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肾活检组织光镜和免疫荧光标本的制备及检查,大连市中心医院肾内科 于晓霞,前 言,光镜、免疫荧光、电镜观察肾活检组织结构对诊断各种类型的肾小球疾病有重要意义 标本处理及制片质量的好坏，与诊断的难易及准确与否有着极为密切的关系 必须重视标本制备中的每个细小环节,准备工作,生理盐水浸透纱布（潮湿拧不出水） 纱布及编号的胶布置培养皿备用 清洁5ml小瓶，加光镜固定液3ml（10的中性福尔马林溶液），盖塞紧后备用 清洁5ml小瓶内加冷电镜固定液3ml置冰瓶（4%戊二醛）,肾活检标本的初步处理,取材判断,皮质组织 皮髓交界组织 皮质-髓质-皮质组织 仅取得髓质组织则为取材不成功,取材判断,判断已取组织：肾组织，肌肉、脂肪、结缔组织等 用解剖显微镜或放大镜判断肾组织部位（皮质和髓质，有无肾小球），及时与术者联系 肾皮质色淡，见分布不规则，朦胧的红色小点（肾小球）。随经验积累，可肉眼判定 立即置肾组织于蜡板上，迅速测量其长度（cm），记录 、分割，迅速固定 取标本部位、量重要。如无肾小球或皮质1 cm，考虑再次穿刺,标本分切法,取组织长1.5cm2.0cm最佳（1次） 小镊子将组织轻置蜡板上，镜下观察、量长度 锐利刀片切割组织1mm、2mm及4mm数段 先供电镜标本，要求皮质1mm（肾小球1个） 其次免疫病理，需组织约2mm（肾小球35个） 余组织供光镜（肾小球10个）,标本分切法,肾活检穿刺组织的分取 LM：光镜；IF：免疫荧光；EM：电镜,标本的处理,光镜 分切后的组织平放蜡板上（勿扭曲） 小镊子沾少许光镜固定液于组织表面，约30 组织稍硬后，再将整条组织放入固定液内（这样固定的组织平整、不易弯曲，便于切出完整的切片）,标本的处理,免疫荧光及免疫酶标 分切后的组织迅速置预冷的培养皿内的湿纱布中 置冰瓶即送至恒温冷冻切片机内（2d,标本的处理,电镜 将分切后的肾组织即浸4%的冷戊二醛固定液中，置冰瓶内送至电镜室,注意事项,短时完成观察和分切标本，注意保持肾组织湿润，切勿使其干涸 解剖显微镜光源不宜太强，否则观察组织易干涸，不易看清肾小球 免疫荧光用的肾组织必须避免接触固定液，尤其含酒精固定液（避免影响冰冻切片结果）；电镜和光镜固定液不得互相混淆 动作轻柔夹取未固定组织，勿牵扯组织，避免人为因素造成组织细胞变形,肾活检标本光镜检查,HE,PAS,PASM,Masson,肾活检标本免疫荧光检查,MN-IgG,IgAN-IgA,LN-IgM,免疫荧光,电 镜,常用染色,HE,PAS,Masson,PAM-Masson,刚果红,油红“O”
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