直肠癌组织中CXCR4和VEGFC表达的临床意义.doc

直肠癌组织中CXCR4和VEGF-C表达的临床意义 作者：符炜，李爱娜，徐红，王玉兰【摘要】 目的 探讨趋化因子受体CXCR4(CXC chemokine receptor 4，CXCR4)和血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)在人直肠癌组织、癌旁组织和淋巴结中的表达及意义。方法 采用免疫组织化学方法检测10例癌旁正常黏膜组织、50例癌组织和相关淋巴结中CXCR4与VEGF-C的蛋白表达情况，并分析其与临床病理特征之间的关系。结果 CXCR4与VEGF-C在直肠癌组织中均有高表达，CXCR4的表达率为72%，VEGF-C的表达率为92%，与癌旁正常组织相比差异均有统计学意义。转移淋巴结中CXCR4表达的阳性率为95%，VEGF-C表达的阳性率为93%，与无淋巴结转移组相比差异均有统计学意义。同时CXCR4和VEGF-C的表达与癌组织的不同侵润程度、组织分化程度和病理分期之间有密切关系，且两者呈正相关。结论 CXCR4和VEGF-C在直肠癌组织和转移淋巴结中的表达呈正相关，提示CXCR4和VEGF-C在直肠癌肿瘤的侵润、转移过程中起协同作用，并可作为评估直肠癌组织淋巴结转移的指标之一。 【关键词】 直肠癌;趋化因子受体CXCR4;血管内皮生长因子-CAbstract: Objective To investigate the expression of CXC chemokine receptor4 (CXCR4) and vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) in human rectal tumor tissues, cancer adjacent tissues, lymph node and to explore the clinical significance. Methods The expression of CXCR4 and VEGF-C was determined by immunohistochemistry in adjacent normal mucosa of 10 cases and in rectal cancer tissues and relevant lymph nodes of 50 cases . The correlation of the 2 kinds of protein and their relationship with clinicopathologic characteristics were analyzed. Results CXCR4 and VEGF-C were highly expressed in rectal tumor tissues. The positive expression of CXCR4 in rectal cancer was 72% (P<0.05), and that of VEGF-C was 92% (P<0.01). There was significant statistical difference compared with the normal cancer adjacent tissues. The positive expression of CXCR4 in lymph node metastasis group was 95% (P<0.05), and that of VEGF-C was 93% (P<0.01). With significant statistical differences compared with no metastasis group. The positive expression of VEGF and CXCR4 were correlated with the tumor of invasion, differentiation and Dukesstage, and the expression of VEGF was positively correlated with CXCR4. Conclusion There is correlation between the expression of VEGF and CXCR4 in the rectal cancer tissues and lymph node (r=1.000,P<0.01), suggesting that they may have synergistic effect in the invasion and metastasis of rectal tumor and they can be considered as an important indicator to the lymph node metastasis of rectal tumor.Key words: rectal tumor; CXC chemokine receptor 4; vascular endothelial growth factor C淋巴转移是结直肠癌常见的转移方式，并且是影响患者预后的重要因素。趋化因子受体CXCR4(CXC chemokine receptor 4，CXCR4)与肿瘤的侵润、转移有关;血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)可以诱导肿瘤相关的淋巴管生成，并与随之而来的肿瘤淋巴道转移相关1。CXCR4受体在肿瘤中的作用已成为近年研究的热点。我们运用免疫组织化学方法检测了人直肠癌组织、癌旁正常组织、转移淋巴结和未转移淋巴结中CXCR4与VEGF-C的表达情况，并分析探讨了其在直肠癌中表达的相关性和与临床病理特征之间的关系。1 资料和方法1.1 临床资料 收集2005年1月2005年12月于本院普外科住院行直肠肿瘤切除术、临床资料完整的存档蜡块50例。其中伴有淋巴结转移40例，不伴有淋巴结转移10例。WHO统一标准进行组织学分级，其中高中分化腺癌38例，低分化腺癌12例。Dukes分期：A B期14例，CD期36例。