实验一生物显微镜的构造、使用技术和单层扁平上皮的观察.ppt

组织学与胚胎学实验 河南科技大学动物科技学院 形态学教研组,注意事项,1.课堂上不许大声喧哗。 2.对号入座，不许随便更换座位，每次上课前检查电脑和显微镜，发现问题及时反映。 3.自带普通铅笔及纸，每次观察切片后画图，等下次上实验课时交实验报告。 4.书写要认真，绘图要清晰，不能敷衍了事。 5. 第4、6、7、9、10、14、15、16周有实验课，请按时上课。,实验一 生物显微镜的构造、使用技术，单层扁平上皮的观察 目的要求 一.熟悉生物显微镜的构造及其功能，正确掌握显微镜的使用方法并牢记使用时的注意事项。 二.了解单层扁平上皮的结构特点。 内容 一.显微镜的构造：图1 图2 图3 图4 图5 机械部分：镜座 、镜柱 、粗和细调节器、镜筒、物镜转换器、载物台及切片夹、聚光镜升降装置、调光圈、推进器 光学部分：目镜、物镜、反光镜、聚光镜,图1：双目显微镜的结构,1.镜座,4.载物台,6.标本夹,9.镜臂,2.开关,7.细调螺旋,8.粗调螺旋,3. 变阻器,12 接目镜,13.镜筒,10.接物镜,11 转换器,5.通光孔,14.载玻片移动螺旋,图2单目显微镜,图3双目显微镜,图4：相差立体显微镜,图5：倒置显微镜,1、镜座 镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。 2、镜筒 镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。 3、物镜转换器 物镜转换器上可安装34个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。,4、载物台 载物台中央有一孔，为光线通路。在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。 5、推动器 是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。,6、粗动螺旋 粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，镜头下降接近标本。新近出产的显微镜镜检时，右手向前扭载物台上升，让标本接近物镜，反之则下降，标本脱离物镜。 7、微动螺旋 用粗动螺旋只可以粗放的调节焦距，要得到最清晰的物象，需要用微动螺旋做进一步调节。微动螺旋每转一圈镜筒移动0.1毫米（100微米）。新近出产的较高档次的显微镜的粗动螺旋和微动螺旋是共轴的。,8、反光镜 较早的普通光学显微镜是用自然光检视物体，在镜座上装有反光镜。反光镜是由一平面和另一凹面的镜子组成，可以将投射在它上面的光线反射到聚光器透镜的中央，照明标本。不用聚光器时用凹面镜，凹面镜能起会聚光线的作用。用聚光器时，一般都用平面镜。新近出产的较高档次的显微镜镜座上装有光源，并有电流调节螺旋，可通过调节电流大小调节光照强度。,9、聚光器 聚光器安装在载物台下，其作用是将光源经反光镜反射来的光线聚焦于样品上，以得到最强的照明，使物象获得明亮清晰的效果。聚光器的高低可以调节，使焦点落在被检物体上，以得到最大亮度。,10、物镜 安装在镜筒前端转换器上的接物透镜利用光线使被检物体第一次造像，物镜成像的质量，对分辨力有着决定性的影响。物镜的性能取决于物镜的数值孔径（numerical apeature简写为NA），每个物镜的数值孔径都标在物镜的外壳上，数值孔径越大，物镜的性能越好。 11、目镜 目镜的作用是把物镜放大了的实像再放大一次，并把物像映入观察者的眼中。,二.显微镜的使用技术： 1、安放显微镜 。 2、检查 。 3、对光。 4、调焦 。 5、先低倍镜观察。 6、高倍镜观察。 7、油镜观察。 8、复原。,（1）安放显微镜 打开镜箱，右手紧握镜臂，左手平托镜座，轻放桌上距离桌子边缘几厘米处，让目镜对着观察者。 （2）检查 检查各部件是否完好，镜身、镜头必须清洁。 （3）对光 配置内置式电光源的显微镜可直接打开电源开关，并调节光量，使视野内的亮度达到明暗适宜，同时打开光圈。旧式显微镜应首先将可变光阑的孔径调至最大，将聚光器升至最高点，再将低倍镜对准通光孔，镜头离载物台约1cm。这时，把反光镜转向光源，直到视野中的光线既明亮又均匀时为止。在镜检全过程中，根据所需光线的强弱，还可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器加以调节。,（4）调焦 光线对好后，将玻片标本放在镜台上，有盖玻片的一面朝上，被检物体对准镜台孔正中，用标本移动器上的压片夹卡紧，然后调焦。转动粗调焦螺旋调节镜台与物镜间的距离，从侧面注视，以二者间距离5mm为度。然后自目镜观察，慢慢转动粗调焦螺旋，同时移动标本移动器，直到基本看清标本物像。 （5）低倍镜观察 用粗调焦螺旋调焦后，再轻轻转动细调焦螺旋，以便得到清晰的物像。如果观察的目标不在视野中央，可调节标本移动器，使之恰好位于视野中央。玻片移动方向与物像移动方向的关系如何？若光线不适，可拨动可变光阑的操纵杆，调节光线至适宜。,（6）高倍镜观察 在低倍镜下将欲详细观察的标本部分移至视野中央，再转动镜头转换器，将高倍物镜转至工作位置。适当调节亮度后，只需微微转动细调焦螺旋，就可看到更清晰的物像。此时能使用粗调焦螺旋吗？为什么？由于显微镜下观察的被检物有一定厚度，故在观察过程中必须随时转动细调焦螺旋，以了解被检物不同光学平面的情况。 在高倍镜下，将玻片中的被检物按从上到下、从左到右的顺序移动、观察一遍，再由低倍镜转高倍镜反复观察几次，以熟练高倍镜的使用。 用高倍镜观察后，若有必要，可再换用油镜观察。,（7）油镜观察 转动粗调焦螺旋，使物镜与镜台保持一定距离。滴1滴香柏油于玻片标本待观察的区域上，将油镜头转至工作位置，眼睛从侧面注视，转动粗调焦螺旋，直至油镜头浸没于香柏油内，几乎与载玻片相接触，但不能相碰。然后从目镜中观察，用粗调焦螺旋极其缓慢地向上调节至出现物像为止，注意勿将粗调焦螺旋转动方向搞反了，以免油镜头与载玻片相碰而损坏了镜头及玻片。再用细调焦螺旋调至物像清晰，此时还应适当增加光的亮度。,如果镜头已提出香柏油而尚未见到物像时，应按上述过程重复操作。使用完毕，将镜头从香柏油中脱离，取下玻片，用擦镜纸擦去镜头和玻片上的香柏油，再用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头上的油迹，然后用干净擦镜纸擦去镜头上残留的二甲苯。二甲苯用量不宜过多，擦试时间应短。切忌用手或其他纸擦试镜头，以免损坏透镜。 （8）复原 显微镜使用完毕，关闭电源，将物镜镜头转开，取下玻片。擦净载物台和物镜，将各部分还原，注意物镜头不可正对通光孔，装镜入箱。,三.使用显微镜的注意事项 1、加强责任心，养成爱护仪器的习惯，严格操作规程。 2、取放显微镜时必须一手握镜臂，另手托住镜座，禁止单手提着行走。 3、禁止拆散显微镜上任何部件。 4、镜检时力求坐姿端正、自然、舒适，双目同时睁开观察，这样即利于绘图，又可减少眼睛疲劳。 5、每次镜检，不论物体大小，其顺序必须是能低倍后高倍，最后用油镜。,6、低倍镜观察时必须一边俯侧观察载物台上升一边转动粗调手轮，然后才能在目镜中观察降低载物台找物像。用高倍镜和油浸镜时，绝不能转动粗调手轮。 7、观察带有水或其他药液的标本，一定要加上盖玻片，并用滤纸吸去盖玻片周围溢出的水或药液，以免接触腐蚀显微镜。 8、显微镜各部分必须保持清洁。光学系统部分切勿用手、布、粗纸等擦拭，必须用擦镜纸轻轻揩擦，若镜头等光学部分积有灰尘时需先用洗耳球吸去灰后再擦拭，必要时可略用些二甲苯进行揩擦。金属等机械部分有灰尘时，可用纱布擦拭。 9、显微镜用毕后，必须杷接物镜移开。,单层扁平上皮光镜图 （表面观；肠系膜铺片，镀银染色）,四. 上皮组织的观察,单层扁平上皮（肾小囊壁层）,单层扁平上皮（血管内皮）,单层立方上皮（甲状腺）,单层立方上皮（肾小管）,单层柱状上皮模式图,单层柱状上皮（小肠）,单层柱状上皮（肾集合管）,假复层纤毛