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文档简介
植物有丝分裂的制片与观察,王飞 2012.10,实验目的,掌握植物根尖细胞有丝分裂的制片技术 观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征,找出有丝分裂各个时期的代表性细胞,总结有丝分裂过程中染色体的动态变化。,实验材料及流程,大蒜 2n=16 生根-取材-固定- 解离-漂洗-染色-压片-镜检,1.根冠 2.分生区 3.伸长区,水培生根(已完成),取材(已完成),根尖部位 1.5-2cm 长,固定(已完成),目的:终止细胞生长过程及一切生理生化反应,维持细胞结构不变 方法:Carnoy固定剂(3份95%乙醇,1份乙酸),处理2-4h 原理:迅速穿透细胞致死,乙醇-脱水收缩 乙酸-膨胀,解离,目的:破坏细胞间果胶质和纤维素,使细胞容易散开 方法:1M HCl 烧杯60预热 处理5min 注意:每组统一用纱布取根尖样本,流水漂洗数秒,转移样本到烧杯内并计时,漂洗,目的:去除残留的盐酸,恢复低渗环境 方法:纱布内用蒸馏水或清水漂洗干净,之后在平皿中浸泡待用,剥离分生组织,1 截取3mm左右根尖区域,置于载玻片上 2滤纸吸干多余水分后用解剖针去除半透明状非分生组织,留取白色分生组织 注意:宁滥毋缺,染色,染色液:石碳酸品红(卡宝品红),染色质特异染料 步骤: 1 滴加1-2滴染色液 2 染色5min,压片,单侧慢放盖玻片(领取) 滤纸吸干多余液体 镊子轻敲使细胞分散 如镜检发现细胞分散不完全可重复按压细胞,镜检,10倍或4倍镜锁定目标细胞 40倍镜观察细节并绘图 光栅、光源、镜头洁净度、细胞分散度、使用记录,各个时期细胞实物图及手绘图,前期,间期,中期,后期,末期,前中期,注意事项,操作盐酸和染液时要小心不要接触皮肤,不要溅到实验台或显微镜上 酸解时间不要过长 压片不要用力太猛 显微镜使用规范,实验报告要求,课上完成实验记录(实验步骤,现象),教师签字 课后补充完成全部实验报告(目的,原理,结果,讨论等其他细节) 实验结果的要求:每个时期的细胞图片(照片或手绘) ,各时期特点 讨论部分:针对实验
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