另有10例标本取自直肠癌距肿块边缘1015 cm的癌旁正常黏膜组织作为对照。1.2 试验材料与和方法 兔抗人CXCR4 多克隆抗体购自Abcom公司，VEGF-C多克隆抗体购自博士德公司。免疫组织化学染色采用ABC法。CXCR4和VEGF-C一抗工作浓度为1200，用PBS 代替一抗作为阴性对照。1.3 结果判断标准 CXCR4和VEGF-C阳性细胞均为细胞膜或细胞质出现棕色或棕黄色颗粒。判定结果参考Kawasaki等2报道的方法，根据染色的强度及阳性细胞百分率来判定。阳性细胞的染色强度按无着色、淡黄色、棕黄色和棕褐色分别计分为0、1、2、3分;阳性细胞百分率计算：每张切片在400镜下分别取5个视野，分别计算阳性细胞的百分率，取其平均值, 0分为5%，1分为5%25%为，2分为25%50%，3分为50%75%， 4分为>75%。然后根据两项打分之和判断结果: 0分为阴性(-)，<3分为阳性(+)，36分为中度阳性(+)，>6分为强阳性(+)。1.4 统计学处理 应用SPSS 13.0统计软件进行数据处理，计量资料采用2检验，并计算Spearman相关系数，P<0.05认为差异有统计学意义。2 结 果2.1 CXCR4和VEGF-C蛋白表达情况 CXCR4和VEGF-C的阳性表达主要位于癌旁正常组织、癌组织和淋巴结细胞中的胞膜和胞质，呈不同程度的棕黄色或棕褐色(图1、2)。CXCR4和VEGF-C在癌组织的表达强度均明显高于癌旁正常组织(P<0.05或P<0.01)。淋巴结转移标本中CXCR4、VEGF-C阳性表达率均高于无淋巴结转移组(P<0.05或P<0.01)。见表1。表1 不同组织中CXCR4、VEGF-C的表达与癌旁正常组织比较：*P<0.05，*P<0.01;与无淋巴结转移比较：#P<0.05，#P<0.012.2 CXCR4和VEGF-C的表达与临床病理特征的关系 CXCR4和VEGF-C在不同侵润程度、不同组织分化程度和不同病理分期的癌组织中的表达差异有统计学意义(表2)。表2 CXCR4和VEGF-C的表达与直肠癌临床病理参数的关系2.3 直肠癌中CXCR4与MMP-2蛋白表达的相关性 在50例直肠癌组织中CXCR4和VEGF-C呈共阳性表达者35例，共阴性表达者3例，CXCR4 阳性而VEGF-C阴性者1例，VEGF-C阳性而CXCR4阴性者11例，Spearman等级相关分析得出CXCR4与VEGF-C呈正相关(r=1.000，P<0.01)。3 讨 论肿瘤的侵袭和转移是恶性肿瘤重要的生物学特征之一。其中，淋巴道转移是恶性实体肿瘤最常见的转移方式之一，趋化因子(chemokines)在某些肿瘤的定向转移中起着重要作用。CXCR4是趋化因子CXCL12专属受体，在某些肿瘤的转移过程中也发挥着至关重要的导向、驱动和定位作用3。目前，SDF-1/CXCR4生物学轴在肿瘤转移中的作用已分别在乳腺癌、非小细胞肺癌和前列腺癌等不同类型肿瘤的研究中得到初步证实，并与患者的预后密切相关4-5。淋巴管内皮标志物在淋巴管生成中起着重要作用，并参与生理及病理淋巴系统发生、发展的过程，在恶性肿瘤的淋巴转移过程中起着重要作用。血管内皮生长因子(VEGF)家族是与肿瘤血管生长有关的最重要因子之一，其成员之一VEGF-C可分别结合血管内皮细胞受体-2(vascul endotheliar growth factor receptor-2, VEGFR-2)及淋巴管内皮细胞表面受体VEGFR-3，调节血管及淋巴管的生理功能，参与肿瘤血管的生成过程，对肿瘤的侵袭生长及转移有重要意义6。本研究结果证实，直肠癌组CXCR4和VEGF-C的表达明显高于癌旁正常组织组(P<0.05或P<0.01)，说明它们的表达促进了肿瘤的进程。CXCR4和VEGF-C在淋巴结转移组的表达也明显高于无淋巴结转移组(P<0.05或P<0.01)，提示CXCR4和VEGF-C与肿瘤的淋巴结转移密切相关;而且CXCR4和VEGF-C的表达与癌组织的不同侵润程度、分化程度和Dukes病理分期有关;进一步分析得出CXCR4和VEGF-C在直肠癌组织的表达呈正相关，提示CXCR4和VEGF-C的相互作用可能在直肠癌的生成、侵袭和转移中起到协同作用，因此，我们认为CXCR4和VEGF-C可作为评估直肠癌组织淋巴结转移的指标。综上所述，CXCR4和VEGF-C在直肠癌预后判断中有重要价值。结合临床病理检查对指导直肠癌分期，判定预后有辅助价值，并有可能成为将来治疗的靶点，值得进一步深入研究。【参考文献】 1 Su JL, Yang PC, Shih JY, et al. The VEGF-C/Flt-4 axis promotes invasion and metastasis of cancer cells J.Cancer Cell，2006，9(3):209-223.2 Kawasaki H, Altieri DC, Lu CD, et al. Inhibition of apoptosis by survivin predicts shorter survival rates in colorectal cancer J. Cancer Res,1998, 58(22): 5071-5074.3 Balkwill F.The significance of cancer cell expression of the chemokine receptor CXCR4J.Semin Cancer Biol，2004，14(3):171-179.4 Liu F, Lang R, Wei J, et al. Increased expression of SDF-1/CXCR4 is associated with lymph node metastasis of invasive micropapillary carcinoma of the breast J. Histopathology， 2009，54(6): 741-50.5 Imai H, Sunaga N, Shimizu Y, et al. Clinicopathological and therapeutic significance of CXCL12 expression i