终止子等。23（14分）请根据给出的材料回答下列相关问题。（7分）植物体细胞杂交技术为农业迅猛发展提供了坚实的技术基础与保证。据图回答下列问题：（1）上述过程依据的遗传学原理是_，过程是酶解法去细胞壁和诱导原生质体融合，该过程应在 溶液中进行。此项技术的重要意义在于_ _。（2）在培养过程中，除必要营养物质和激素以及温度、光照和氧气pH等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证_。（3）若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含B条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育(假设能成功)得到的后代应含_条染色体。必须用_处理幼苗，才能得到可育的番茄一马铃薯植株。（4）若c细胞是能产生单克隆抗体的细胞， 除用特定的选择培养基筛选外，还需 和抗体检测，才能筛选出既能无限增殖，又能产生专一抗体的杂交瘤细胞。（7分）下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。（1）上述过程中主要应用到的动物细胞工程有 。（2）在体外培养条件下，为保持胚胎干细胞的未分化状态，通常在培养皿中铺上一层 细胞。胚胎工程的主要技术有体外受精、胚胎移植、胚胎分割和 等（3）“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有_。（4）若将上述技术用于白血病人的骨髓移植，且图 中患者是A型血（IAi），提供卵细胞的女性是AB型血（IAIB）的，则骨髓移植成功后患者的血型是_型。（5） 按上述方法克隆器官在器官移植方面的主要优点是_ 。【答案】（共14分）I(共7分)（1）染色体变异 等渗溶液或高渗溶液 克服了远源杂交不亲和的障碍 （2） 无菌 （3）（A+B）/2 秋水仙素（4）克隆化培养(共7分)（1）动物细胞培养、 细胞核移植（2分）（2）胚胎成纤维 胚胎干细胞培养（或早期胚胎培养）（3）全能性 （4）A（5）解决了临床上供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题【解析】略24(12分) 有人提出这样一种设想：如果能培育出一种既能在地上结蕃茄，又能在地下结马铃薯的植物，该有多好！（1）现有一株蕃茄A（二倍体）和一株马铃薯B（四倍体），请完成培育“蕃茄马铃薯”杂种植株的简要过程。第一步：；第二步：；第三步：杂种细胞用植物组织培养方法培养，经过程形成杂种植株。（2）上述杂种细胞在组织培养过程中，其培养基的营养物质主要是（至少回答4种），至少应添加的植物激素是。（3）形成的杂种植株“蕃茄马铃薯”为_倍体。【答案】（12分） （每空二分）（1）第一步：用纤维素酶、果胶酶去掉A、B细胞的细胞壁； 第二步：用物理化学方法诱导A、B原生质体融合； 第三步：脱分化、再分化 （2）水、无机盐、氨基酸、核苷酸、维生素等（至少答出4种）； 生长素、细胞分裂素 （3）六【解析】25（每空2分，共12分）酵母菌菌种A能耐高温，但产酒精率较低，而菌种B不耐高温，产酒精率却较高。为获得耐高温、产酒精率高的酵母菌（目的菌种），进行了如下图1所示的实验。请回答下列相关问题。图1 图2（1）步骤需要加入蜗牛酶，其作用是 。步骤需加入 试剂诱导融合。 （2）利用A、B两菌种对某一药物抗药性的差异，对融合子进行筛选。实验中，应将含有融合子的培养液利用 法接种到含有相关药物的培养基上。下表为A、B两菌种在几种药物的作用下，生长状况的实验结果。由于A种不能独立在基本培养基上生长，所以，据表可以判断，加入 （药物），可筛选出融合子。(注：“+”表示可以良好生长，“”表示不能生长。)多菌灵三唑酮霜霉狂杀放线菌酮菌种A+菌种B+（3）将配制好的麦芽汁分装到若干个如上图2所示的装置中，每个装置中的麦芽汁含量相等，再分别接种筛选出的融合子，密闭培养。一段时间后，观察比较并记录每个装置中 ，可初步判断融合子的发酵能力；进一步做 条件下产酒精能力的测定，以获得所需的目的菌种。【答案】（1）除去细胞壁 PEG（或聚乙二醇） （2）稀释涂布平板 三唑酮 （3） 彩色液滴向右移动的距离 高温【解析】试题分析：（1）蜗牛酶的作用是除去细胞壁；步骤是诱导细胞融合，需加入PEG（或聚乙二醇）试剂诱导。（2）对融合子进行筛选，应将含有融合子的培养液利用稀释涂布平板接种到含有相关药物的培养基上；加入“多菌灵”A、B都能良好生长，不能判断是不是融合子，加入“三唑酮”A能良好生长，B 不能，但A不能独立生长，所以能良好生长的必然是和B的融合个体，加入“霜霉狂杀”B 能良好生长，A 不能，故不能分离B 与两者融合个体，加入“防线菌酮”都不能生长，什么都得不到，加入三唑酮可筛选出融合子。（3）检验融合子是否耐高温、产酒精率高，经密闭培养后，可通过观察比较并记录每个装置中彩色液滴向右移动的距离，判断融合子的发酵能力；做高温条件下产酒精能力的测定，以获得所需的目的菌种。考点：本题考查细胞融合的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法，理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。26(8分)目前临床上癌症治疗的方法，一般是手术切除肿瘤，为防止体内残留癌细胞，在手术后进行化疗，某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究。