安全生产_食品安全检测技术概述

食品安全检测技术食品安全检测技术食品安全检测技术食品安全检测技术 ?样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 ? 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 ?免疫分析免疫分析免疫分析免疫分析检测技术检测技术检测技术检测技术 固相萃取技术(SPE)固相萃取技术(SPE) 固相微萃取技术(SPME)固相微萃取技术(SPME) 液相微萃取技术（LPME）液相微萃取技术（LPME） 快速溶剂萃取技术(ASE)快速溶剂萃取技术(ASE) 基质固相分散萃取技术(MSPDE)基质固相分散萃取技术(MSPDE) 超临界流体萃取技术(SFE)超临界流体萃取技术(SFE) 亚临界水萃取技术（SWE）亚临界水萃取技术（SWE） 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 利用固体吸附剂吸附液体样品中的目 标物，使其与样品中的基体和干扰化 合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达 到分离和富集目标物的目的。 利用固体吸附剂吸附液体样品中的目 标物，使其与样品中的基体和干扰化 合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达 到分离和富集目标物的目的。 SPE在农药残留,特别是在脂肪和蛋白 质含量高的样品以及农药多残留的分 离、 提取、净化和浓缩方面得到广泛应用。 SPE在农药残留,特别是在脂肪和蛋白 质含量高的样品以及农药多残留的分 离、 提取、净化和浓缩方面得到广泛应用。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 固相萃取技术固相萃取技术 目前固相萃取柱可分为以下几种类型：目前固相萃取柱可分为以下几种类型：目前固相萃取柱可分为以下几种类型：目前固相萃取柱可分为以下几种类型： 正相固相萃取柱正相固相萃取柱 反相固相萃取柱反相固相萃取柱 离子交换固相萃取柱离子交换固相萃取柱 凝胶渗透色谱凝胶渗透色谱 分子印迹聚合物固相萃取柱分子印迹聚合物固相萃取柱 固定化离子液体固相萃取柱固定化离子液体固相萃取柱 免疫亲和柱免疫亲和柱 碳纳米管碳纳米管 天然植物纤维和人造纤维等天然植物纤维和人造纤维等 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 新型固相萃取新型固相萃取新型固相萃取新型固相萃取 吸附剂吸附剂吸附剂吸附剂 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 反相萃取柱反相萃取柱反相萃取柱反相萃取柱：吸附剂为非极性的吸附剂为非极性的,且极性小于洗脱剂的极 性，用来萃取非极性物质。如标准的单键合硅胶（硅胶 键合 且极性小于洗脱剂的极 性，用来萃取非极性物质。如标准的单键合硅胶（硅胶 键合C18、C8、C6、氰基、苯基、环己基）及聚合物键合 类填料（ 、氰基、苯基、环己基）及聚合物键合 类填料（ENVI-18、ENVI-8）等。）等。 正相萃取柱正相萃取柱正相萃取柱正相萃取柱：吸附剂为极性的,且极性大于洗脱剂的极性， 用来萃取极性物质。如硅胶键合氨基、二醇基、氰基等， 及极性吸附填料硅酸镁、硅藻土、氧化铝等。 吸附剂为极性的,且极性大于洗脱剂的极性， 用来萃取极性物质。如硅胶键合氨基、二醇基、氰基等， 及极性吸附填料硅酸镁、硅藻土、氧化铝等。 离子交换树脂柱：离子交换树脂柱：离子交换树脂柱：固定相为带电荷的离子交换树脂，用来 吸附带相反电荷的离子化合物。如阳离子交换柱（ 离子交换树脂柱：固定相为带电荷的离子交换树脂，用来 吸附带相反电荷的离子化合物。如阳离子交换柱（SCX, PRS, COOH，PCX）与阴离子交换柱：）与阴离子交换柱：SAX, PSA, NH2， PAX/MAX。 ? 商品化的固相萃取吸附材料的缺点商品化的固相萃取吸附材料的缺点 传统固相萃取的目标物与吸附剂之间的作用力是非特异性 的, 通常需对萃取和洗脱条件进行仔细选择, 而且对不同 基质的分离与分析物需要选择不同的柱填料, 从而限制了 固相萃取的进一步发展。为了提高柱效与重现性、扩大其 应用领域,开发研制高选择性的固相吸附材料是非常重要 的。 传统固相萃取的目标物与吸附剂之间的作用力是非特异性 的, 通常需对萃取和洗脱条件进行仔细选择, 而且对不同 基质的分离与分析物需要选择不同的柱填料, 从而限制了 固相萃取的进一步发展。为了提高柱效与重现性、扩大其 应用领域,开发研制高选择性的固相吸附材料是非常重要 的。 凝胶渗透色谱：是基于物质分子大小和形状不同，通过具 有分子筛性质的固定相（凝胶）将物质进行分离 凝胶渗透色谱：是基于物质分子大小和形状不同，通过具 有分子筛性质的固定相（凝胶）将物质进行分离 GPC 是多农药残留分析中一种常用有效的提纯方法，由 于具有自动化程度高、净化效率较好及回收率较高，被广 泛用于纯化含类酯的复杂基体组分 是多农药残留分析中一种常用有效的提纯方法，由 于具有自动化程度高、净化效率较好及回收率较高，被广 泛用于纯化含类酯的复杂基体组分。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 ? 