〖医学〗遗传性和获得性血型转变的免疫学基础.ppt

1,遗传性和获得性血型转变的免疫学基础,Gnther Krmczi Department of Blood Group Serology and Transfusion Medicine Medical University of Vienna, Austria,2,特殊血型表型,遗传性的 血型变异 (A3, 弱 D, Kmod ) 出生时期的 血细胞嵌合体 (多于1个合子) 获得性的 遗传变异 镶嵌现象,3,Rh 复杂的例子,RhD 变异体 部分 D 类型 弱 D 类型 DEL 类型 获得性 Rh 表型变化,4,RH 基因: RHD 和 RHCE,1p36.11,5,Rh 多肽: RhD 和RhCcEe,胞内,胞外,6,D 抗原 (Rh 因子“),包括 30 D抗原决定簇,胞外,Europe: 83% D+ 17% D,7,D = 最具有免疫原性的红细胞抗原,anti-D 免疫接种 of D 病人 by D+ 输血 80% D 孕妇 by D+ 胎儿 15% (没有进行过 Anti-D 预防) 溶血输血反应 胎儿和新生儿的溶血性疾病 可靠的D分型 !,8,D抗原表达的血清学光谱,间接抗球蛋白检测(IAT)中的红细胞和 anti-D,9,Dweak,弱 D 类型 胞内 RhD 变化 1) RHD 点突变 没有D抗原表位的丢失 D 抗原密度减少,10,弱 D 类型 胞内 RhD 变化 1) RHD 点突变 没有D抗原表位的丢失 D 抗原密度减少,Dweak,部分 D 胞外 RhD 变化 1) RHD 点突变 2) RH 基因杂交 RHD-CE-D D 抗原表位丢失 异体抗体-D 可能存在,11,数量和性质的区别,12,弱 D 类型: 有限的 D 抗原数量,没有 D 抗原的变化 (所有的D抗原决定族),13,D 抗原密度测定,单克隆 IgG anti-D anti-IgG Fab-FITC 间接免疫荧光 流式细胞术 中位荧光强度 与标准品相比对,14,典型D抗原密度,15,定性的D抗原检测,针对单个D抗原表位的单克隆 anti-D抗体 D 抗原表位图谱,部分D抗原表位缺失,16,常规血清学Anti-D标准品,6 种不同的 anti-D 单克隆抗体 (in IAT),17,部分 D 类型的D抗原表位资料,Scott 2002,18,谱系的上限,奥地利 女性, 74岁 常规血清学: D+“ anti-D (titer 4) anti-LW排斥 直接抗球蛋白检测 阴性 点突变: RHD(M358T),19,一种 几乎正常的“ 部分 D: DWI,8.300 D 抗原/红细胞 79例抗D 单克隆抗体中只有1例没有反应 少量 D 抗原表位丢失 异体anti-D (D+ 妊娠!),20,与DWI阳性的亲属 交叉配型,21,多种 如果肺炎的诊断成立，评价病情的严重程度、肺部炎症的播散和全身炎症反应程度。除此之外患者如有下列危险因素会增加肺炎的严重程度和死亡危险： （一）病史 年龄65岁；存在基础疾病或相关因素，如慢性阻塞性肺疾病（COPD）、糖尿病、慢性心、肾功能不全、慢性肝病、一年内住过院、疑有误吸、神志异常、脾切除术后状态、长期嗜酒或营养不良。 （二）体佂 呼吸频率30次/分；脉搏120次/分；血压20X109/L；呼吸空气时动脉血氧分压（PaCO2）50mmHg; 血肌酐106umol/L或血尿素氮7.1mmol/L；血红蛋白90g/L或血红细胞比容0.30；血浆白蛋白25g/L；感染中毒症或弥散性血管内凝血的证据，如血培养阳性、代谢性酸中毒、凝血酶原时间和部分激活的凝血活酶时间延长、血小板减少；X线胸片病变累及一个肺叶以上、出现空洞、病灶迅速扩散或出现胸腔积液。 重症肺炎目前还没有普遍认同的标准，如果肺炎患者需要呼吸支持(急性呼吸衰竭、气体交换恶化伴高碳酸血症或持续低氧血症)、循环支持(血流动力学障碍、外周低灌注)和需要加强监护和治疗(肺炎引起的感染中毒症或基础疾病所致的其他器官功能障碍)可认为重症肺炎。目前许多国家制定了重症肺炎的诊断标准，虽然有所不同，但均注重肺部病变的范围、器官灌注和氧合状态。 我国制定的重症肺炎标,精品PPT课件 浏览免费 下载后可以编辑修改。 /jnejclxh /see161 / / /,打造最权威的专业课件,医学精品课件,本文档免费浏览阅读，下载后可以编辑修改。,22,极弱RhD变体的免疫原性,D 受血者的抗D免疫接种 通过 weak D type 2 450 D/cell 异常 weak D type 26 29-70 D/cell DEL types 30 D/cell,23,DEL=极弱RhD 变异体,常规血清学 (包括 IAT): D“ 仅通过吸附和洗脱抗D反应物检测 发现 分子遗传学筛选 回顾诊断,24,DEL: RHD 错译 及结合位点突变,所有 DEL 等位基因都与Ce相关,25,经由DEL 转输的抗D免疫接种,RHD(IVS5-38del4) 原发的/次级的 Wagner T et al. Transfusion 2005;45:520 RHD(K409K) 次级 Yasuda H et al. Transfusion 2005;45:1581 