弧菌属的致病性.ppt

第11章 弧菌属、气单胞菌属 邻单胞菌属,广州医学院 吴爱武,弧菌科,弧菌属,异单胞菌属,发光杆菌属等共8个属,O1群霍乱弧菌,非O1群霍乱弧菌,副溶血弧菌,拟态弧菌, ,分类,等66个种,弧菌属（Vibrio）的共同生物学特性:,除麦氏弧菌外，氧化酶阳性、还原硝酸盐 发酵葡萄糖产酸罕见产气 对O/129敏感（近年出现抗性株） 钠离子能刺激其生长，部分菌株嗜盐 兼性厌氧，营养要求不高 革兰阴性、弧形（短杆）菌、动力（）,弧菌属的致病性： （含盐和海水环境中自身微生物群的一部分） 肠道内感染（霍乱、胃肠炎） 肠道外感染（伤口感染、败血症等）,致病性弧菌所引起的疾病 种 所致疾病 临床意义 标本来源 O1群霍乱弧菌 霍乱 主要致病菌 粪便 O139群霍乱弧菌 霍乱 主要致病菌 粪便 非O1群霍乱弧菌 胃肠炎 主要致病菌 粪便、血 副溶血弧菌 胃肠炎 主要致病菌 粪便、伤口 创伤弧菌 败血症、伤口感染 主要致病菌 粪便、伤口 少女弧菌 伤口感染 散发感染 伤口 溶藻弧菌 伤口感染 散发感染 耳、伤 霍利斯弧菌 胃肠炎 散发感染 粪便 拟态弧菌 胃肠炎 散发感染 粪便 河弧菌 胃肠炎 罕见感染 粪便 麦氏弧菌 胃肠炎 罕见感染 粪便 氟尼斯弧菌 胃肠炎 罕见感染 辛辛那提弧菌 菌血症、脑炎 罕见感染 鲨鱼弧菌 伤口感染 罕见感染,霍 乱 弧 菌,Vibrio cholerae O1 and O139,霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的病原菌，为我国法定传染病（甲类），俗称2号病。（1号病为鼠疫）。,血清学分群（型）在流行病学上有价值 抗原,H 抗原：共同抗原，特异性低 O 抗原（A、B、C)：是分群和分型的基础。 1.依据O抗原不同分155个血清群（O1群、 O139群、非O1群霍乱弧菌） 2.O1群有三个血清型 AB构成小川型（Ogawa) AC构成稻叶型（Inaba） ABC构成彦岛型(Hikojima） 3.每个血清型根据表型不同分成 古典和El-Tor两个生物型。,生物分型：O1群霍乱弧菌 噬菌体分型：,古典生物型 El-Tor生物型,第IV组噬菌体 古典生物型 第V组噬菌体 El-Tor生物型,霍乱的流行史,1817-1923 共6次 印度恒河三角洲 古典生物型,1961 第7次 印度尼西亚 Eltor生物型,1992.10 孟加拉湾的印度、孟加拉 O139,O139群霍乱弧菌在亚洲的流行(1992.10-1994.11),霍乱的流行史,临床意义 (致病因素),进入小肠，鞭毛、菌毛、分泌黏液，O139群有荚膜,穿过小肠黏膜表面黏液层,黏附于小肠黏膜上皮细胞刷状缘的微绒毛上大量繁殖,1.侵袭力,霍乱弧菌肠毒素（CE, cholera enterotoxin）,A1:活性亚单位 21812 A2:连接亚单位 5000 B：结合亚单位,MW：80000-90000,临床意义 (致病因素),2.霍乱肠毒素,演示,发病机制,临床意义,霍乱弧菌在小肠黏膜部位的致病机制,发病机理,临床意义,感染途径,临床意义,感染途径,临床意义,感染途径,临床意义,感染途径,临床意义,感染途径,临床意义,演示,感染途径,临床意义,霍乱弧菌的致病过程,引起的疾病,临床意义,霍乱弧菌的致病,（严重时液体丢失量达5001000ml/h）,临床表现,临床意义,剧烈上吐下泻，严重脱水、酸中毒、痉挛、尿闭、休克、死亡。,临床分期,临床意义,1.前驱期 无明显前驱症状，或轻度腹鸣、腹胀和不适。,临床分期,临床意义,2.吐泻期 持续23天，因剧烈吐泻造成大量水分和电解质丧失。,临床分期,临床意义,3.脱水虚脱期 脱水貌，洗衣工手； 循环衰竭、代谢中毒、急性肾衰； 水电解质平衡紊乱导致肌肉痉挛。 4.