凝胶渗透色谱 (GPC)凝胶渗透色谱 (GPC) 分子印迹聚合物独特的选择性和亲和力正 适应了这一发展要求。由于分子印迹聚合物可 以根据分析目标物的需要而制备，所以能广泛 应用于物质的分离与分析过程, 它对于目标物 质的高度选择性也是普通固相萃取无法比拟 的。利用分子印迹技术制备对食品污染物具有 高选择性的分子印迹聚合物并用于食品污染物 的去除和分析是一个很有意义的研究领域 分子印迹聚合物独特的选择性和亲和力正 适应了这一发展要求。由于分子印迹聚合物可 以根据分析目标物的需要而制备，所以能广泛 应用于物质的分离与分析过程, 它对于目标物 质的高度选择性也是普通固相萃取无法比拟 的。利用分子印迹技术制备对食品污染物具有 高选择性的分子印迹聚合物并用于食品污染物 的去除和分析是一个很有意义的研究领域。 分子印迹聚合物分子印迹聚合物分子印迹聚合物分子印迹聚合物（MIPMIP）固相）固相）固相）固相萃取柱萃取柱萃取柱 由模板分子、功能单体、交联剂合成的具有特异性识别功 能的三维孔穴材料，与生物抗体相比较，MIP具有制备容 易成本低廉、对加热、有机溶剂及强酸强碱稳定等优点。 萃取柱 由模板分子、功能单体、交联剂合成的具有特异性识别功 能的三维孔穴材料，与生物抗体相比较，MIP具有制备容 易成本低廉、对加热、有机溶剂及强酸强碱稳定等优点。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 分子印迹合成过程示意图分子印迹合成过程示意图 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 分子印迹聚合物分子印迹聚合物分子印迹聚合物分子印迹聚合物（MIPMIP）固相萃取柱固相萃取柱固相萃取柱 目前已有大量文献报道将分子印迹聚合物作为固相萃取 材料应用到食品基质中相应农兽药残留的富集净化。如 雌酮，苏丹红号，磺胺二甲基嘧啶，莱克多巴胺，敌 敌畏，氯磺隆，甲巯咪唑和恩诺沙星等分子印迹聚合物 的合成制备。 固相萃取柱 目前已有大量文献报道将分子印迹聚合物作为固相萃取 材料应用到食品基质中相应农兽药残留的富集净化。如 雌酮，苏丹红号，磺胺二甲基嘧啶，莱克多巴胺，敌 敌畏，氯磺隆，甲巯咪唑和恩诺沙星等分子印迹聚合物 的合成制备。 分子印迹固相萃取的过程示意图分子印迹固相萃取的过程示意图 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 固定化离子液体固相萃取柱固定化离子液体固相萃取柱固定化离子液体固相萃取柱固定化离子液体固相萃取柱 ? 将室温（或室温附近温度）下对有机物和无机物具 有良好溶解性能的离子液体通过化学键合作用固定 于硅球等载体表面的孔隙中，使其宏观呈固态； 将室温（或室温附近温度）下对有机物和无机物具 有良好溶解性能的离子液体通过化学键合作用固定 于硅球等载体表面的孔隙中，使其宏观呈固态； ? 合成的固态离子液体填充于固相萃取小柱，即可应 用于复杂样品的选择性固相萃取前处理。 合成的固态离子液体填充于固相萃取小柱，即可应 用于复杂样品的选择性固相萃取前处理。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 固定化离子液体固相萃取柱固定化离子液体固相萃取柱固定化离子液体固相萃取柱 采用该合成方法已制备出对磺酰脲类除草剂具有选择性 吸附作用的N-甲基咪唑六氟磷酸盐硅胶固定化离子液体 填料，并已应用于环境水样和土壤的富集净化。 固定化离子液体固相萃取柱 采用该合成方法已制备出对磺酰脲类除草剂具有选择性 吸附作用的N-甲基咪唑六氟磷酸盐硅胶固定化离子液体 填料，并已应用于环境水样和土壤的富集净化。 NN Cl (EtO)3Si K PF NN Me ( EtO)3Si PF SiO2 surface 2EtOHSi Si OH OH Si Si O O Si OEt NN Me PF6 SiO2 surface 6 6 (EtO) Cl + 3Si NN MeMe 固定化离子液体合成过程固定化离子液体合成过程 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 免疫亲合柱：免疫亲合柱：免疫亲合柱：根据特异性免疫原理将抗体作为免疫吸附 剂固定到固相基质上,这些抗体可优先结合过柱粗提液中 的目标物，最后由适当溶剂洗脱抗体联结物。 免疫亲合柱：根据特异性免疫原理将抗体作为免疫吸附 剂固定到固相基质上,这些抗体可优先结合过柱粗提液中 的目标物，最后由适当溶剂洗脱抗体联结物。 碳纳米管：碳纳米管：碳纳米管：可鳌合金属离子、吸附有机化合物。用作固 相萃取材料可对食品中的磺胺类兽药，有机磷杀虫剂， 雌酮等进行富集检测。 碳纳米管：可鳌合金属离子、吸附有机化合物。用作固 相萃取材料可对食品中的磺胺类兽药，有机磷杀虫剂， 雌酮等进行富集检测。 天然植物或人造纤维天然植物或人造纤维天然植物或人造纤维：如香烟过滤嘴可用作固相萃取材 料对饮用水中的增塑剂，雌性激素以及食品中的重金属 残留进行富集检测。 天然植物或人造纤维：如香烟过滤嘴可用作固相萃取材 料对饮用水中的增塑剂，雌性激素以及食品中的重金属 残留进行富集检测。 由萃取头(针头部分涂一层固定 液或键合一层固定相)吸附样品 中挥发性或半挥发性有机污染 物，吸附一定时间后，取出萃取 头，置于气相色谱(GC)或高效液 相色谱(HPLC)等仪器进样口,进 行热解吸(GC)或溶解(HPLC)。 