《食品微生物应用技》PPT课件.ppt

食品微生物应用技术,培养基配制技术,培养配制技术,培养基是人工配成的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物需要的营养基质。 一.微生物的营养及其功能 微生物对营养物质的需要有六大类，既水分，碳源，能源，因子（生长因素）和无机盐。,1.水分 微生物细胞含水量占细胞鲜重70%-90%。其中一部分为结合水，不易结冰和蒸发，是细胞物质的组成部分。 2.碳源 能给微生物细胞成长或代谢提供碳架来源的营养物质统称为碳源。常用的碳源有糖类、油脂、有机酸及有机酸酯和小分子醇。 根据微生物所能产生的酶系不同，不同的微生物可利用不同的碳源。 3.氮源 能给微生物生长繁殖提供所需氮素的物质称为氮源。氮元素是核酸和蛋白质的重要组成元素，含量仅次于碳和氧。 4.能源 能能给微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射。 5.无机盐 能为微生物生长提供除碳源，氮源以外的各种必须的矿物元素，是微生物生长必不可少的一类营养物质。,无机盐的简单介绍,无机盐的简单介绍： 无机盐即无机化合物中的盐类，旧称矿物质，在生物细胞内一般只占鲜重的1%至1.5%，目前人体已经发现20余种，其中大量元素有钙Ca、磷P、钾K、硫S、钠Na、氯Cl、镁Mg，微量元素有铁Fe、锌Zn、硒Se、钼Mo、氟F、铬Cr、钴Co、碘I等。虽然无机盐在细胞、人体中的含量很低，但是作用非常大，如果注意饮食多样化，少吃动物脂肪，多吃糙米、玉米等粗粮，不要过多食用精制面粉，就能使体内的无机盐维持正常应有的水平。,微生物的营养类型,依据微生物获取能源，碳源，氢或电子供体方式的不同将微生物分为4类营养类型：光能自养型，光能异养型，化能自养型和化能异养型。 一.光能自养型 光能自养型微生物含有色素，能利用光能作为能源进行光合作用，也CO2为唯一或主要碳源，以水或还原态无机物（H2S,NaS2O3等）为为氢体合成自身所需细胞物质。 光能自养型微生物的光合作用分为产氧光合作用和不产氧光合作用两种类型。,二.光的异养型 凡能利用光能，以简单有机物（有机酸，醇等）为碳源和氢体同化CO2的微生物称为光能异养型微生物。 三.化能自养型 以无机化合物氧化时释放的能量为能源，以CO2或碳酸盐为碳源，合成细胞物质的微生物叫化能自养型微生物。 四.化能异养型 这是大多数动物和细菌的营养方式，以有机物为C源和能源，来合成自身有机物。,三.微生物营养物质的摄取方式,1.单纯扩散 单纯扩散又称被动扩散，营养物质顺浓度梯度，以扩散的形式进入细胞内，是最简单的物质运输方式。 2.促进扩散 促进扩散又称易化扩散、协助扩散，或帮助扩散。是指非脂溶性物质或亲水性物质, 如氨基酸、糖和金属离子等借助细胞膜上的膜蛋白的帮助顺浓度梯度或顺电化学浓度梯度, 不消耗ATP进入膜内的一种运输方式。,3.主要运输 通过细胞膜上特异性载体蛋白结构的变化，同时消耗能量，使膜外低浓度物质进入细胞内的一种物质运送方式。是微生物物质运送的主要方式。 4.基团移位 基团移位是一类既需要特异性载体蛋白的参与又需耗能的物质运输方式。,四.培养基的制备技术,一.培养基的配制原则 1.营养的适宜 不同的微生物对各种营养物要素的种类，数量和比例要求不同，因此，在配制培养基时首先要考虑的原则就是根据不同的微生物的营养特点来配制培养基。 2.有的放矢 针对不同的培养对象及目的，选取或设计不同营养是培养基。 3.营养协调 营养协调是指各营养物质之间有恰当的比例。 4.酸碱度适当 各种微生物都有其适应的PH值，霉菌和酵母菌最适应的PH为4.5-6.0.细菌7.0-8.0.放线菌7.5-8.5，其他特殊的微生物所需PH差异都很大。 5.调节氧化还原的电位（Eh）于参透压。 各种微生物对培养基的Eh值要求不同。,6.用料经济 在设计发酵生产用培养基时，尤其考虑到培养基的成本。 培养基的类型 1.按微生物的种类分 可将培养基分为：细菌培养基、放线菌培养基、霉菌培养基和叫霉菌培养基。 2.按培养基的成分分 可以分为天然培养基、合成培养基、半合成培养基。 3.按培养基的用途分 （1）基础培养基（2）加富培养基（3）选择培养基（4）鉴别培养基 4.按培养基的物理状态分 （1）液体培养基（2)固体培养基（3）半固体培养基 5.其他,三.培养基的制备方法,首先选择培养基的配方和类型 根据所需微生物种类和培养目的的选择培养基的配方。,加琼脂,无菌处理,制斜面或倒平板,无菌检查,称量-溶解-定容 调PH值-过虑,分装-加塞包扎 -灭菌,配制培养基 溶液,固体培养基和液体培养基的流程,药品的称量 溶解 调PH值 液体培养基 加琼脂融化 固体培养基 过滤分装 加棉塞 包扎标记 灭菌 无菌检查,配制培养基过程中的注意事项,配制培养基的过程中，注意防止产生沉定，光热分解和杂细菌感染等现象而造成的营养成分损失。 加热溶解培养基原料物质时，一般先加无机物后加有机物；难溶物质可以先分别溶解后再加入；易受高温破坏的试剂单独配制，过滤灭菌后，在使用前加入。,谢谢观看！,药品的称量,根据培养基配方依次准确称量各种药品，放入适当容器中。 加入的一般培养基配方用1000ml培养基中含各种成分的质量用（g）来表示。,加热溶解,在盛有药品的适当容器中加入少量自来水或蒸馏水（约占总量的1/2）然后放在有石棉网的电炉上小火加热并用玻璃棒搅拌，待药品完全溶解后，停止加热，在补充水分。,3.调节PH 取适当范围的精密pH试纸一小条，用玻璃棒取少许待测培养基滴在试纸上，与比色板对照颜色,过滤分装,趁热（60度以上）用滤纸或多层纱布在玻璃漏斗中过滤，使培养基清澈透明，便于观察。 分装按要求，可将培养基分装入试管内或三角瓶内。,7.加棉塞 在试管口塞上用普通棉花制作的棉塞 8.包扎标记 包扎时，对于试管可捆扎好，再在棉塞外面包一层牛皮纸,无菌检查,为了检查培养基是否彻底，抽取制备好的培养基1-2管瓶，放置37摄氏度温箱中培养24-