恢复期 各种症状趋于缓解，但可出现发热,霍乱弧菌的革兰染色结果,生物学特性(纯培养革兰染色),描述： 革兰阴性，弯曲弧形或逗点状，粪便标本中可首尾相接鱼群样平行排列,鱼群样排列,霍乱弧菌形态（电镜）,霍乱弧菌的扫描电镜图（金属镀膜）,生物学特性 (纯培养扫描电镜),描述： 弯曲弧形或逗点状,霍乱患者小肠黏膜上皮局部平切电镜图,霍乱弧菌扫描电镜图 （金属镀膜）,生物学特性 (电镜),霍乱弧菌的糖原颗粒（*）超薄切片，105 000,生物学特性 (电镜),霍乱弧菌的运动模式图,生物学特性：(米泔水样便),描述： 穿梭或 流星样 动力,霍乱弧菌的鞭毛,生物学特性 (电镜),霍乱弧菌的鞭毛染色,生物学特性 (特殊染色10,000),生物学特性 (培养特性培养条件),需氧或兼性厌氧，营养要求不高 最适生长温度37 最适pH8.29.0 Max:10.2 (耐碱怕酸) Eltor生物型在血平板上可形成-溶血（有变异）,初次分离用pH8.5碱性蛋白胨水，经46小时液体表面大量繁殖，形成菌膜。,生物学特性 (培养特性选择鉴别性平板) TCBS（硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板）,霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成 发酵蔗糖的较大的黄色菌落,生物学特性 (培养特性选择鉴别性平板) 含亚碲酸钾的培养基：4号琼脂 庆大霉素琼脂,霍乱弧菌在含亚碲酸钾的琼脂平板上将碲离子还原成原子态的碲，形成有灰褐色中心的菌落,生物学特性 (重要的生化反应),生物学特性 (重要的生化反应) 除霍乱和拟态弧菌外，其余弧菌在不含盐的培养基上不生长,氧化酶、吲哚、枸橼酸盐利用、明胶实验（） 赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶（）、精氨酸双水解（）、动力（） 发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇，乳糖（v）,生物学特性 （重要的生化反应）,生物学特性(生物型的区分：根据生化反应分型),生物学性状 (血清型：根据抗原分型),生物学性状 (抵抗力),河水中：20天 蔬菜水果上：1周 冰内：4天 耐碱怕酸：胃酸中存活4分钟 pH10.2仍能生长 对庆大霉素耐药：用于制作选择性培养基 多粘菌素B(50u/ml)：Eltro biotype耐药， Classic biotype敏感，可作为分型依据 对热、干燥、日光和常用消毒剂敏感， 10012min即可杀死,标 本 的 采 集,微生物学检验,患者的米泔水样便、呕吐物、尸检肠内容物或携带有病原菌的海产品和污染的水源等,检验方法 （1）直接镜检：取标本涂片2张，乙醇或甲醇固定，革兰染色，油镜观察。,微生物学检验,（2）动力和制动试验：水样便，悬滴（压滴）、高倍镜、暗视野观察动力：穿梭似流星状。同法制备另一标本，加入1滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清（效价1:64）；可见运动活泼的细菌运动停止并发生凝集，为制动试验阳性。 （3）玻片凝集：O1和O139抗体 （4）分离培养：常用碱性蛋白胨水、选择性平板（TCBS等），菌落特征和蔗糖发酵菌落，进一步鉴定。,检验方法 l）初步鉴定：与01群和O139群抗血清(多价和单 价）凝集试验，菌落和菌体形态、氧化酶试验等 作出初步报告。 2）最后鉴定：根据纯培养后全面生化反应、血清学 分群及分型、生物型。,微生物学检验,检验方法 1.初筛试验 (1)霍乱红试验 (2)O/129敏感试验 (3)黏丝试验 （4）耐盐试验,微生物学检验,2.生物分型试验 a.羊红细胞溶血试验 b.鸡红细胞凝集试验 c. VP试验 d.多粘菌素B敏感试验 e. 第IV和V组霍乱弧菌噬菌体裂解试验,3.鉴别试验 霍乱弧菌与拟态弧菌鉴别：蔗糖发酵 （） （） 霍乱弧菌和气单胞菌和邻单胞菌鉴别：黏丝试验 （） （）,副溶血弧菌 （Vibrio parahaemolyticus),临床意义,人食入污染的海产品发病（食物中毒、急性腹泻）、伤口感染、菌血症。 