由萃取头(针头部分涂一层固定 液或键合一层固定相)吸附样品 中挥发性或半挥发性有机污染 物，吸附一定时间后，取出萃取 头，置于气相色谱(GC)或高效液 相色谱(HPLC)等仪器进样口,进 行热解吸(GC)或溶解(HPLC)。 SPME集萃取、净化、浓缩、进 样功能于一体,操作简单、所 需时间短、无需溶剂。 SPME集萃取、净化、浓缩、进 样功能于一体,操作简单、所 需时间短、无需溶剂。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 固相微萃取技术固相微萃取技术 从广义上讲，该技术主要包括以下两个方面：从广义上讲，该技术主要包括以下两个方面： 基于悬挂液滴的基于悬挂液滴的SDME（Suspended/Single Drop Microextraction）形式的微滴液相微萃取；）形式的微滴液相微萃取； 基于中空纤维的两相模式或三相模式的液基于中空纤维的两相模式或三相模式的液-液微萃取或液液微萃取或液- 液液-液微萃取。 由于该方法具有操作简便、快捷、成本低廉、易与色 谱系统联用等优点。近来年，作为一种新型的样品前处理 技术，已经引起了环境分析领域的许多研究人员的注意 液微萃取。 由于该方法具有操作简便、快捷、成本低廉、易与色 谱系统联用等优点。近来年，作为一种新型的样品前处理 技术，已经引起了环境分析领域的许多研究人员的注意。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 ?液相微萃取技术（LPME）液相微萃取技术（LPME） 液相微萃取示意图液相微萃取示意图 ? 离子液体-液相微萃取技术离子液体-液相微萃取技术 常被简称为离子液体，是指在室温或室温附近温度下呈液态的仅由离 子组成的物质，组成离子液体的阳离子一般为有机阳离子（如烷基咪 唑阳离子、烷基吡啶阳离子、烷基季铵离子、烷基季鏻离子等），阴 离子可为无机阴离子或有机阴离子（如 常被简称为离子液体，是指在室温或室温附近温度下呈液态的仅由离 子组成的物质，组成离子液体的阳离子一般为有机阳离子（如烷基咪 唑阳离子、烷基吡啶阳离子、烷基季铵离子、烷基季鏻离子等），阴 离子可为无机阴离子或有机阴离子（如PF6-、BF4-、AlCl4-、 CF3SO3-等）。等）。 自1914年发现第一个离子液体自1914年发现第一个离子液体硝基乙胺以来，特别是在20世纪80年 代中期至今的这段时间，离子液体在许多领域的研究都呈现出非常活 跃的态势，这与离子液体自身的特点是分不开的。 硝基乙胺以来，特别是在20世纪80年 代中期至今的这段时间，离子液体在许多领域的研究都呈现出非常活 跃的态势，这与离子液体自身的特点是分不开的。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 ?离子液体的优点 较传统的液态物质相比，离子液体具有以下几个无与伦 比的优势 离子液体的优点 较传统的液态物质相比，离子液体具有以下几个无与伦 比的优势 ? 几乎没有蒸气压，不易挥发，从而在使用过程中不会给环境造成很大 压力； 几乎没有蒸气压，不易挥发，从而在使用过程中不会给环境造成很大 压力； ? 具有较大的稳定温度范围（-100-200具有较大的稳定温度范围（-100-200C），较好的化学稳定性及较宽 的电化学稳定电位窗口； C），较好的化学稳定性及较宽 的电化学稳定电位窗口； ? 通过阴阳离子的设计可调节其对无机物、水、有机物及聚合物的溶解 性，并且其酸度可调至超酸性，因此可通过一定的阴阳离子的组合设 计构筑 通过阴阳离子的设计可调节其对无机物、水、有机物及聚合物的溶解 性，并且其酸度可调至超酸性，因此可通过一定的阴阳离子的组合设 计构筑“需求特定需求特定”或或“量体裁衣量体裁衣”的离子液体的离子液体 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 ASE是在升高温度和压力条件下， 增加物质的溶解度和溶质的扩散效 率，提高萃取效率的自动化方法。 是在升高温度和压力条件下， 增加物质的溶解度和溶质的扩散效 率，提高萃取效率的自动化方法。 有效应用于固体和半固体样(如蔬 菜、鱼肉、水果、茶叶等)的前处 理。 有效应用于固体和半固体样(如蔬 菜、鱼肉、水果、茶叶等)的前处 理。 ASE方法快速、溶剂用量少，可在方法快速、溶剂用量少，可在 15分钟内用分钟内用15 mL溶剂完成萃取， 且方法回收率高、重现性好。 溶剂完成萃取， 且方法回收率高、重现性好。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 快速溶剂萃取快速溶剂萃取 与索氏提取、超声、微波、超临界和经典的分液漏斗振摇等 公认的成熟方法相比,加速溶剂萃取的突出优点如下: 与索氏提取、超声、微波、超临界和经典的分液漏斗振摇等 公认的成熟方法相比,加速溶剂萃取的突出优点如下: 有机溶剂用量少,10 g 样品一般仅需15mL溶剂;有机溶剂用量少,10 g 样品一般仅需15mL溶剂; 快速,完成一次萃取全过程的时间一般仅需15min ;快速,完成一次萃取全过程的时间一般仅需15min ; 基体影响小,对不同基体可用相同的萃取条件;基体影响小,对不同基体可用相同的萃取条件; 萃取效率高,选择性好,已进入美国EPA 标准方法,标准方法 编号3545 ; 现已成熟的用溶剂萃取的方法都可用加速溶剂萃取法做,且 使用方便、安全性好,自动化程度高。 