广东署山市高中生物第二章微生物的培养与应用2.2微生物的实验室培养(二)学案新人教版.docx

课题1 微生物的实验室培养(二)学习目标1.通过阅读教材P1617“(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基”，掌握配制培养基的步骤和倒平板操作的过程。2.结合教材P1819“(二)纯化大肠杆菌”，理解并掌握利用平板划线法和稀释涂布平板法来纯化微生物的方法。重难点击：1.掌握制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法。2.学会用平板划线法和稀释涂布平板法纯化微生物。【预习案】一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基牛肉膏蛋白胨固体培养基是细菌培养中常用的一种培养基，大肠杆菌的纯化就是用的该培养基。1.牛肉膏蛋白胨固体培养基的成分及各成分提供的营养培养基组分提供的主要营养物质牛肉膏5.0 g_蛋白胨10.0 g 和维生素NaCl 5.0 g_蒸馏水定容至1 000 mL氢元素、 元素2.实验过程(1)培养基的配制计算：根据牛肉膏蛋白胨培养基 的比例，计算配制100 mL培养基时 各成分的用量（2）(2)灭菌(3)倒平板：待培养基冷却至50 左右时，在酒精灯火焰附近操作进行：在火焰旁 手拿锥形瓶， 手拔出棉塞(如图1)。使锥形瓶的瓶口迅速通过 ，目的是进行 ，防止瓶口微生物污染培养基(如图2)。 手将培养皿打开 ， 手将培养基倒入培养皿，立刻盖上 (如图3)。等待平板 后，将平板 放置(如图4)。3.培养基的选择：培养基配制好后，要放在 中保温12 d，若 则说明制备的培养基是合格的。4.平板冷凝后，要将平板倒置的原因：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基 ，又可以防止 。二纯化大肠杆菌：纯化大肠杆菌就是为了获得大肠杆菌的纯种菌落，这需在培养时，尽量使菌落中的菌体来自于一个大肠杆菌的分裂，即这个菌落的细菌群体由 繁殖而来，这就需要接种时尽量接种单个的大肠杆菌，最常用的是 法和 法。1.平板划线法：结合示意图，完成下面步骤：2.稀释涂布平板法：(1)系列稀释操作 (2)涂布平板操作3.菌种的保存将菌种放在低温环境中保藏的目的是_ 。归纳提炼：1.平板划线法中几次灼烧接种环的目的2.稀释涂布平板法：应特别注意：(1)酒精灯与培养皿的距离要合适。(2)吸管头不要接触任何其他物体。(3)吸管要在酒精灯火焰周围使用活学活用: 1.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是()A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50 左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固约510 min后，将平板倒过来放置2.下列叙述错误的是()A.右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞，为避免 污染需放在酒精灯火焰附近B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行C.打开培养皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿， 左手立即盖上培养皿的皿盖D.为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置3.如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，错误的是()A.该操作步骤是接种，方法是平板划线法B.除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一 次划线的末端C.图中细菌密度最小的是5处 D.该接种方法适用于细菌的计数【小结提升】【典题训练】1.有关稀释涂布平板法的叙述，错误的是()A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C.在适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个菌落2.如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是()A.只在操作前将接种环放在火焰边灼烧灭菌B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌3.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 恒温箱的目的是()A.对比观察培养基有没有被微生物利用B.对比分析培养基上是否生有杂菌C.没必要放入未接种的培养基 D.为了下次接种时再使用4.获得纯净培养物的关键是()A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B.接种纯种细菌 C.适宜环境条件下培养 D.防止外来杂菌的入侵5.(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑 、 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、 、 等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行 (消毒、灭菌)；操作者的双手需要进行清洗和 ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能 。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的 。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对