两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比.doc

两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比 作者：龙青文，何建军，马家驹，何秀琳，肖金平 【关键词】 酶联；血清乳胶；定性分析关键词 酶联；血清乳胶；定性分析乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBsAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)的检测在许多方面如诊断乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平，对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用。故选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要。现将56例检测者血清同时用酶联免疫法和血清乳胶层析法对比检测结果报告如下。材料与方法1.1标本来源56例受检者中，男29例，女27例，最大年龄72岁，最小年龄29岁，平均年龄46岁；来自健康体检人群15例，其中13例检测具有阳性结果，2例各项指标均为阴性、另41例为门诊检查结果有阳性的患者，均系血清标本。12方法酶联免疫法用乙型肝炎病毒(HBsAg，HBsAb，HBeAg、HBeAb，HBcAb)诊断试剂盒，由上海华泰生物工程实业有限公司生产，48人份，批号20040503，按说明书操作。乙肝两对半血清/血浆乳胶层析法检测试剂板由ACONLaboratories.Inc.SanDiegoCA92121USA提供，批号200407029，按说明书操作。1.3质量控制酶联免疫法每项检测项目均设阴、阳性对照各2孔，每空加入阴性对照(或阳性对照)各1滴，并设有空白对照1孔。乳胶层析法各项检删项目均设质控区(C)。1.4检测结果判定标准：酶联免疫法是根据颜色的变化，作定性分析。此法HBsAg、HBsAb、HBeAg呈黄色为阳性反应，无色为阴性反应，阳性对照为黄色，阴性对照为无色。HBeAb、HBcAb无色为阳性，黄色为阴性，阳性对照为无色，阴性对照为黄色。乳胶层析法HBsAG、HBsAb、HBeAg在测试区内(T)出现一条红色条带则是阳性结果，不出现红色条带则为阴性。HBeAb、HBcAb结果则相反，强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带，弱阳性标本测试区内(T)将有一条非常弱的红色条带，阴性标本测试区(T)将会出现明显的红色条带。无论相应的待测物质是否存在于标本中，质控区(C)都会出现红色条带。两种检测方法结果对比分析用卡方检验两两比较进行统计学处理。2结果根据上述的结果判定标准，用两种方法对56例检测者血清对比分析，结果见表1。表1两种方法检测乙肝病毒五项指标阳性结果对比（略）从表1中看出，用两种方法检测的阳性结果HBeAg相同均为7例，HBsAg相差1例，HBsAb相差2例，HBeAB、HBcAb各相差3例，用四格表进行两两对比分析，其结果见表2表5。表2HBsAg两种方法的结果对比（略）注：经2检验P>0.05。表3HBsAb两种方法的结果对比（略）注：经2检验P>0.05。表4HBeAb两种方法的结果对比（略）注：经2检验P>0.05。表5HBcAb两种方法的结果对比（略）注：经2检验P>0.05。表2表5，每一项检测指标用两种方法检测，进行两两对比分析，经统计学处理，差异无显著性(P>0.05)。3讨论31关于检测结果的判定3.1.1酶联免疫法试剂盒采用EIA原理，是将抗原抗体的高度特异性与酶对底物的高效催化作用有效结合起来，根据酶作用底物颜色变化，作定性分析。各项检测项目的阴、阳性对照，空白对照均与实验要求相一致，如出现异常结果，在任何情况下，应重新测试。3.1.2乳胶层析法HBAg、HBsAb、HBeAg检测试纸条有用双抗体(抗原)夹心法，试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的多克隆抗体(抗原)和质控区(C)的相应抗体(抗原)，如标本中含有相应的待测物质，在测试区内(T)出现一条红包条带，则是阳性结果，不出现红条第带则为阴性。HBeAb、HBcAb采用竞争抑制法，其强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带，阴性标本测试区内(T)将会出现明显的红色条带。而质控区(C)无论相应的抗体是否存在于标本中，都会出现一条红色色带，它是判断是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也做为试剂内控的标准，如果未出现红色条带，表明不正确的操作过程，或试纸条已变质损坏，在任何情况下，应重新测试。32通过本文56例检测者血清对两种方法的结果对比，经统计学处理，检测结果差异无显著性(P>0.05)，两种方法均具有特异性强，灵敏度高，稳定性好等特点，但层析法相对操作便捷,15 min可读取结果，酶联免疫法相对时间较长，需37 水浴放置2次，共计45 min，且洗板较为繁琐，但价格相对较低，故可根据自己实验室条件选择适合自己实验室的检测方法。33在HbcAb的检测中，我们发现用酶联免疫法在结果弱阳性的情况下，层析法表现出明显的阳性，这可能与酶联免疫法检测HbcAb时血清作130稀释有