萃取效率高,选择性好,已进入美国EPA 标准方法,标准方法 编号3545 ; 现已成熟的用溶剂萃取的方法都可用加速溶剂萃取法做,且 使用方便、安全性好,自动化程度高。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 ? 加速溶剂萃取的突出优点加速溶剂萃取的突出优点 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 ? 基质固相分散萃取基质固相分散萃取基质固相分散萃取基质固相分散萃取 基质固相分散萃取技术是1989 年由美国Louisiana 州立大 学的Staren Barke教授首次提出，用于动物组织样品中抗 生素药物的提取和净化 基质固相分散萃取技术是1989 年由美国Louisiana 州立大 学的Staren Barke教授首次提出，用于动物组织样品中抗 生素药物的提取和净化 将涂渍有将涂渍有C18、C8、硅酸镁、活性炭等多种聚合物的担体 固相萃取材料与样品一起研磨，制成半固态装柱，轻敲 使混合物沉积到滤光片上，用处理过的活塞加压混合物， 用不同的溶剂淋洗柱子，最后将各种待测样品洗脱下来。 、硅酸镁、活性炭等多种聚合物的担体 固相萃取材料与样品一起研磨，制成半固态装柱，轻敲 使混合物沉积到滤光片上，用处理过的活塞加压混合物， 用不同的溶剂淋洗柱子，最后将各种待测样品洗脱下来。 适应于各种分子结构和极性的农药残留的提取、净化， 通用性好，提取净化效率高，更适于自动化。 适应于各种分子结构和极性的农药残留的提取、净化， 通用性好，提取净化效率高，更适于自动化。 ? 基质固相分散萃取的优点 MSPDE是在SPE 基础上改进后的样品前处理方法，与SPE相比 较， 基质固相分散萃取的优点 MSPDE是在SPE 基础上改进后的样品前处理方法，与SPE相比 较，其优点在于:其优点在于: MSPDE 依靠机械剪切力和C18 键合相的去垢效应及巨大 的表面积使样品结构破碎并且在填料表面均匀分散，简化了 传统样品前处理中所需的样品匀浆、组织细胞裂解、提取、 净化等过程，避免了样品匀浆、转溶、乳化、浓缩等造成的 待测物损失，提高了净化效率 MSPDE 依靠机械剪切力和C18 键合相的去垢效应及巨大 的表面积使样品结构破碎并且在填料表面均匀分散，简化了 传统样品前处理中所需的样品匀浆、组织细胞裂解、提取、 净化等过程，避免了样品匀浆、转溶、乳化、浓缩等造成的 待测物损失，提高了净化效率。 超临界流体萃取技术超临界流体萃取技术 SFE是利用处于临界低压 和临界温度以上的二氧化 碳流体作为萃取溶剂，选 择性溶出所需化学成分的 分离新技术。 是利用处于临界低压 和临界温度以上的二氧化 碳流体作为萃取溶剂，选 择性溶出所需化学成分的 分离新技术。 我国超临界流体萃取研究 始于 我国超临界流体萃取研究 始于20世纪世纪80年代初，并 在提取天 然色素、香精香 料、挥发油、中草药、金 属离子等方面得到了广泛 应用。 年代初，并 在提取天 然色素、香精香 料、挥发油、中草药、金 属离子等方面得到了广泛 应用。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 主要是指采用水作为主要萃 取溶剂，通过加热加压及控 制各种影响条件，实现对环 境、食品等各种固体和半固 体样品中的有机物及无机元 素的萃取。 主要是指采用水作为主要萃 取溶剂，通过加热加压及控 制各种影响条件，实现对环 境、食品等各种固体和半固 体样品中的有机物及无机元 素的萃取。 已有报道将已有报道将SWE用于用于 PAHs、 PCBs、氯酚、杀虫剂、有 机氯农药、除草剂等的处 理。 、氯酚、杀虫剂、有 机氯农药、除草剂等的处 理。 样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术样品前处理新技术 动态亚临界水萃取设备动态亚临界水萃取设备动态亚临界水萃取设备动态亚临界水萃取设备 色谱色谱质谱联用技术质谱联用技术 仪器检测新技术仪器检测新技术 痕量无机物定量 无机元素形态分析 痕量无机物定量 无机元素形态分析 气相色谱或液相色谱气相色谱或液相色谱电 感耦合等离子体质谱联用 电感耦合等离子体质谱 电 感耦合等离子体质谱联用 电感耦合等离子体质谱(ICP-MS） 原子发射光谱（ ） 原子发射光谱（AES） 原子吸收光谱（ ） 原子吸收光谱（AAS） 毛细管电泳 ） 毛细管电泳质谱（质谱（CE-MS） 高效液相色谱 ） 高效液相色谱串联质谱（LC-MS/MS） 高效液相色谱 串联质谱（LC-MS/MS） 高效液相色谱质谱（质谱（LC-MS） 气相色谱 ） 气相色谱串联质谱串联质谱 (GC-MS/MS) 气相色谱气相色谱质谱 （质谱 （GC-MS） 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 一般只限于挥发性成分的分析，对于难挥发性成分要 进行衍生化处理。 一般只限于挥发性成分的分析，对于难挥发性成分要 进行衍生化处理。 适用于做多组分混合物中未知 物定性鉴定；判定化合物分子 结构、准确测定未知组分的相 对分子质量。 适用于做多组分混合物中未知 物定性鉴定；判定化合物分子 结构、准确测定未知组分的相 对分子质量。 