CD4CD25调节性T细胞在肺癌患者外周血的表达及临床意义.doc

CD4+CD25+调节性T细胞在肺癌患者外周血的表达及临床意义【摘要】 目的：探讨晚期肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的表达及其临床意义。方法：采用流式细胞仪检测30例肺癌患者化疗前、后外周血中Treg的水平，并与30例健康人(对照组)进行比较。结果：(1)肺癌患者外周血中Treg比例为(15.02.3)%明显高于对照组(7.12.0)%(P<0.001);(2)化疗前肺癌患者外周血中Treg为(15.02.3)%明显高于化疗后的(6.81.8)%(P<0.001);(3)Treg水平与病理类型无关(P>0.05)，与临床分期有关(P<0.01)。结论：晚期肺癌患者外周血中Treg升高，其水平变化可能可以作为评估肺癌患者疗效的指标。 【关键词】 肺肿瘤; CD4+CD25+调节性T细胞;流式细胞检测仪ABSTRACT Objective:To investigate the expression of CD4 + CD25+ regulatory T cells in peripheral blood of patients with lung cancer and its clinical significance.Methods: Treg levels of 30 lung cancer patients which were counted by flow cytometer before and after chemotherapy were compared with that of 30 healthy people. Results: (1) percentage of Treg in lunge cancer patients was (15.02.3)% and is higher than (7.12.0)% in health people with significant difference (P<0.001) (2) Treg level in lung caner patients before chemotherapy was (15.02.3)% , obvious higher than (6.81.8)% of that after chemotherapy(P<0.001). (3) Treg level is not related to the pathologic type of lung cancer(P>0.05) but is relative to its clinical stage(P<0.01). Conclusion: Treg level in peripheral blood of patients with lung cancer is higher than that of healthy people and can be an indicator for curative effects evaluation of lung cancer.KEY WORDS Lung cancer; CD4 + CD25 + regulatory T cells; Flow cytometer众所周知，肿瘤的发生、发展,转移与患者机体的免疫功能状态相关，肺癌患者免疫功能低下，往往导致病情的进展和治疗的失败。目前临床研究表明，在多种恶性肿瘤患者中，CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)水平升高，可能与免疫抑制、肿瘤进展有关1。本研究采用流式细胞仪测定Treg在肺癌患者外周血的表达，探讨Treg值变化对评估晚期肺癌患者疗效的作用。1 资料和方法1.1 一般资料收集海口市人民医院肿瘤科2008年1月2009年5月就诊的晚期肺癌患者30例临床资料，其中男性28例，女性2例，年龄3571岁，平均(56.57.3)岁。组织学类型及分级：鳞癌15例，腺癌3例，小细胞未分化癌12例，均经病理学或细胞学证实。根据1997年国际抗癌联盟标准进行临床分期：期14例，16例。所有患者均无相关免疫性疾病和其他肿瘤病史，且无使用激素类药物及免疫抑制剂史。对照组为肿瘤医院健康体检职工30例，其中男性25例，女性5例，年龄3170岁，平均(55.05.4)岁。1.2 方法分别采集化疗前、后肺癌患者、健康献血者外周静脉血2 mL，肝素抗凝，取静脉全血100 uL，分别加入CD4PE标记和CD25FITC标记的单克隆抗体(mAb)20 uL，设相应的阴性同型对照，室温闭光反应30 min，然后加2 mL溶血剂，5 min后离去上清，再加0.51.0 mL的PBS液洗涤2次，流式细胞仪(BD公司，FACS Calibur)检测，Cellquest软件分析数据，记录阳性细胞百分率，减去非特异对照值，样品在6 h内检测完毕。1.3 统计学处理采用SPSS 11.5统计软件进行方差分析及两两比较，实验的数据以(s)表示，组内前、后比较采用配对t检验，检验水准 a=0.05。2 结果2.1 化疗前肺癌患者与对照组外周血Treg比较治疗前肺癌患者外周血中Treg比例为(15.02.3)%，明显高于对照组(7.12.0)%(P<0.001)。2.2 肺癌患者化疗前、后Treg比较化疗前肺癌患者外周血中Treg为(15.02.3)%，明显高于化疗后(6.81.8)%(P<0.001)。2.3 肺癌患者外周血Treg数量与病理类型、临床分期的关系肺癌患者外周血中Treg数量与患者的病理类型无关(P>0.05)，但与临床分期有关(P<0.01)(表1)。表1 Treg与临床生物学特征的关系(%，s)注：与期比较P<0.01。3 讨论CD4+CD25+Treg是近年发现的一群新型免疫抑制性T细胞，以往研究发现Treg在多种肿瘤患者的外周血和肿瘤组织中均有增高1,2，提示肿瘤细胞可能通过某种机制诱导了Treg的增殖和分化，同时其水平的增加可以促进肿瘤的生长，抑制抗肿瘤免疫效应3，Treg可能是参与肿瘤微环境中抑制免疫应答的细胞之一。本组资料通过对30例肺癌患者和30例健康人外周血Treg水平检测，同样发现肺癌患者Treg水平显著高于健康人，提示肿瘤细胞通过某种机制增加Treg表达，同时Treg通过某种机制来促进肿瘤的生长和抑制机体的免疫应答4。本组发现化疗后Treg比例下降，提示经化疗后患者体内的肿瘤细胞减少，对Treg诱导作用减弱，Treg水平下降。并发现Treg水平与病理类型无关，而与临床分期有关，提示晚期肺癌患者免疫功能受到抑制。通过研究，我们认为肺癌患者外周血中Treg水平升高，可能是晚期肺癌免疫功能抑制的原因之一，监测其水平变化可能可以作为评估肺癌患者疗效、预后的一项指标。【参考文献】 1 Okita R, Saeki T, Takashima S, et al. CD4+CD25+ regulatory T cells in the peripheral blood of patients with breast cancer and nonsmall cell lung cancerJ. Oncol Rep, 2005, 14(5):12691273.2 Wolf AM, Wolf D, Steurer M, et al. Increase of regulatory T cells in the peripheral blood of cancer patientsJ. Clin Cancer Res, 2003, 9(2):606612.3 Terabe M, Berzofsky JA. Immunoregulatory T cells in tumor immunityJ. Curr Opin Immunol, 2004, 16:157162.4 Seo N, Hayakawa S, Takigawa M, et al. Interle