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2.生物技术实践(B)1.(2018杭州学军中学模拟)回答下列有关果胶、果汁和果胶酶等相关的问题:(1)果胶是植物细胞壁的主要成分,起着将植物细胞_在一起的作用。制作果汁时可加入果胶酶和_以分解果胶,提高果汁出汁率和澄清度。(2)果胶酶可从黑曲霉中提取,下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是_(A.蛋白胨和酵母提取物培养基B.尿素固体培养基C.MS培养基D.添加蔗糖的豆芽汁培养基)。由于果胶酶溶于水,不利于重复使用,可通过物理或化学方法将果胶酶固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有_的制剂。(3)用果汁制作果酒,以果汁为原料,加入一定比例的蔗糖的目的是_。最后倒入酵母悬液,混匀,加盖;发酵开始时,由于微生物的需氧呼吸会使发酵瓶内出现_,原因是_。答案(1)粘合果胶甲酯酶(2)D酶活性(3)提高果酒的酒精和糖的含量负压需氧呼吸消耗氧气,产生的二氧化碳比氧气易溶于水2.(2018宁波镇海中学期中)请回答与“大肠杆菌的培养与分离”实验有关的问题:(1)大肠杆菌是革兰氏_、兼性厌氧的肠道杆菌,一般对人无害。实验室利用_培养基扩大培养大肠杆菌,培养后使用灼烧、冷却后的_进行划线分离,这种_的分离是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。(2)若要将大肠杆菌临时保存,一般接种在_上,37 培养24 h后,置于_(A.20 B.4 C.4 D.37 )环境条件下保存。答案(1)阴性LB液体接种环单菌落(2)斜面C解析(1)大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌;在实验室中扩大培养大肠杆菌时常用LB液体培养基;接种时需对接种环灼烧灭菌;采用划线分离法筛选出高表达量单菌落。(2)若要将大肠杆菌临时保存,一般接种在斜面培养基上,37 培养24 h后,并置于4 环境条件下保存。3.在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中先将10升湖水水样浓缩至10毫升,然后各取浓缩水样1毫升,涂布到多个培养皿中培养。请回答下列问题:(1)可以通过提高培养基中_的浓度,筛选被调查细菌,这种培养基被称为_培养基。(2)要提高实验结果的可靠性,排除培养基未彻底灭菌的可能性,应该设置的对照组是_。为检验(1)中筛选方法的效果,可以设置的对照组是_。(3)在微生物的培养过程中,实验室对培养基灭菌常用的方法是_。为防止冷凝水影响细菌的生长需将培养皿_培养。(4)根据培养皿上菌落的平均数,可以计算湖水中该种细菌的密度,但计算的数据要比实际活菌的数目少,原因是_。答案(1)盐(或NaCl)选择(2)未接种(或接种等量无菌水)的培养皿未加高浓度盐的培养基培养(3)高压蒸汽灭菌倒置(4)当两个或多个细胞连在一起时,在平板上观察到的是一个菌落4.(原创)酿酒、造醋是我国的传统技艺,为了探究与改进制造工艺,进行了相关研究。请回答有关问题:(1)目的菌株筛选后应该利用_培养基进行扩大培养,_是消除污染杂菌的通用方法。(2)制作葡萄酒过程中,为了使酵母菌迅速发生作用,可加少量_混匀。将葡萄浆放入发酵瓶,装量不超过_(A.1/2B.2/3C.3/4D.100%),当发酵瓶_表示发酵完毕。(3)醋的制作中发酵瓶中装锯末至_,将适量的醋化醋杆菌培养物加在酒水混合物中混匀,并调pH至_后,倒入发酵瓶。答案(1)液体单菌落的分离(2)蔗糖B停止出现气泡(3)八分满7.05.下图为葡萄酒生产工艺流程简图,请据图回答下面的问题:(1)流程中“方框”处的内容依次为_、_。(2)果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格,含有醋化醋杆菌,在酒精发酵旺盛时,醋化醋杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸?说明理由:_。(3)果酒制作离不开酵母菌,与醋化醋杆菌比,酵母菌在结构上的主要特点是_(A.有细胞壁B.有细胞膜C.有核糖体D.有成形的细胞核)。(4)若要提高果酒的产量,发酵过程中关键要控制好哪些条件?_(至少填写2项)。答案(1)冲洗灭菌(2)不能。因醋化醋杆菌是好氧型细菌,而果酒发酵时是无氧环境(3)D(4)适宜的温度、pH、通气量6.尿素是一种高浓度氮肥,长期施用没有不良影响,但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后,才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶,脲酶能催化尿素水解。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下:KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂糖1.4 g2.1 g0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g(1)根据培养基的成分判断,该同学_(填“能”或“不能”)分离出土壤中分解尿素的细菌,原因是_。(2)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用_法接种。(3)接种前要对培养基进行_处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在_条件下进行。(4)某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是_,应当怎样操作才可避免此种现象?_。答案(1)不能培养基中含蛋白胨,尿素不是唯一氮源(2)涂布分离(3)灭菌无菌(4)菌液浓度过高对菌液进行梯度稀释(加大稀释倍数)7.请回答下列与微生物培养、发酵过程相关的问题:(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中,配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用_方法灭菌,冷却后加入用G6玻璃砂漏斗过滤的尿素溶液。玻璃砂漏斗用后需用_浸泡,并抽滤去酸,再用_冲洗,干燥后保存。(2)在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中,可以用_(A.50%乙醇B.70%乙醇C.90%乙醇D.95%乙醇)鉴别果胶。果胶酶可以从黑曲霉或_中提取,配制这些微生物的培养基时需要将pH调至_。(3)在“用果汁制作果酒”实验中,为了增加果酒的含糖量,可以在发酵瓶中加入一定量的_。答案(1)高压蒸汽灭菌1 mol/L的HCl蒸馏水(2)D苹果青霉中性偏酸(3)蔗糖8.生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题:(1)培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用_法灭菌。检验大肠杆菌的含量时,通常用_将水样进行一系列的梯度稀释。(2)将稀释后的水样分别用玻璃刮刀_到LB固体培养基,_于恒温培养箱,在_ 条件下进行培养。用该方法统计样本菌落数时_(填“需要”或“不需要”)设置对照组。(3)下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是_。A.步骤倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置B.步骤接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液划线C.步骤多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落D.步骤恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数答案(1)高压蒸汽灭菌无菌水(2)涂布倒置37需要(3)C9.请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题:(1)果胶是细胞壁的重要组成成分,其化学本质是_(填写如下选项),它在细胞壁形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_在一起。A.蛋白质 B.脂质C.核酸 D.多糖(2)制取果汁时,先用果胶酶将果胶分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物质,再用_酶处理,可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时,果汁的出汁率、澄清度与酶的_高低成正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇,故可用乙醇对果胶粗提取物(经酶处理后的混合物)进行_处理,从而得到干制品。答案(1)D粘合(2)半乳糖醛酸果胶甲酯活性(3)脱水(沉淀)解析(1)果胶是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成的,其化学本质属于多糖。果胶起着将
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