实验五延胡索对小白鼠的镇痛作用.ppt

郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,中兽医教研室,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用 理论验证性实验,讲解教师：王长林 指导教师：王长林 赵建平 李艳玲,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,大纲要求： 【教学目标】 通过实验使学生加深对延胡索功效的认识，加深对中药材功能的理解和记忆,并验证延胡索镇痛的药理作用。,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【实验考核】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,实验考勤 实验态度 操作过程 实验报告 实验分析 实验关键技术,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,延胡索（第九节理血药2）,【基源】本品为罂粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W. T. Wang 的干燥块茎。,【相关理论】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,延胡索,【产地分布】主产于浙江、江苏、湖北、湖南、辽宁、山东等地。,【相关理论】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,延胡索,【性状】 本品呈不规则的扁球形，直径0.5 1.5cm 。表面黄色或黄褐色，有不规则网状皱纹。顶端有略凹陷的茎痕，底部常有疙瘩状凸起。质硬而脆，断面黄色，角质样，有蜡样光泽。气微，味苦。,【相关理论】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,延胡索,【炮制】 延胡索 除去杂质，洗净，干燥，切厚片或用时捣碎。 醋延胡索 取净延胡索，照醋炙法（参照兽药典附录）炒干，或照醋煮法（参照兽药典附录）煮至醋吸尽，切厚片或用时捣碎。,【相关理论】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,延胡索,醋延胡索,炙,醋炙：引药归肝经， 加强镇痛效果。,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,延胡索,【性味归经】 辛、苦，温。归肝、脾经。 【功能】 活血散瘀，行气止痛。 【主治】 “诸痛 ” 气滞血瘀，跌打损伤，产后瘀阻，风湿痹痛。,【相关理论】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,延胡索,【化学成分】 本品主要含生物碱，其主要成分为延胡索甲素、延胡索乙索、延胡索丙素(原阿片碱)、延胡索丁素等。尚含淀粉、挥发油、树脂、去氢紫堇碱等。,【相关理论】,延胡索素,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,延胡索乙素,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,延胡索,【现代研究】 （1）有明显的镇痛作用。 （2）有镇静、催眠作用。 （3）减少胃液分泌。 （4）扩张冠状血管。,【相关理论】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【实验原理】 热板法,延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生舔足的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。,舔足,t 30,550.5,第一组：延胡索液,第二组：哌替啶注射液,第三组：生理盐水,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,舔足,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【实验原理】 热板法,延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生舔足的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。,550.5,第二组：哌替啶注射液,第三组：生理盐水,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,舔足,杜冷丁,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【实验原理】 热板法,延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生舔足的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。,舔足,t 30,550.5,第一组：延胡索液,第二组：哌替啶注射液,第三组：生理盐水,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,舔足,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【实验组织】,班级进行分组，每组名学生； 每组用15只预选合格实验动物； 每组有一名专业教师或实验教师（兼职教师）进行指导。,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,实验动物 小白鼠（合格15/组）。,1,【实验准备】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,雌性 为什么？,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,实验器材 鼠笼、水浴锅、烧杯（500ml）、天平、注射器、秒表、钳子、镊子、棉棒等。,2,【实验准备】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,实验药品 哌替啶注射液lmgml 延胡索水煎醇沉液4gml。 生理盐水 苦味酸（标记用）,3,【实验准备】,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【课程组织过程】,教师演示关键步骤和技术。 学生在教师的指导下亲自操作各种按摩手法。 结果统计和讨论以及分析总结。,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,要求： 浓度：2； 温度：室温（0）,醇沉,（一）延胡索的煎制水煎醇沉（提前准备）,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,水煎,醇沉：水煎剂经浓缩到一定浓度 （12g/ml）后，加入23倍量 95%乙醇（使含乙醇量达到 6070% ），边加边搅拌，即有 沉淀析出，置冰箱内24小时使 沉淀完全。过滤，滤液回收乙醇 后以蒸馏水溶解。过滤后稀释成 规定浓度即可，必要时可以重复 此乙醇沉淀23次。,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,调节水浴锅，使温度恒定在550.5，每次取小鼠1只，放入烧杯内。记录自放入烧杯至出现舔后足所需时间(s)，作为该鼠的痛阈值。,（二）预选实验动物 结合给药前第一次痛阈值测定,550.5,t 30,第1次,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,t30为合格动物 预选合格小鼠15只/每实验小组。,（三）预选实验动物 结合给药前痛阈值测定,t 30,550.5,第1次,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,分3组 每组5只。,（四）实验动物分组（15只） 第2次测定给药前痛阈值,第2次,第一组：实验组 a,第二组：阳性对照组 b,第三组：阴性对照组 c,再次测定痛阈值，计算平均数，作为该鼠给药前的痛阈值 a1_ a15;b1_ b15;c1-c15.,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,（五）用药,第一组：实验组 a,第二组：阳性对照组 b,第三组：阴性对照组 c,第一组：延胡索液 0.2ml10 g,第二组：哌替啶注射液0.2ml10g,第三组：生理盐水 0.2ml10g,腹腔注射,0.2ml10 g体重,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,腹腔注射（ip） 左手固定小鼠，使腹部在上，头部下倾，右手持注射器，取45角刺入一侧下腹部向头端刺入腹腔（图）。进针部位不宜太高，刺入不能太深，以免伤及内脏。 注射量一般为0.10.2 ml/10g体重。,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,（五）测定给药后小鼠痛阈值,给药后的15、30、60、90min测定各鼠痛阈值。,若小鼠在热板上60s仍无痛觉反应，应取出，按60s计。,a,b,c,15 30 60 90,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,（五）数据记录,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,（六）数据处理（1）组内处理,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,（六）数据处理（2）班级12小组数据汇总,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,（六）数据处理 （2）,痛阈提高百分率,用药后平均痛阈值,用药前平均痛阈值,用药前平均痛阈值,100%,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【方法与步骤】,数据参考,实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用,郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件 Zhengzhou college of Animals Husbandry Engineering,中兽医基础与临床 实验教学,【注意事项】,室温以1520为宜，过低则小鼠反应迟钝，过高则过于敏感，而引起跳跃，影响实验的准确性。 正常小鼠一般放入烧杯后1015s内出现不安，举前肢，舔后足，踢后肢，跳跃等现象。这些动作均不作为疼痛指标，只有舔后足才作为疼痛的指标。 一般不选用雄性小鼠，因雄性小