乳腺癌患者手术前后Lp(a)、adiponectin和TNF.doc

乳腺癌患者手术前后Lp(a)、adiponectin和TNF【关键词】 脂蛋白（a）；,肿瘤坏死因子摘要： 目的： 测定乳腺癌患者手术前后血浆脂蛋白（a）、血清adiponectin和TNF含量，探讨其水平变化的临床意义。方法：分别用单克隆抗体浊度法和ELISA法测定了35例乳腺癌患者手术前后和38例健康女性的血浆脂蛋白（a）、血清adiponectin和TNF的含量。结果： 与健康对照组相比，乳腺癌患者手术前血浆Lp（a）和血清TNF增高（P<0.01），血清adiponectin降低（P<0.01）；手术后乳腺癌患者血浆Lp（a）和血清TNF水平下降接近健康对照组，与手术前比较差异均有显著性（p<0.01）；手术后乳腺癌患者血清adiponectin增高，但与手术前比较差异无显著性。乳腺癌患者手术前血清adiponectin与 TNF水平呈显著性相关(r=0.5748, P<0.01)，手术后无显著性相关。结论： 血浆脂蛋白（a）、血清adiponectin和TNF可能在乳腺癌病变发展过程中发挥重要作用。关键词： 脂蛋白（a）； 肿瘤坏死因子； adiponectin； 单克隆抗体浊度法； 乳腺癌 乳腺癌是我国女性常见的一种恶性肿瘤，其死亡率仅次于肺癌而位居第二位，且发病率呈直线上升趋势。其发病原因较复杂，发病机理仍不十分清楚，及早诊断、及时监测和最佳治疗将有利于提高乳腺癌患者的生存率。本研究通过测定35例乳腺癌患者和手术后以及38例健康体检者血浆脂蛋白（a）Lp（a）和血清adiponectin和TNF水平，探讨它们在乳腺癌发病和发展中的作用机制和临床意义。1 材料与方法11 研究对象乳腺癌确诊患者35例，女性，年龄4278岁。健康对照组38例，为本院职工体检人员，均为女性，年龄3570岁。12 检测方法所有对象取清晨空腹静脉血3ml。其中1.8ml用EDTANa2抗凝， 经300r/min，4离心15min分离血浆，作Lp（a）测定。另2ml不加抗凝剂，分离血清，作adiponectin和TNF测定。Lp（a）检测采用单克隆抗体浊度法，试剂为上海科华公司生产的试剂盒；人adiponectin和TNF试剂盒分别购自深圳依诺金生物科技有限公司和北京帮定生物医学公司，均采用双抗夹心ELISA法。13 统计方法数据全部用s表示，多个均数之间的比较使用PRISM软件进行NewmanKeuls检验，并进行单因素直线相关性分析。2 结果21 乳腺患者手术前后与健康对照组的血浆Lp（a）与血清adiponectin和TNF含量由表1可见，与健康对照组相比，乳腺癌患者手术前血浆Lp（a）和血清TNF增高（P<0.01），血清adiponectin降低（P<0.01）；手术后乳腺癌患者血浆Lp（a）和血清TNF水平下降接近健康对照组，与手术前比较差异均有显著性（P<0.01）；手术后乳腺癌患者血清adiponectin增高，但与手术前比较差异无显著性。表1 乳腺癌患者手术前后血浆Lp（a）与血清adiponectin和TNF的含量（略）注：* P<0.01与健康对照组比较；* P<0.01 与乳腺癌手术前组比较。22 乳腺癌患者手术前后血浆Lp（a）与血清adiponectin和TNF水平相关性分析行单因素直线相关性分析，乳腺癌患者手术前血清adiponectin与 TNF水平呈显著性相关(r=0.5748,P<0.01)，其余指标间无显著性相关；手术后3项指标间无显著性相关。3 讨论Lp（a）与纤溶酶原有高度同源性，血小板表面有纤溶酶原受体，Lp（a）可与纤溶酶原竞争而饱和地结合血小板1。生理浓度Apo（a）可在体内外实验中通过干扰病灶粘附激酶(focal adhesion kinase)的活性来抑制血管生成，抑制肺和结肠肿瘤的生长2，3。在肿瘤转移部位，血栓的形成有利于肿瘤细胞附于血管和血管外部位，并为其提供营养和生长因子，依靠肿瘤血栓的网状结构，恶性细胞能够增殖，且可保护肿瘤免于受机体防御机制的作用4。在本研究结果中，乳腺癌患者血浆Lp（a）水平有显著增高，Lp（a）中的Apo（a）与纤维蛋白酶原竞争纤维蛋白单体结合位点，从而抑制纤维蛋白的溶解，在纤维蛋白网形成处，血小板粘附并被激活，使血小板蛋白激酶C活性增高，蛋白激酶C底物磷酸化程度增强，直接促进血小板血栓形成。因此，高水平的Lp（a）有助于恶性肿瘤细胞的转移，促进肿瘤细胞的恶性增殖。