浅谈热原监测方法体会.doc

浅谈热原监测方法体会 作者：许慧琴，田祝娇，黄旭真，李惠刁 【关键词】 热原监测；方法；体会热原监测是利用鲎血细胞溶解物与微量细菌内毒素起胶化反应，从而检测微量内毒素的一种实验技术。此法具有特异性强、灵敏度高、重观性好等优点。我院自1990年开展热原监测工作以来。经过了反复实践，每次试验检查都能取得了一次性的成功，提高工作效率，经检查过的无菌物品及一次性注射器、针头、输血器及其他物品等，发出各临床使用至今未出现过因一次性输液器及其他物品有菌而引起反应，有效地控制院内感染，受到各临床科室较好的评价，连年来被评为先进科室。现将我们在检测过程中必须注意的几方面做法介绍如下。1 保证无菌物品灭菌，去热原影响鲎试验过程的诸因素中，最关键的是物品灭菌、去热原，提供一份无菌，无致热质的物品，是做试验必备的首要条件。做法是：11 注射器，针头的清洗 采用去污去热原去洗涤剂清洗蒸洗五个环节。“针头可用超声清洗机”超30 min后，再用针头机逐个冲洗。12 合理包装 装入包装盒里的物品不宜放置过久才高压灭菌，一般不能超过2 h，以免细菌繁殖，重新产生热原。13 物品的消毒灭菌 我们常用的一般高压灭菌，只能杀死细胞，不能破坏已有热原，所以必须注意几点：灭菌物品的体积大小要适宜，放置要合理，包与包之间应留有间隙，有利于蒸汽渗透，炉内物品的总量不超过85；操作过程要正确，排冷空气要彻底，压力、温度、时间达到所需指标；每天早晨采用BD试验，每月用嗜热脂肪杆菌芽胞检测效果；炉内物品必须烤干，防止由于物品潮湿而影响灭菌质量不合格。灭菌后物品应有消毒灭菌日期和标志，并存放在无菌室内，有效期为1周。2 鲎试剂用物准备将准备好的用物放于红外线烤箱180 2 h即可，用物的准备是不可忽视的问题，我们实践过去几次破坏性试验，在鲎试验的其他方面不受的条件下，用物放入红外线烤箱180 1 h，160 1 h，所得到鲎试验结果均为阳性。3 操作者技术正确31 环境 鲎试验的环境，在检测时要在专用间进行，室内保持整洁，检测前用005健之素擦操作台及拖地面，然后用紫外线照射40 min以上。32 操作人员 操作者要专人负责，在操作过程中，严格执行无菌操作，认真细致，实事求是。33 操作方法 一般来说，鲎试剂灵敏度越高越好，检品能通过高灵敏度鲎试剂检验，说明检品的质量好，但有时因鲎试剂的灵敏度过高出现检品阳性率高，这需要操作者准确、精密，鲎试剂只能按标示量溶解，最多只能允许增加10(如05 ml支最多只能用055 ml溶解液溶解，01 ml支只能用02 ml溶解)，其灵敏度基本不变，如溶解度再增加，稀释度加大并不按比例下降，而是全部不形成凝胶。操作时要注意1 ml注射器与7号针头含接牢固，按标示量溶解水加入鲎试剂中，待鲎试剂完全溶解后，吸药液时针尖斜面向下，安瓶稍斜，慢吸，这样药液几乎完全吸取，如果药液有气泡，请不要将气泡滴入试管内，否则出现阳性。4 恒温水箱的温度调节4.1 操作完毕后各试管盖上胶布，做好轻旋转后放于37 恒温水溶箱里1 h，不能随便振动，恒温箱温度控制在37 左右，防止温度偏差造成不准确，要定期检测，防止失控，度差不能超过05 。42 1 h后从箱里轻轻取出后，缓慢倒转180 时，看管内液体是否流动，如液体凝固为“阳性”液体能流动均为“阴性”，如不符合上面条件者，说明不成功，要重新做试验，如阳性管出现阴性结果应考虑是否鲎试剂灵敏度降低或内毒素是否失效。以上几方面是我们连年来在使用鲎试验的过程中必须掌握的主要环节，我深深地体会到要使监测工作做好，只要有高度责任心的专职人员，严格执行无菌操作，正确掌握操作技术才能确保一次性试验成功，而且准确率达100。【参考文献】 1 卫生部