实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血球计数板，试管，吸管等。1其中某位同学实验操作如下：（请将实验内容补充完整）（1）取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用胰蛋白酶处理，使其分散开来，置于培养皿中培养。（2）取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5， 并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入 。（3）从培养皿中吸取等量的培养液置于1-5号试管中，振荡后，在冰箱中培养一段时间。（4）从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于 内，在显微镜下计数，记录数据。2请你纠正上面这位同学操作上的错误 ； 。3另一位同学按照正确的方法进行实验，得到的结果如下：实验组别12345二氯二乙胺浓度(mg/ml)0.10.20.30.40细胞数目（个/mL）32027518696560（1）在该实验中，遵循了实验设计的 原则和 原则。（2）根据实验结果,你能得出的结论是 。(2分)【答案】（8分）1（2）等量生理盐水 （4）血球计数板 2在“冰箱中”应改为在“适宜温度下”或“恒温箱中”；“从静置的5支试管中吸取适量的培养液”应改为“振荡摇匀后，从5支试管中吸取适量的培养液”3（1）对照，单一变量 （2）二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖（1分），且在一定范围内，随二氯二乙胺浓度的增大，抑制作用逐渐增强（1分）【解析】试题分析：1.(2)要探究二氯二乙胺可以作为癌症的化疗药物，可以设计对照实验进行探究。该探究实验的自变量是二氯二乙胺溶液浓度，由题意“在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液”可知1-4号试管中的处理为实验组，则5号试管为对照组，对照组需要加入等量的生理盐水。（4）因变量是肿瘤组织细胞数目多少。实验材料可以利用题中（1）步骤已给的分散的肿瘤组织细胞，检测肿瘤组织细胞数目的多少可以参照血细胞计数的方法，利用血球计数板计数。2癌细胞的增殖要在“适宜温度下”或“恒温箱中”中才能完成，由于冰箱的温度太低，不是细胞生活的适宜温度，所以将应在“冰箱中”改为应在“适宜温度下”或“恒温箱中”。试管静置时，其内的溶液会出现沉淀，吸取细胞培养液时所得每毫升中细胞的数目不准确。为了确保计数的准确性，从试管中吸取细胞培养液进行计数之前，要注意先轻轻振荡几次，使细胞均匀分布在培养液中。3对照实验的最基本原则是对照原则和单一变量原则。表中数据显示，随着二氯二乙胺溶液浓度的增大，细胞数目逐渐减少，所以能得出的结论是：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，且在一定范围内，随二氯二乙胺浓度的增大，抑制作用逐渐增强。考点：本题结合癌细胞的防治考查实验设计的相关知识，意在考查学生具有对一些生物学问题进行初步探究的能力（包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法），能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订的能力。27A、B是染色体数目相同的两种二倍体生物，看图填写有关细胞工程的内容：（1）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B淋巴细胞，那么，图中D称为_细胞。若筛选成功则D细胞有_的特点。（2）动物细胞培养时除需要适宜的温度、营养、无菌、无毒等环境条件以外，还要向培养液中通入氧气和二氧化碳。若要保证无菌环境可采取的方法是_和_。（3）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用_处理获得原生质体；则形成的D细胞还要应用_技术把D培养成植株。（4）上述杂种植株属于_倍体。假设A与B有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成不育的原因是_。此项技术的重要意义在于_。这种杂交植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖，方法是经植物组织培养得到的_等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。【答案】（1）杂交廇 无限增殖，且能产生特定抗体（2）在培养液中加入一定量的抗生素 定期更换培养液、维持培养液的pH（3）纤维素酶和果胶酶 植物组织培养（4）四 减数分裂时染色体联会紊乱，无法产生正常配子 克服远缘杂交不亲和的障碍 胚状体【解析】试题分析：（1）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B淋巴细胞，那么，图中D是效应B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交廇细胞，具有无限增殖、且能产生特定抗体的特点。（2）动物细胞培养时，若要保证无菌环境可采取的方法是在培养液中加入一定量的抗生素和定期更换培养液、维持培养液的pH。