影响酶活力的因素

酶作用的动力学观察一、目的和要求1了解温度，PH值对酶活性的影响。2了解酶促反应的激活与抑制二、实验原理酶，有的是单纯蛋白质，有的是结合蛋白质，因此，凡是能够引起蛋白质变性的因素，都可以使酶丧失活性，温度，PH值，激活剂和抑制剂对酶的活性都有显著的影响。酶活性通常是通过测定酶促反应的底物或产物量的变化来进行观察。本实验用唾液淀粉酶为材料来观察酶活性受理化因素影响的情况。淀粉在该酶的催化作用下会随着时间的延长而出现不同程度的水解，从而得到各种糊精乃至麦芽糖、少量葡萄糖等水解产物。碘液能指示淀粉的水解程度：淀粉 糊精 麦芽糖 + 少量葡萄糖加碘后： 蓝色 紫红色、暗褐色或红色等 棕黄色（碘本身颜色）淀粉遇碘可呈紫色、暗褐色与红色，而麦芽糖与葡萄糖遇碘则不呈颜色反应，仅显示碘液的原色。1温度对酶活性的影响酶的催化作用受温度的影响很大，一方面与一般化学反应一样，酶促反应速度随着温度的升高而增大。当温度升高到一定程度时，酶促反应的速度达到最大值。此时的温度称为该酶的最适温度。另一方面酶是一种蛋白质，温度过高会引起蛋白质变性，导致酶的失活，因此，反应速度达到最大值以后，随着温度的升高，反应速度反而逐渐下降，以至完全停止反应。2PH值对酶活性的影响酶的活性受环境PH的影响极为显著。通常酶只有在一定的PH范围内才表现活性，一种酶表现活性最强时的PH值，称为该酶的最适PH，偏离最适PH时酶的活性逐渐降低，偏离越远，其活性越低，不同的酶最适PH不同，例如，胃蛋白酶的最适PH为1。252。5，淀粉酶的最适PH为6。8，但是酶的最适PH还受底物性质和缓冲液性质的影响，在磷酸缓冲液中，淀粉酶的最适PH为6。46。6。3酶的激活剂和抑制剂酶的活性受某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂；有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制剂，例如，氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂，硫酸铜为抑制剂，激活剂和抑制剂通常是具有特异性的。三、试剂和器材1试剂（1）1淀粉溶液（2）PH5。0、5。8、6。6、7。4、8。0的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液。（3）自制唾液淀粉酶（见实验一）（4）碘化钾碘液：将碘化钾20克及碘10克溶于100毫升蒸馏水中，用时稀释10倍。（5）1氯化钠溶液（6）2硫酸铜溶液2器材（同实验一）。四操作方法1温度对唾液淀粉酶活性的影响 取三支试管，编号，按下表操作 试管号试剂1231淀粉溶液（滴）555PH6.6缓冲液（滴）101010自制唾液淀粉酶溶液（滴）55煮沸过的唾液淀粉酶溶液（滴）5混匀，1号管放入冰水中，2，3号管放置37恒温水浴中保温，10分钟后三管同时取出各加碘试剂1滴，摇匀；观察各管颜色有何不同，解释之。2PH值对唾液淀粉酶活性的影响取5支试管，编号，按下表操作。 试管试剂123451淀粉溶液（滴）55555缓冲液（滴）PH5.010PH5.810PH6.610PH7.410PH8.010自制唾液淀粉酶溶液（滴）55555混匀，置37水浴箱中保温，10分钟后取出碘试剂（滴）11111摇匀，观察各管颜色有何不同，解释这种现象。3抑制剂和激活剂对唾液淀粉酶活性的影响取三支试管，编号，按下表操作。 试管试剂1231淀粉溶液（滴） 5 55PH6.6缓冲液（滴） 10 10101氯化钠溶液（滴） 4 /2硫酸铜溶液（滴） /