Adiponectin是脂肪组织特异的血浆蛋白，具有抗动脉粥样硬化的特性，如能血管内皮细胞黏附分子的表达和巨噬细胞细胞因子的产生，在具有胰岛素抵抗的肥胖及2型糖尿病者中 Adiponectin浓度降低5。肿瘤坏死因子（TNF）可由体内多种细胞产生，包括单核细胞、巨噬细胞、激活的T淋细胞和B淋巴细胞、内皮细胞、平滑肌细胞和脂肪细胞等，介导生长调节、炎症、细胞毒性、免疫调节、神经内分泌等多方面的效应，是细胞因子网络中一个重要组成成员6。有研究报告，生理浓度的重组adiponectin抑制TNF造成的内皮粘附分子表达；抑制泡沫细胞形成及巨噬细胞的吞噬活性和干扰TNF诱导的内皮细胞核转录因子B (NF B) 的信号传导作用7。Tanaka等认为，TNF能降低过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体（PPAR）的mRNA表达,减少PPAR的产生。PPAR可在不同免疫细胞和血管壁细胞中表达,具有抗炎和促凋亡作用8。本研究结果显示，乳腺癌患者体内Lp（a）水平有显著增高，致使体内超氧自由基积累过量，同时，adiponectin水平降低，失去对巨噬细胞分泌TNF的抑制作用，可使过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体（PPAR）的mRNA表达增强，引起炎性反应和细胞的增殖。因此，Lp（a）、adiponectin和TNF很可能在乳腺癌病变发展过程中发挥重要作用，其具体机制尚需进一步探讨。参考文献1 Hancock MA, Boffa MB, Marcovina SM,et al. Inhibition of plasminogen activation by lipoprotein(a): critical domains in apolipoprotein(a) and mechanism of inhibition on fibrin and degraded fibrin surfaces. J Biol Chem，2003,278(26):2326023269. 2 Kim JS, Chang JH, Yu HK,et al. Inhibition of angiogenesis and angiogenesisdependent tumor growth by the cryptic kringle fragments of human apolipoprotein(a). J Biol Chem，2003, 278(31):2900029008.3 Ogorelkova M, Kraft HG, Ehnholm C,et al. Single nucleotide polymorphisms in exons of the apo(a) kingles IV types 6 to 10 doman affect Lp(a) plasma concentrations and have different patterns in Africans and Caucasians. Human Molecular Genetics, 2001,10(8):8158245 Kim JS, Yu HK, Ahn JH, et al.Human apolipoprotein(a) kringle V inhibits angiogenesis in vitro and in vivo by interfering with the activation of focal adhesion kinases. Biochem Biophys Res Commun，2004,313(3):534540.6 张淼，傅祖植. 脂联素研究进展. 国外医学内科学分册，2002，29：415418.7 Zhang H, Kumar S, Barnett A, et al. Tumor necrosis factor alpha exerts dual effects on human adipose leptin synthesis and release. Mol Cell Endocrinol, 2000,159: 7988.8 杨立勇,杨永年,陈志坚. 转录因子NFB在肿瘤坏死因子介导的胰岛细胞凋亡中的作用. 中华医学杂志,2003,83:688690.9 Tanaka T, It