一次完成多种成分的同时分析， 对农药具有更高的回收率、灵 敏度和重现性，适合大批量农 残检测。 一次完成多种成分的同时分析， 对农药具有更高的回收率、灵 敏度和重现性，适合大批量农 残检测。 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 ? 气相色谱与质谱的联用分析气相色谱与质谱的联用分析气相色谱与质谱的联用分析气相色谱与质谱的联用分析 食品中食品中食品中食品中4242种农药的气相色谱种农药的气相色谱种农药的气相色谱种农药的气相色谱- - 质谱选择离子测定质谱选择离子测定质谱选择离子测定质谱选择离子测定 样品处理方法样品处理方法样品处理方法样品处理方法 液液萃取液液萃取- -固相萃取联用：固相萃取联用： 样品中的样品中的4242种农药经二氯甲烷提取后，种农药经二氯甲烷提取后，EnviEnvi - -CarbCarb柱和柱和Sep Sep - - Pak Pak - - NH2NH2柱双柱净化，净化后直接进样分析柱双柱净化，净化后直接进样分析 色谱条件色谱条件色谱条件色谱条件 色谱柱色谱柱: HP : HP - - 5MS ( 30 m 5MS ( 30 m 0125 mm 0125 mm 01250125m) ; m) ; 载气载气: : 高纯氦气高纯氦气, , 流量流量 111 ml/min; 111 ml/min; 柱温柱温: 70: 70, , 保持保持2 min,2 min,以以2525/min/min升至升至150150, ,再以再以3 3/min/min升至升至 200200, ,再以再以8 8/min/min升至升至260260, ,保持保持10 min;10 min;进样口温度进样口温度: 250: 250; ;进样方式进样方式: :不分流不分流 进样进样, 115 min, 115 min后打开分流阀和隔垫吹扫。后打开分流阀和隔垫吹扫。 质谱条件质谱条件质谱条件质谱条件 : : 离子源离子源(EI)(EI)温度温度: 230: 230, ,电子轰击能量电子轰击能量70 70 eV,GCeV,GC - - MSMS接口温度接口温度: 280: 280 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术气相色谱与质谱的联用气相色谱与质谱的联用 ? 分析实例分析实例分析实例分析实例1 1 分析特征量分析特征量 42中农药的线性范围:0.0011.0g/ml 样品的加标回收率：89%-94%, RSD 10% 方法的最低检出限：0.0010.005 mg/kg ( S/N = 3) 检测农药种类检测农药种类 有机磷、拟除虫菊酯、有机氯、氨基甲酸酯和除草剂 检测的样品种类检测的样品种类 肉类，蛋类，乳品，蔬菜和水果 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术气相色谱与质谱的联用气相色谱与质谱的联用 ? 分析实例分析实例分析实例分析实例1 1 加速溶剂萃取- 气相色谱质谱联用法测定食品中指示性多 氯联苯的研究 样品前处理 加速溶剂萃取- 气相色谱质谱联用法测定食品中指示性多 氯联苯的研究 样品前处理 加速溶剂萃取-固相萃取联用 加速溶剂萃取条件 压力: 10Mpa (1 500 p si) ; 温度: 125; 加热时间: 6 min; 稳定时间: 5 min; 清洗体积:占萃取池体积的60%; 吹扫时间: 120 s; 静态循环次数: 2次。 固相萃取柱：酸性硅胶柱和碱性硅胶柱联用 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术气相色谱与质谱的联用气相色谱与质谱的联用 ? 分析实例分析实例分析实例分析实例2 2 色谱条件色谱条件 HP - 5MS毛细管色谱柱(30 m 0125 mm0125m) ;进样口温度: 300;升温程序:初始温度100保持2 min,以15/min 升温至180,以 3/min 升温至240,再以10/min升温至285,保持10 min;载气:氦气, 流速110 ml/min;进样:不分流进样, 1l 质谱条件质谱条件 电子轰击( EI)离子源: 70 eV;接口温度:280;离子源温度: 250;四级杆温度: 100;定量方式:选择离子监测( SIM) 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术气相色谱与质谱的联用气相色谱与质谱的联用 ? 分析实例分析实例分析实例分析实例2 2 分析特征量分析特征量 最低检测限：水产品：为0105101286，肉松0100301146g/kg 添加回收率：86.4% 125.1%, RSD在1.1% 19.6%之间 检测的目标有害物质检测的目标有害物质 20种多氯联苯 检测的样品种类检测的样品种类 水产品，肉松 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术气相色谱与质谱的联用气相色谱与质谱的联用 ? 分析实例分析实例分析实例分析实例2 2 适用于高沸点、大分子、 强极性和热稳定性差的化 合物的分析。 适用于高沸点、大分子、 强极性和热稳定性差的化 合物的分析。 适于复杂基质样品,特别是 食品，生物样品中的农兽药 残留的定性定量分析。 适于复杂基质样品,特别是 食品，生物样品中的农兽药 残留的定性定量分析。 