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文档简介

血清中总胆固醇的测定,实验三,(胆固醇氧化酶法),一、实验目的,学习胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。 掌握血清总胆固醇的测定方法及操作技术。,(1),(3)H2O2+4-氨基安替吡啉(4-AAP)苯酚,H2O 红色醌类物质,过氧化物酶 (POD),510nm,光吸收法测定,相对血清总胆固醇浓度,二、实验原理,血清总胆固醇,三、实验器材,材料:人血清 试剂:总胆固醇测定试剂盒 用具:分光光度计,微量移液枪,试管,试管架,恒温水浴锅,(1)取3支试管,按下表加入试剂:,四、实验步骤,充分混匀,37 水浴中保温15min;,冷却至室温后,510nm处比色,比色方法:以空白管调零,读取标准管及样品管光密度值。,(2)计算: 依据朗伯-比尔定律: A=KLC 标准管胆固醇浓度:5.17mmol/L,参考值,胆固醇 血清参考值:3.0 5.20mmol/L 危险阈值:5.20 6.20mmol/L 高胆固醇血症: 6.20mmol/L,正确使用比色器皿:手拿比色皿的毛面;比色液应占比色皿的2/3。 测定胆固醇所用的试剂应防止被葡萄糖和甘油三酯污染。 微量移液枪的正确使用,注意事项,思考题,1、简述胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的基本

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