致病因子：TDH、TRH和菌毛,生物学特性（形态特征）,革兰阴性直或微弯杆菌，极端单鞭毛，无荚膜,副溶血弧菌革兰染色,生物学特性（培养特征）,需氧或兼性厌氧 营养要求不高，嗜盐（无盐不生长,最适盐浓度3.5%） 最适pH7.78.0，最适温度3037 TCBS上形成绿色菌落,副溶血弧菌在TCBS上菌落,生物学特性（培养特征）,从腹泻患者中分离到的副溶血弧菌95%以上在我妻培养基（人血培养基）上可产生-溶血现象，称为神奈川现象（Kanagawa phenomenon, KP） 在SS平板上形成扁平，无色半透明，蜡滴状的菌落，不易刮下，有辛辣味。,生物学特性（生化特征）,氧化酶 + 蔗糖发酵 - 葡萄糖发酵 + NaCl生长试验 0%NaCl - 3%NaCl + 7%NaCl + 10%NaCl - 脲酶 + / -(临床分离菌株常阳性）,标本,3.5%NaCl碱性蛋白胨水培养基,TCBS分离培养,可疑菌落（绿色）,纯培养,菌种鉴定,毒素测定,微生物学检验程序,鉴定特征,革兰阴性弧菌或杆菌，动力（） 氧化酶（），临床分离株脲酶常（） TCBS上绿色菌落、氯化钠生长试验 神奈川现象(+) 各种生化试验 TDH和TRH的检测：毒素和基因检测,气单胞菌属和邻单胞菌属 Aeromonas and Plesiomonas,分类,根据分子遗传学研究： 气单胞菌属独立成气单胞菌科 邻单胞菌属（仅一个种：类志贺邻单胞菌）并入肠杆菌科,临床意义（气单胞菌：肠道致病菌）,致病物质 溶血毒素 细胞毒素 所致疾病 肠内感染 主要表现为腹泻（亲水气单胞菌） 肠外感染 败血症、伤口及软组织感染（亲 水气单胞菌和威隆气单胞菌）,临床意义（邻单胞菌属）,所致疾病： 肠道内感染：胃肠炎（水样泻或痢疾样腹泻） 肠道外感染：菌血症等（免疫力低下人群发生） 病史：进食生水或海产品,气单胞菌属的描述,革兰阴性直或球杆菌，大多为极端单鞭毛； 生长温度范围广（045）； 氧化酶（）、触酶（）、硝酸盐还原（）、发酵葡萄糖产酸、有的产气、产生多种胞外酶； 对O129耐药； 主要存在于水生系统（更易生活于盐水和淡水交界处，海洋环境中偶见）。,邻单胞菌属的描述,革兰阴性杆菌，极端25根鞭毛（侧鞭毛）； 生长温度范围广（845）； 氧化酶（）、触酶（）、硝酸盐还原（）、发酵葡萄糖产酸不产气； 可耐受的NaCl浓度为05； 大多数菌株对O129敏感； 主要存在于水生系统（淡水和蒸汽水中比海水环境更易存在）。,对人致病的弧菌、气单胞菌和邻单胞菌的特征 特征 霍乱和拟态弧菌 其他弧菌 气单胞菌 邻单胞菌 生长 0NaCl + - + + 6%NaCl + + - - 对O/129敏感性 10ug + +/- - +/- 150ug + + - + 氨苄青霉素 +/- + - - （10ug)敏感性 葡萄糖产气 - - +/- - 黏丝试验 + + - -,KEY POINTS,The genus Vibrio is calssified in the family Vibrionaceae, and it is the type genus for the family. Vibrio cholera is the pathogen of cholera and it is the most important species in the genus Vibrio. It is now divided into three major subgroups: V. cholera O1, V. cholera O139,and V. cholera non-O1. Vibrio parahaemolyticus causes gastroenteritis in human following ingestion of contaminated seafood.,KEY POINTS,Presumptive identification of Vibrio species based on colonial and microscopic morphology ,definite identificati