利于多组分筛选试验进行多 组分分析。 利于多组分筛选试验进行多 组分分析。 ?高效液相色谱与质谱联用分析高效液相色谱与质谱联用分析高效液相色谱与质谱联用分析高效液相色谱与质谱联用分析 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 高效液相色谱与质谱联用分析高效液相色谱与质谱联用分析 ? 液相色谱液相色谱-质谱联用对复杂食品基质中质谱联用对复杂食品基质中407种多农药残留量的测定 样品前处理 种多农药残留量的测定 样品前处理 液液萃取-固相萃取 样品经过乙腈和二氯甲烷提取后，过C18固相萃取柱净化 色谱条件色谱条件 色谱柱: Agilent SB - C18 , 211 mm 100 mm, 118m; 柱温: 50 ; 进样量: 20L; 流动相A:0.1%甲酸- 10 mmol/L乙酸铵; 流动相B: 乙腈; 流速: 013 mL /min; 梯度洗脱条件: 04 min, A由99%变化至50% , 415 min, A 由50%变化至 40% , 1520 min, A由40%变化至20% , 2025min, A 由20%变化至1% , 25 30 min, A保持1% , 303011 min, A 由1%变化至99%后运行8 min 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 高效液相色谱与质谱联用分析高效液相色谱与质谱联用分析 ?分析实例分析实例分析实例分析实例1 1 1 1 质谱条件质谱条件 电离源模式: 电喷雾离子化电离源极性: 正模式 雾化气: 氮气雾化气压力: 218 105 离子喷雾电压: 4 000 V 干燥气温度: 350 分析特征量分析特征量 407种农药的线性范围为0.5500g/L，RSD 10% 检测目标有害物检测目标有害物 多效唑，乙草胺等407种农药 检测的样品检测的样品 苹果、蜂蜜、谷物和肉类中 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 高效液相色谱与质谱联用分析高效液相色谱与质谱联用分析 ?分析实例分析实例分析实例分析实例1 1 1 1 ? 高效液相色谱一质谱质谱联用法测定减肥食品中四种药物 样品前处理 高效液相色谱一质谱质谱联用法测定减肥食品中四种药物 样品前处理 超声提取后直接进样。 色谱条件色谱条件 色谱柱：TEKNOKROMA柱（10*2.1cm，3 um）柱温：30 流动相：甲醇：乙酸铵，流速：0.2 ml min-1 进样量：10 ul 质谱条件质谱条件 大气压化学电离（APCI），正离子，分辨率Q1=0.7 moll-1,Q3=0.7 mol l-1，汽化温度 243 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 高效液相色谱与质谱联用分析高效液相色谱与质谱联用分析 ?分析实例分析实例分析实例分析实例2 2 2 2 分析特征量分析特征量 线性范围：0.01-10 mg L-1 样品添加回收率：96%-100% ，RSD 2% 检测目标物检测目标物 西布曲明、芬氟拉明、马吲哚和酚酞 检测样品检测样品 减肥食品 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 高效液相色谱与质谱联用分析高效液相色谱与质谱联用分析 ?分析实例分析实例分析实例分析实例2 2 2 2 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 ? 高效毛细管电泳色谱高效毛细管电泳色谱高效毛细管电泳色谱高效毛细管电泳色谱 电泳技术和现代微柱分离相结合的分析技术 高灵敏度，高分辨率，高速度，样品用量少，成本低廉的 优点 非常适合水溶性或醇溶性成分的多组分分离分析 应用领域应用领域 广泛的应用于化学，生命科学，临床医学和药学，特别是 药物分析和分离方面得到广泛的应用 目前在食品中功能成分的分析和添加 剂的检测等方面有广泛的应用 高效毛细管电泳法短时内同时测定咖啡因、山梨酸、苯甲 酸、糖精的含量 色谱条件 高效毛细管电泳法短时内同时测定咖啡因、山梨酸、苯甲 酸、糖精的含量 色谱条件 毛细管柱：有效长度为: 45 cm 内径：50 um 缓冲液：硼砂 20 mmol L-1, SDS 5 mmol L-1pH 7.8 检测波长：214 nm 分离电压：15 KV 分析特征量分析特征量 样品添加回收率：97-102%，RSD 5% 线性范围：0.125 mg mL-1至 1 mg mL-1最低检出限：0.05 mg mL-1 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术高效毛细管电色谱技术高效毛细管电色谱技术 ?分析实例分析实例分析实例分析实例1 1 1 1 检测的添加剂的种类 咖啡因 没食子酸 山梨酸，苯甲酸 糖精 检测的样品 饮料，果脯类食品 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术高效毛细管电色谱技术高效毛细管电色谱技术 ?