需要极低的D抗原剂量,26,DEL 抗原表达,27,DEL 红细胞与 IAT 中的anti-D,28,通过吸附/洗脱 对DEL血清学的检测,红细胞 + anti-D 吸附剂 多重清洗 红细胞沉淀 + 酸性 pH 检测洗脱物 (在IAT中 与 D+ 细胞),29,采用LgG 抗D 单克隆抗体检测RHD(IVS3+1ga)抗原表位图谱,30,IgM anti-D的吸附/洗脱,吸附作用 RT时 热洗脱 检测 (中性凝胶),31,吸附/洗脱作用检测DEL抗原表位图谱,32,在部分 DEL 个体中的Alloanti-D,所有的案例均是 RHD(IVS3+1ga): 女, 21岁: anti-D titer 32 无输血或（已知的）妊娠 女, 24岁: anti-D titer 256 无输血或（已知的）妊娠 男, 65岁: anti-D titer 4 多次输血 30岁 之前,33,连续区域: Dweak DEL,RHD(M295I) with ce (in cis): weak D type 11 (200 D/cell) with Ce (in cis): DEL weak D type 32 (Ce in cis) no C in trans: 49 D/cell with C in trans: DEL weak D type 26 (29-70 D/cell),34,D表达谱,正常 D 部分 D 弱 D 类 部分 DEL 完全 DEL,35,临床应用,正常 D 部分 D 弱 D 类型 部分 DEL 完全 DEL,可以被 anti-D 免疫 抗原表位丢失 只进行 D- 输液, anti-D预防,引出 anti-D,36,37,后天的 Rh 表型变化,未输血或HSCT,基因型: CcDdee,38,不同血型的混合凝集反应,输血 造血干细胞移植 母胎传递 操作失误 嵌合现象 遗传变异 镶嵌现象,39,自发混合 Rh 型,9例病人: 4例男性, 5 例女性 (平均年龄 63 岁) 3 例有血液肿瘤疾病 D+ 红细胞组分: 22-85% 平均追踪 33 个月 RhD 状态 从稳定的混合态 到 完全丢失,40,RhD 表型分解,D+ and D 红细胞,55%,55%,41,正常: ABO MNS P Lu Kell Fy Jk,单体型分析Rh 抗原丢失 ?,42,D+C+ D+C+ DC DC,单体型分析Rh 表型分解,D+C+,43,配型,44,微卫星标记检测: 非嵌合态,最大. 各自2个等位基因,Patient 1,45,1号染色体上的微卫星标记,血细胞杂合性缺失!,指甲 发根,血液,46,一号染色体上 杂合性丢失,仅在骨髓细胞,47,杂合性丢失的变异扩张,1号染色体,48,有核的红细胞前体: BFU-E,单克隆的DNA分离,49,RH-PCR 的 单个 BFU-E 集落,50,LOH（血细胞杂合性）只在 RHD BFU-E 克隆中,血,BFU-E: CcDe,BFU-E: 只有 ce (CD),51,FISH: 1p (RH, green) and 1q (red),体细胞复制重组,缺失,骨髓的,淋巴细胞对照,1x RH,2x RH,52,骨髓干细胞的杂合性缺失,纯合子的 cde/cde 所有其他的病人,半合子的 cde/- - - 病人 3,53,基因分量及Rh抗原表达,54,自发 Rh 表型分解,嵌合体(只有很少的嵌合体) 染色体 1上的LOH（血细胞杂合性） 骨髓干细胞 重叠或缺失 肿瘤形成 肿瘤抑制因子 on 1p LOH 癌症 遗传指数会老化 ? 嵌合式供血者的抗D免疫,55,做出贡献的科学家们,Shenzhen (China): Chao-Peng Shao Bristol (UK): Geoff Daniels Tokyo (Japan): Makoto Uchikawa Graz (Austria): Thomas Wagner,Vienna (Austria): Gnther F. Krmczi Wolfgang R. Mayr Simon Panzer Gttingen (Germany): Tobias J. Legler Innsbruck (Austria): Christoph Gassner Diether Schnitzer,56,多种 肺炎 细菌均可引起大叶性肺炎，但绝大多数为肺炎链球菌，其中以型致病力最强。肺炎链球菌为革兰阳性球菌，有荚膜，其致病力是由于高分子多糖体的荚膜对组织的侵袭作用。少数为肺炎杆菌、金黄*色葡萄球菌、溶血性链球菌、流感嗜血杆菌等。肺炎链球菌为口腔及鼻咽部的正常寄生菌群，若呼吸道的排菌自净功能及机体的抵抗力正常时，不引发肺炎。当机体受寒、过度疲劳、醉酒、感冒、糖尿病、免疫功能低下等使呼吸道防御功能被削弱，细菌侵入肺泡通过变态反应使肺泡壁毛细血管通透性增强，浆液及纤维素渗出，富含蛋白的渗出物中细菌迅速繁殖，并通过肺泡间孔或呼吸细支气管向邻近肺组织蔓延，波及一个肺段或整个肺叶。大叶间的蔓延系带菌的渗出液经叶支气管播散所致。 编辑本段临床表现 多数起病急骤，常有受凉淋雨、劳累、病毒感染等诱因，约1/3患病前有上呼吸道感染。病程710天。 （一）寒战、高热：典型病例以突然寒战起病，继之高热，体温可高达3940，