唾液酸酶快速检测BV.ppt

唾液酸酶快速检测BV,十堰市人民医院检验科 王娟,细菌性阴道病(bacterial vaginosis ,BV) 它是由多种病原菌，如葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、变形杆菌等导致阴道内微生态平衡失调的阴道炎性病变，是一类在细菌学上表现为生殖道正常菌群数量减少，代之以一组厌氧菌数量增加的临床综合征。其主要表现为异味白带增多，外阴有不适感等。,乳酸杆菌,链球菌,大肠杆菌,葡萄球菌,变形杆菌,变形杆菌,定义,病因研究史,早在上个世纪人们就已注意并开始治疗细菌性阴道病，但在相当长的时期里，人们对其产生的原因尚不清楚，因而被称为非特异性阴道炎。 1955年，Gardner和Dukes医生的研究把引起BV的原因归结为“阴道嗜血杆菌性阴道炎”，并指出，患有BV的妇女能够产生一种鳞状扁平上皮细胞线索细胞，医生可据此进行诊断。 1984年，在瑞典斯德哥尔摩有关本病的国际会议上正式命名为细菌性阴道病。其理由是因为该病系由多种病原体所致，尤其是阴道的炎症不明显，具有代表炎症反应的白细胞不多。,异常阴道分泌物者患病率44%,本病由于症状较轻而易被忽视，但能对母亲和胎儿及婴儿的健康引起严重后果，如：宫腔感染、盆腔感染及绒毛羊膜感染，产后感染，先兆流产，早产，胎膜早破，低体重儿等。国外研究证明细菌性阴道病与这些疾病有明显的相关关系。在计划生育手术方面也常因该病影响手术进行，是因症取环的重要原因。,主要危害,临床表现,实验室常用检测方法及其缺陷,阴道分泌物加德纳菌培养 培养检出病原体一般作为微生物感染性疾病的 “金标准”，但 由于BV 是因菌群失调引起的，加德纳菌在40%50 %的正常妇女中也可分离到，培养法在BV 检测中无效。所以目前认为该法不是BV 可靠的诊断方法。,实验室常用检测方法及其缺陷,常用金标准Amsel法 阴道分泌物乳液状； pH4.5； 阴道分泌物加10NaOH产生氨味( 烂鱼样腥臭味) ； 阴道分泌物涂片可见线索细胞(20) 此4项指标中具备3项即可判为 B V阳性，其中必须存在。如果阴性，但涂片革兰氏染色可见大量革兰氏阴性球杆菌，无或偶见乳酸菌亦可判为BV阳性。 存在的问题： 一些与感染无关的因素如近期性生活、阴道灌洗、行经或是存在大 量子宫颈液等同样可以导致阴道pH值升高，或使分泌物产生异味；pH值法敏感但不特异； 胺试验中对气味的鉴别因人而异；线索细胞的识别则受到显微设备的质量、样本的采集以及操作者的经验等影响，主观性强，因而很难对判定结果进行统计和比较。,实验室常用检测方法及其缺陷,改良多胺法 检测阴道内厌氧菌大量繁殖后产生的脱羧酶在分解氨基酸过程中产生的胺 ( 包括丁二胺、三甲胺) 存在的问题：作为单独的诊断方法，其特异性偏低。如非Bv患者因碱性精液干扰和感染滴虫阴道炎时亦可显示为阳性。,实验室常用检测方法及其缺陷,气液相色谱分析法 在正常妇女中，乳酸是主要的成分，仅有少量的丁二酸盐。但在BV妇女中，丁二酸盐和乳酸的比例可上升到 0. 4，用气液相色谱法分析阴道分泌物中不易挥发的丁二酸盐以诊断BV。 存在的问题：阳性预告值仅为48，需要使用实验室不常备的仪器，因此不适合广泛应用。,新一代检测方法唾液酸法简介,反应原理：正常阴道中有少量厌氧菌生长，厌氧菌与需氧菌的比例为1:21:5，患BV 时厌氧菌与需氧菌的比例为 200:11 000:1，而唾液酸酶的活性与厌氧菌的数量有关 ,正常人阴道中唾液酸酶活性极低 ,唾液酸酶法检测不到 ,因此唾液酸酶法测定时不变色 ,患BV 时唾液酸酶活性大大增加 ,甚至可达正常时的 40多倍，测定时变色。 可靠性验证：阴道分泌物中支原体、乳头瘤病毒、疱诊病毒、mV病毒、淋病奈瑟菌、梅毒螺旋