分析实例分析实例分析实例分析实例1 1 1 1 固相萃取和毛细管区带电泳法测定磺酰脲除草剂 样品前处理 固相萃取和毛细管区带电泳法测定磺酰脲除草剂 样品前处理 固相萃取方法 样品经过0.45 um滤膜过滤后直接用C18固相萃取 柱富集净化 色谱方法色谱方法 毛细管柱：熔融石英毛细管有效长度75 cm，内径75 um 缓冲液：50 mMNaAc/HAc+10%ACN， pH 5.0 分离电压：20 KV 检测波长：254 nm 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术高效毛细管电色谱技术高效毛细管电色谱技术 ?分析实例分析实例分析实例分析实例2 2 2 2 分析特征量分析特征量 线性范围：0.250 mg L-1，最低检测限：0.050.10 mg L-1 样品添加回收率：65103，RSD 5% 检测的目标物检测的目标物 醚磺隆、醚苯磺隆、苯磺隆、噻磺隆、甲磺隆和绿磺隆 检测的样品检测的样品 饮用水 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术高效毛细管电色谱技术高效毛细管电色谱技术 ?分析实例分析实例分析实例分析实例2 2 2 2 ?CECECECE- - - -MSMSMSMS联用技术联用技术联用技术联用技术 CE分离速度快、柱效高和样品、试剂用量少等特点 MS能提供精确分子量和结构信息、灵敏度高以及专属性 强等功能 CE与MS相结合可为复杂生化、环境等样品的定性、定量 分析提供了强有力的工具 1993 年，Verheij 等首先开展了CE与MS 结合的研究工作 1994 年，Lane 等通过实验证明了CEC-ESI-MS进行分离检测的可行性 1999 年，Bayer 等对CEC-CIS-MS 作了详细的介绍 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术毛细管电色谱质谱联用技术毛细管电色谱质谱联用技术 CE-MS联用技术的应用CE-MS联用技术的应用 CEC-MS 用于食品生物样品分析用于食品生物样品分析 M. Hugener 等采用CEC-ES-MS 对食品中的色素和芳香葡萄糖苷酸 进行分析 Gucek 等采用毛细管电色谱-电喷雾质谱(CEC-ESI-MS) 对肽的混合 物进行分析,检测灵敏度可达到阿摩尔(attomole) 级。 CEC-MS 用于生物反应研究用于生物反应研究 Jim 等采用CEC-MS 研究生物大分子与有机小分子配体的结合作用, 通过扫描有机小分子库可以迅速、准确地表征与生物大物在特定 的位点有亲和力的有机小分子。 CEC-MS 用于药物分析用于药物分析 Paterson 等采用CEC-MS 联用技术对血浆提取物中与候选药物母体 结构相关的13 种化合物进行了分析和定量 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术毛细管电色谱质谱联用技术毛细管电色谱质谱联用技术 ? 电感耦合等离子体质谱电感耦合等离子体质谱电感耦合等离子体质谱电感耦合等离子体质谱 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术 上世纪80年代初建立的的一种将等离子体与四级质谱仪 相连接的分析仪器。 原理原理 电感磁场与氦气作用产 生高达7000K的高温等 离子体, 基本上能使所 有元素电离成单电荷的 离子, 然后进入质谱仪, 定性和定量检测各种一 定质荷比的离子 灵敏度高，一般检出限可达ppb级 有宽广的线性动态范围, 一般跨越五个数量级浓度范围的校正曲线基 本上都能成直线比例 选择性高, 元素之间测定相互干扰少 操作快速, 并能进行多元素分析 有同位素信息 在一定质量数范围内, 仪器能提供稳定均匀的响应。 仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术仪器检测新技术电感耦合等离子体质谱 ? 主要特点主要特点 ? 应用应用 ICP-MS 已广泛应用于生物样品、环境样品、药物样品、食品 样品和稀土元素等方面的分析研究 王培龙利用ICP-MS 测定了饲料中的铜、锌、铁、锰、铬、 镉、铅、砷和硒等微量元素，回收率在86 %115 %，检出限 达到10 - 9级。 其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术 ? 全二维气相色谱全二维气相色谱全二维气相色谱全二维气相色谱/ / / /飞行时间质谱飞行时间质谱飞行时间质谱飞行时间质谱 全二维气相色谱飞行时间质谱仪是本世纪初问世的仪器, 是把分离机 理不同而又互相独立的两根色谱柱通过一个调制器, 以串联方式结合 成二维气相色谱 ?优 点优 点 提供更高的峰容量 由于调制器的再聚焦作用，使得组 分的分离和检测灵敏度都得到提 高。 采用适当的色谱操作条件，可以得 到包含结构信息的二维结构谱图。 结构谱图可以用于族组成定性，或 对未知组分提供辅助定性信息 其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术 全二维气相色谱全二维气相色谱全二维气相色谱全二维气相色谱/ / / /飞行时间质谱的应用飞行时间质谱的应用飞行时间质谱的应用飞行时间质谱的应用 精油组成成分的分析精油组成成分的分析 Adahchour等采用顶空固相微萃取和 GCGC对大蒜挥发性香味成分进行了 分析，发现了大蒜中更为详尽的具有 芳香活性的组分 环境、生物和食品样品中的应用环境、生物和食品样品中的应用 Liu等用 GCGC 方法在 4min 内完成 了 15 种农药的分离，并将 GCGC用 于人血清中农残的研究。 