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文档简介
离体小肠平滑肌的 生理特性,目的,通过观察化学物质、温度变化对离体小肠平滑肌收缩的影响,使学生掌握离体小肠平滑肌收缩的记录方法,加深对平滑肌某些基本特性的理解。,原理,平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外,还具有自动节律性收缩的特性,并且受肠壁内神经丛与外来植物性神经的支配。离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。离体小肠实验不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性,而且还可用来研究各种因素对平滑肌的影响。,方法与步骤,一、实验准备,1.恒温平滑肌浴槽装置,向中央标本槽内加入台氏液至浴槽高度的2/3处。外部容器为水浴锅加自来水。启开电源,恒温工作点定在38。,2.标本制备,向兔耳缘静脉注射空气(或用木棒猛击兔的后脑部)使其致死,背位固定于手术台上,腹部剪毛后,沿正中线切开皮肤和腹壁,找到胃,以胃幽门与十二指肠交界处为起点,快速沿肠缘剪去肠系膜,然后再剪取2030 cm长的十二指肠,置于4左右的台氏液中轻轻漂洗,可用注射器向肠腔内注入台氏液冲洗肠腔内壁,并置于46台氏液中备用。,3.仪器连接,实验时将肠管剪成23 cm的肠段,用棉线结扎肠段两端,将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上,另一端连于张力换能器,适当调节换能器的高度,使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直,并且不能与浴槽壁接触,避免摩擦。用塑料管将充满气体的球胆或增氧泵与浴槽底部的通气管相连,调节塑料管上的螺旋夹,让通气管的气泡一个一个的溢出,为台氏液供氧。将张力换能器输入端与系统的通道相连,进入生物机能实验系统,选择对应通道项目为张力。,二、实验项目,1.观察、记录38 台氏液中的肠段节律性收缩曲线。,2.观察、记录25台氏液中的肠段节律性收缩曲线。,3.待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38后,加1:10 000肾上腺素12滴于中央标本槽中,观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后,用预先准备好的新鲜38台氏液冲洗三次。,4.待肠段活动恢复正常后,再加1:10 000乙酰胆碱12滴于中央标本槽中,观察肠段收缩曲线的改变,作用出现后同上法冲洗肠段。,5.向中央标本槽内加入1 molL-1NaOH溶液12滴,观察肠段收缩曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。,6.向中央标本槽内加入1 molL-1HCl溶液12滴,观察肠段收缩曲线的改变。待作用出现后同上法冲洗肠段。,7.向中央标本槽内加入1%CaCl2溶液23滴,观察肠段收缩曲线的改变。,注意事项,1.实验动物先禁食24 h,于实验前1 h喂食,然后处死,取出标本,肠运动效果更好。,2.标本安装好后,应在新鲜38台氏液中稳定510min,有收缩活动时即可开始实验。,3.注意控制温度。加药前,要先准备好更换用的新鲜38台氏液,每个实验项目结束后,应立即用38台氏液冲洗,待肠段活动恢复正常后,再进行下一个实验项目。,4.实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量,若效果不明显,可以增补剂量,但要防止一次性加药过量。,结果与分析,一、低温对离体肠肌活动的影响,离体肠肌收缩减弱。温度降低,肠肌细胞兴奋型降低,代谢相关酶活性降低,肠肌代谢水平降低,肠肌收缩减弱。,二、滴加肾上腺素,离体肠肌收缩减弱。肾上腺素可与肠肌细胞膜上肾上腺素能受体(、型)结合,一方面可使Ca2+、K+外流增加,细胞膜电位发生超极化,兴奋性降低;另一方面可促进肌膜和肌浆网膜上钙泵活动加强,使肌浆内Ca2+浓度降低,肌张力减弱。,三、滴加乙酰胆碱,离体肠肌收缩加强。乙酰胆碱可与肠肌细胞膜上M型受体结合,使肌膜上Ca2+通道开放, Ca2+内流,肌浆内Ca2+浓度升高,肠肌收缩加强。,四、滴加NaOH,离体肠肌收缩加强。H+浓度降低,促进Ca2+通道开放,Ca2+内流增加;促进肌浆网释放Ca2+;促进Ca2+与肌钙蛋白结合,最终导致肠肌收缩加强。,五、滴加HCl,离体肠肌收缩减弱。H+浓度升高,抑制Ca2+通道开放, Ca2+内流减少;抑制肌浆网释放Ca2+;抑制Ca2+与肌钙蛋白结合,最终导致肠
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