（3）若A、B是植物细胞，应先用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体后，再诱导原生质体的融合，形成的杂种细胞还需应用植物组织培养技术才能培养成杂种植株。（4）上述杂种植株属于四倍体。假设A与B有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成不育的原因是减数分裂时染色体联会紊乱，无法产生正常配子。此项技术的重要意义在于克服远缘杂交不亲和的障碍。这种杂交植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖，方法是经植物组织培养得到的胚状体等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。考点：本题考查细胞工程、育种的相关知识，意在考查考生的理解、应用能力。28【生物选修3:现代生物科技专题】基因编辑技术指对目标基因进行“编辑”，实现对特定DNA片段的敲除、加入等。继CRSPRI/Cas9系统基因编辑技术风靡全球实验至后，我国韩春雨研究团队提出了NgAgo-gDNA基因编辑工具，但却引起了科学界的质疑。为了探究NgAgo-gDNA系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生突变导致其眼睛发育缺陷，复旦大学和南通大学联合进行了研究。请回答下列问题.（1）探究一:NgAgo - gDNA系统能否使斑马鱼眼睛缺陷？方法:首先推测构成NgAgo蛋白的_，在试管中合成mRNA，并将其与单链gDNA混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中，进行胚胎培养。培养液需含有葡萄糖、氨基酸、核苷酸、无机盐、有机盐、维生素和_等。小斑马鱼的形成_(填“需要，或“不需要”）进行胚胎移植。单链gDNA与Fabplla基因的碱基互补配对与Fabplla基因转录时的碱基互补配对相比，区别是_。结果:实验组斑马鱼胚胎出现了严重的眼睛缺陷。（2）探究二:斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla基因发生突变引起的?方法:从异常眼部表现型的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla基因，对其使用PCR技术进行扩增，并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能。PCR技术扩增Fabplla基因时，需要提供模板、原料、_、引物等条件。将模板DNA加热至9095，该处理的目的是_。结果：NgAgo-gDNA系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla基因的mRNA来恢复，而且对Fabplla基因测序结果发现其序列与对照组相同。初步结论:_。（3）转基因技术是一把双刃剑，引发了人们在食物安全、生物安全和_三个方面发生激烈的争论。在食物安全方面，绝大多数科学家都能遵守科学道德，如对外源DNA进行选择，避免产生对人体有毒害或过敏的_。【答案】 氨基酸序列 动物血清（或动物血桨） 不需要 前者碱基AT配对，后者碱基AU配对 热稳定DNA聚合酶（或Taq酶） 使目的基因DNA受热变性后解旋为单链 斑马鱼眼睛缺陷是由 Fabplla基因转录受阻导致的，而非基因突变引起的 环境安全 蛋白质【解析】试题分析：基因工程的步骤包括：获取目的基因、构建表达载体、将载体导入受体细胞、目的基因的检测与表达。基因工程技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。作为运载体必须具备的条件：要具有限制酶的切割位点；要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；能在宿主细胞中稳定存在并复制；是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。（1）首先推测构成NgAgo蛋白的氨基酸序列，在试管中合成mRNA，并将其与单链gDNA混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中。胚胎培养时的培养液需加入动物血清。斑马鱼的胚胎是在体外发育的，所以不需要进行胚胎移植。单链gDNA与Fabplla基因的碱基互补配对时，A与T互配，而Fabplla基因转录时，A与U配对。（2）PCR技术的原理是DNA复制，需要一定的条件，包括模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。将模板DNA加热至9095的目的是使目的基因DNA受热变性后解旋为单链。根据实验结果，预测实验的结论为：斑马鱼眼睛缺陷是由 Fabplla基因转录受阻导致的，而非基因突变引起的。（3）转基因技术的安全性问题包括食物安全、生物安全和环境安全，其中在食物安全方面，科学家都一定要遵守科学道德，如对外源DNA进行选择，避免产生对人体有毒害或过敏的蛋白质。【点睛】本题考查了基因工程的工具和操作步骤、PRC技术、转基因技术的安全性等方面的知识，要求考生掌握相关知识点，把握知识间的内在联系，结合所学知识解决相关的生物学问题。29克隆技术是人类医学科学史上的一个里程碑，使其为人类认识自身奥秘和纷