季克良等采用GCGC方法，酱香型白 酒分出963 个峰,浓香型白酒分出674 个峰, 清香型白酒分出484 个峰。 ? 超高效液相色谱超高效液相色谱超高效液相色谱超高效液相色谱/ / / /飞行时间质谱飞行时间质谱飞行时间质谱飞行时间质谱 UPLC采用了1.7 m 的小粒径色谱柱填料, 与传统的HPLC相 比有更好的分离效率、峰容量以及灵敏度 (pgfg级)。 其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术 与能够测定化合物的精确质量 并具有MS/MS功能的高分辨时 间飞行质谱联用，成为复杂体 系分离分析以及化合物结构鉴 定的良好平台 徐继林等采用超高效液相色谱/四极杆/飞行时间质谱鉴定 了光合作用产生的单半乳糖甘油二酯、双半乳糖甘油二酯 和混合硫代异鼠李糖甘油二酯三种物质 汪江山等超高效液相色谱/飞行时间质谱测定人参皂甙Rg3 给药后大鼠尿液代谢物变化的方法,对其中2种发生显著变 化的代谢物分别通过准确的质量测定得到其元素组成,通 过MS /MS技术得到其结构信息,并通过检索数据库最终分 别鉴定为4.8-二羟喹啉甲酸和4-羟基-2-喹啉酸。 杨寒朔等采用纳升超高效液相色谱-飞行时间质谱检测斑 马鱼胚胎中小分子多肽的方法。 其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术其他类串联质谱检测新技术 ? 超高效液相色谱超高效液相色谱超高效液相色谱超高效液相色谱/ / / /飞行时间质谱应用飞行时间质谱应用飞行时间质谱应用飞行时间质谱应用 免疫分析检测技术免疫分析检测技术免疫分析检测技术免疫分析检测技术 ? 原理原理原理：基于抗原、抗体的特异性识别和结合反应为基础的 分析方法，通过对抗原或抗体进行标记(酶、荧光物质、 放射性同位素标记等)，利用标记物的生物或物理化学放 大作用,与现代测试技术相结合，对样品中特定的农药残 留物进行定性定量检测。 原理：基于抗原、抗体的特异性识别和结合反应为基础的 分析方法，通过对抗原或抗体进行标记(酶、荧光物质、 放射性同位素标记等)，利用标记物的生物或物理化学放 大作用,与现代测试技术相结合，对样品中特定的农药残 留物进行定性定量检测。 ? 特点特点特点特点： 特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高 方便快捷、分析容量大、检测成本低方便快捷、分析容量大、检测成本低 可提供系列化的产品以及技术，产品可以商业化。可提供系列化的产品以及技术，产品可以商业化。 免疫分析检测技术免疫分析检测技术 酶联免疫分析 荧光免疫分析 免疫传感器 膜载体免疫分析 分子印迹技术 流动注射免疫分析 免疫-PCR技术 蛋白质芯片技术 酶联免疫分析 荧光免疫分析 免疫传感器 膜载体免疫分析 分子印迹技术 流动注射免疫分析 免疫-PCR技术 蛋白质芯片技术 放射免疫分析放射免疫分析 免疫新技术免疫新技术免疫新技术免疫新技术 传统免疫分析技术传统免疫分析技术 免疫分析检测技术免疫分析检测技术免疫分析检测技术免疫分析检测技术 ? 放射免疫分析技术（放射免疫分析技术（放射免疫分析技术（放射免疫分析技术（RIARIA） 将放射性核素示踪的高灵敏度与抗原-抗体反应的高特异 性结合起来的一种超微量分析方法，可检测病毒、细 菌、 寄生虫、肿瘤以及小分子药物等。 将放射性核素示踪的高灵敏度与抗原-抗体反应的高特异 性结合起来的一种超微量分析方法，可检测病毒、细 菌、 寄生虫、肿瘤以及小分子药物等。 具准确灵敏、特异性强，但放射免疫技术有一定的危险 性，目前在农/兽药检测中应用较少。 具准确灵敏、特异性强，但放射免疫技术有一定的危险 性，目前在农/兽药检测中应用较少。 免疫分析检测技术免疫分析检测技术免疫分析检测技术免疫分析检测技术 ? 酶免疫分析技术（酶免疫分析技术（酶免疫分析技术（酶免疫分析技术（ELISAELISA） 原理：利用酶标记物同抗原抗体复合物的免疫反应与酶的 催化放大作用相结合，当偶联物与固相载体上的抗原或抗 体反应后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还 原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与待测标本含量成 比例，由此进行定性或定量分析。 原理：利用酶标记物同抗原抗体复合物的免疫反应与酶的 催化放大作用相结合，当偶联物与固相载体上的抗原或抗 体反应后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还 原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与待测标本含量成 比例，由此进行定性或定量分析。 应用：应用： ? 有机磷农药有机磷农药 ? 拟除虫菊酯类农药拟除虫菊酯类农药 ? 有机氯类农药有机氯类农药 ? 氨基甲酸酯类氨基甲酸酯类 ? 兽药类兽药类 免疫分析检测技术免疫分析检测技术免疫分析检测技术免疫分析检测技术 ? 酶免疫分析技术（酶免疫分析技术（酶免疫分析技术（酶免疫分析技术（ELISAELISA） 方法建立方法建立：待测物选择半抗原合成人工抗原合 成抗体制备测定方法建立样本前处理方法 方法评价 ELISA分