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文档简介

实 验 5,细菌培养法,目的要求,1、学习和掌握细菌分离与培养的各种基本技术； 2、进一步熟悉和掌握无菌操作技术。,实验材料,标本和菌种：大肠杆菌培养物、葡萄球菌培养物、变形杆菌培养物、枯草杆菌培养物； 实验器材：接种环、接种针、酒精灯； 培养基：普通琼脂平板、试管斜面、液体培养基、半固体培养基；,常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃涂棒等（见图6）。,图6,接种工具,细菌接种的基本程序,灭菌接种环,沾取标本,接种,灭菌接种环,杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本,杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境,（一）细菌的分离方法,培养基：固体平板培养基 分离方法：划线分离法 意义：该法主要是借助划线而将混杂的细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌能固定在某一点，生长繁殖后形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。,细菌的分离培养方法,微生物的分离平板划线法,1.分区划线法： 2.连续划线法：,微生物的分离平板划线法,分区划线法,第一区划线,灭菌接种环,第二区划线,灭菌接种环,第三区划线,灭菌接种环,连续划线法,（二）细菌的接种法,当细菌分离成纯种后，常需要接种到相关的培养基中，以测试其各种生物学性状。一般可用斜面、半固体、液体培养基来检验细菌的培养特性，相应培养基的接种方法有三种。,斜面接种法,培养基：斜面固体培养基； 接种方法：斜面培养基接种法； 用途：扩增细菌、保存菌种；或用于观察其某些生化特性。,琼脂斜面培养基接种法,穿刺接种,半固体培养基： 接种方法：穿刺接种法。用接种针垂直地穿入培养基中心至底部 然后沿着原接种线将针拔出 用途：检验细菌的运动性或观察细菌的生化反应。,液体培养基接种法,培养基：液体培养基 接种方法：液体接种法 从斜面菌种接入液体培养液 从液体培养液接入液体培养液 用途：扩增细菌，用于观察细菌的生长特性或测定其生化特性。,细菌培养法,一般培养（需氧培养）： 培养温度：37（采用恒温培养箱） 培养时间：1824h 二氧化碳培养法：烛缸法、二氧化碳培养箱 厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等,细菌在固体培养基中的生长现象,菌落： 定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性 菌落类型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M） 菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。,菌 落,菌落与菌苔,细菌在液体培养基中的生长现象,混浊：多见于兼性厌氧菌 沉淀：多见于厌氧菌 菌膜：多见于专性需氧菌,液体培养基的细菌生长,细菌在半固体培养基中的生长现象,有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。 无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。,穿刺接种生长现象,结
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