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文档简介
实验:观察DNA和RNA在细胞中的分布,观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验目的: 初步掌握观察DNA和RNA在细胞中的分布方法 实验材料:人的口腔上皮细胞(洋葱表皮细胞) 选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察; 使用洋葱鳞片叶表皮细胞作材料时,为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞。,观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验原理: 1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中。 2、甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。 3、盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合。,观察DNA和RNA在细胞中的分布,试剂: 1、0.9%生理盐水(维持细胞渗透压) 2、8%盐酸(使蛋白质与DNA分离) 3、吡罗红甲基绿染色剂(现用现配),观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验步骤: 取材 水解 冲洗涂片 染色 观察, 滴: 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液; 刮: 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下; 涂: 将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中; 烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。(固定),观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验步骤: 取材 水解 冲洗涂片 染色 观察,解: 将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解; 保: 将小烧杯放入装有30温水的大烧杯中保温5分钟。,观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验步骤: 取材 水解 冲洗涂片 染色 观察,冲: 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟; 吸: 用吸水纸吸去载玻片上的水分。,观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验步骤: 取材 水解 冲洗涂片 染色 观察,染:用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟; 吸: 吸去多余染色剂; 盖:盖上盖玻片。,观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验步骤: 取材 水解 冲洗涂片 染色 观察,低: 在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰; 高: 转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。,方法步骤:,0.9%生理盐水,人口腔上皮细胞,8%盐酸,蒸馏水,30水浴,吡罗红甲基绿染色剂,取材,水解,冲洗,染色,观察,观察DNA和RNA在细胞中的分布,注意事项: 取材时 取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂; 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。,观察DNA和RNA在细胞中的分布,注意事项: 冲洗涂片时: 水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。 观察时: 换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋。 ,观察DNA和RNA在细胞中的分布,观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验现象:在细胞核部分被染成了绿色,而在细胞质部分被染
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