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文档简介
1.2基因工程的基本操作程序题目1.2基因工程的基本操作程序课型新课第1课时学习目标1.简述基因工程的四个步骤。重点简述基因工程操作程序的四个步骤。学习过程学习内容 学生活动复习1.DNA重组技术需要那些工具?2.基因工程的载体具有那些特点?基础部分1、目的基因的获取:1。目的基因概念:_ 2。目的基因的举例:_ 3。目的基因的获取途径 (1)从基因文库中获取基因文库的概念:将含有某种生物不同_的许多_,导入_的群体中储存,各个_分别含有_,称为基因文库基因文库的类型:a.基因组文库:将某种生物体内的DNA_提取出来,选取用适当的_,将DNA切成一定范围大小的_,然后,将这些DNA片段分别与载体连接起来,导入_的群体中储存,每个受体菌都含有了一段不同的_。也就是说,这个群体包含了这种生物的_ b.部分基因文库:(如cDNA)用某种生物发育的某个时期的_反转录产生的多种_DNA片段,与载体连接后储存在一个_中,那么,这个受体菌群就叫做这种生物的cDNA文库d:两种基因文库的区别主要如下表所示:文库类型cDNA文库基因组文库文库大小基因中启动子(具有启动作用的DNA片段)基因中的内含子(位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段)基因多少物种间的基因交流从基因文库中获取目的基因的依据有:_、_、_、_、_(2)利用PCR技术扩增目的基因: 概念:PCR是一项_的核酸合成技术。阅读教材归纳原理:_条件:_过程:_、_、_(3)人工合成法:通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成,适用于_的基因反转录法:根据mRNA逆转录形成目的基因2、基因表达载体的构建工程的核心1。构建基因表达载体的目的 (1)_ (2)_ 2。基因表达载体的组成(1)_(2)_位置:位于_,是一段有特殊结构的DNA片段作用:是_识别和结合部位,有了它才能驱动基因_,最终获得需要的_(3)_ 位置:位于基因的末端,也是一段有特殊结构的DNA片段作用:_(4)_: 作用:用于鉴别_,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。如:_3。基因表达载体的构建有差别的原因: (1)受体细胞不同,有_、_、_之分(2)_阅读归纳提升部分1.为什么要构建基因文库?直接从含目的基因的生物体内提取不行吗?2.如果基因小,核苷酸序列已知,可以用什么方法来合成DNA呢?3.将生物的所有DNA直接导入受体细胞不是更简便吗?如果这么做,结果会怎样?拔高部分全品:当堂自测题板书设计1、目的基因的获取:方法:(1)从基因文库中获取(2)利用PCR技术扩增目的基因(3)人工合成法:2、基因表达载体的构建 目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传下一代 使目的基因能够表达和发挥作用 组成:启动子,终止子,标记基因,复制原点,目的基因课后反思题目1.2基因工程的基本操作程序课型新课第1课时学习目标1.简述基因工程的四个步骤。重点简述基因工程操作程序的四个步骤。学习过程学习内容 学生活动复习1.获取目的基因的方法有几种?2.构建基因表达载体的目的是什么?3.基因表达载体的组成有哪些?回答问题基础知识3、将目的基因导入受体细胞1。转化:_2。将目的基因导入植物细胞(1)受体细胞:_或_(2)导入方法:_法:农杆菌是一种在土壤中生活的 微生物,能在自然条件下感染_植物和_植物。当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的_,吸引_移向这些细胞,这时农杆菌的_上的T-DNA(可转移的DNA)可转移至受体细胞,并且_到受体细胞染色体的_上a.转化过程:_转化的实质:将目的基因整合到受体细胞的染色体基因组中b.适合于:_和_植物。约80%的转基因植物都是通过这种方法获得的 基因枪法:_中常用的一种基因转化方法,但是成本较高花粉管通道法:植物花粉在柱头上萌发后,花粉管要穿过花柱直通胚囊A过程:在植物受粉后,花粉形成的_还未愈合前,剪去柱头,然后,滴加_(含目的基因),使目的基因借助花粉管通道进入_B.我国的_就是用此种方法获得 3将目的基因导入动物细胞 (1)受体细胞:_ (2)导入方法:_ 基本操作程序:首先将含有_表达载体提纯,并使DNA浓度保持在1-3g/mL;然后,从雌性动物体内取出_(卵可以在体内受精,也可以在体外受精),采用_进行显微注射;再将注射了目的基因的_,经胚胎早期培养一段时间后,再移植到雌性动物的输卵管和子宫内,使其发育成有新性状的的动物实例:1982年,世界上第一例转基因“超级小鼠” 阅读教材完成导学案4、目的基因的检测与鉴定1.目的基因的检测与鉴定的意义:_2.目的基因检测:_水平(1) 检测(2) _ :检测方法:_(DNA分子与DNA分子杂交):检测过程:将转基因生物的基因组DNA提取出来,在含有目的基因的DNA提取出来,在含有_的DNA片段上用放射性同位素等作标记,以次作为_,使探针与基因组DNA杂交。:检测结果:如果显示出_,则表明目的基因已经插入染色体DNA中(2)检测_:检测方法:_(DNA分子与_杂交):检测过程:从转基因生物中提取_,同样用标记的目的基因作探针,与mRNA杂交:检测结果:_(3)检测_ :检测方法:分子杂交技术(抗体分子与_杂交):检测过程:_:检测结果:_3.目的基因的鉴定:_水平 (1)一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后,是否赋予了植物抗虫或抗病特性,需要做抗虫或抗病的_实验,以确定是否_(2)有的基因工程产品需要与天然产品的功能进行_比较,以确定_1、导入检测:DNA分子杂交技术,即使用放射性同位素或荧光分子标记的DNA作探针进行检测 2、表达检测:转录检测:分子杂交技术 翻译检测:抗原抗体特异性反应法 3、个体生物学水平鉴定:抗虫或抗病的接种实验
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