sjq6维生素C的测定.pptVIP

实验六、抗坏血酸含量的测定,维生素C(vitamin C)属于水溶性维生素，是人体营养必需的一种维生素，其生理作用广泛。它不仅作为重要的医药产品用于治疗多种疾病，也广泛用于食品、饲料及化妆品中。,维生素c又称L-抗坏血酸（L-ascorbic acid),在化学结构上和糖类十分相似，有4种光学异构体，其中以L-构型右旋体的生物活性最强。中国、美国、英国、日本药典收载都是L-抗坏血酸。中国药典收载有维生素C原料及其片剂、泡腾片、颗粒剂和注射液。 白色针状结晶 有酸味, 可溶于水,维生素C分子结构中有二烯醇结构，具有内酯环，且有2个手性碳原子（C4、C5), 这不仅使维生素C性质极为活泼，而且具旋光性，L ( + )-抗坏血酸的比旋光度为+20. 5+21.5 ,维生素C在水中易溶，水溶液呈酸性；在乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶。维生素C 分子结构中的二烯醇基，尤其是碳3位的OH由于受共轭效应的影响，酸性较强（pK1 =4. 17)；碳2位的OH的酸性极弱（Pk2 = ll. 57)，故维生素C 一般表现为一元酸，可与碳酸氢钠作用生成钠盐。维生素C分子中的二烯醇基具极强的还原性，易被氧化为二酮基而成为去氢抗坏血酸，加氢又可还原为抗坏血酸。在碱性溶液或强酸性溶液中能进一步水解为二酮古洛糖酸而失去活性，此反应为不可逆反应。,维生素C的含量测定多基于其具有较强的还原性，可被不同氧化剂定量氧化，容量法 (如碘量法、2，6-氯靛酚法等）因简便快速、结果准确，被各国药典所采用，为适用于复方制剂和体液中的微量维生素C的测定，又相继发展了比色法、紫外分光光度法和高效液相色谱法等。,维生素C的含量测定多基于其具有较强的还原性，可被不同氧化剂定量氧化，容量法(如碘量法、2，6-氯靛酚法等）因简便快速、结果准确，被各国药典所采用，为适用于复方制剂和体液中的微量维生素C的测定，又相继发展了比色法、紫外分光光度法和高效液相色谱法等。,碘量法测定维生素C的含量,1、原理,维生素C在乙酸的酸性条件下，可被碘定量氧化。根据消耗碘标准滴定溶液的体积，即可计算维生素C的含量。反应式如下:,2、仪器和试剂,(1)仪器 电子天平（0. lmg)。 (2)试剂 c（I2）=0.1000moL/L 碘标准滴定溶液配制与标定参见9. 2节。 1%淀粉指示剂 配制方法参见9.2节。 c(CH3COOH)=lmol/L乙酸溶液 取6mL冰醋酸，用水稀释定容至l00mL。,3、测定方法,称取试样0. 2g (称准至0.0001g)于500mL三角瓶中，加新煮沸过的冷水100mL与lmol/L乙酸溶液10mL使之溶解，加淀粉指示剂l.0mL，立即用碘标准滴定溶液滴定，至溶液显蓝色并在30s内不褪色。记录消耗c（I2）=0.1000mol/L的碘标准滴定溶液的体积。,4、计算,1.00mL c（1/2 I2）=0. 1000mol/L碘标准滴定溶液相当于8. 806mg的维生素,C(C6H806)。,2，6-氯靛酚滴定法测定维生素C的含量,1、原理,2，6-二氯靛酚（2，6-氯吲哚酚）为一染料，其氧化型在酸性溶液中显红色，在碱性溶 液中为蓝色。当与维生素C反应后，即转变为无色的酚亚胺（还原型）。因此，维生素C可在酸性溶液中用2，6-二氯靛酚标准溶液滴定，至溶液显玫瑰红色时，即为终点，无须另加指示剂。反应式如下,2、试剂,1%草酸溶液 称取10g草酸，加水溶解后，定容至1000mL。 c(1/6KI03)=0.001mol/L 碘酸钾标准滴定溶液 准确称取0.3567g基准碘酸钾溶于水，移人100mL容量瓶中，用水定容至刻度；从中取出1.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释刻度。,维生素C标准溶液 准确称取0.02g维生素C(称准至0.0001g)溶于1%草酸溶液中，并用1 %草酸溶液稀释定容至100mL。从中吸取5.00mL于50mL容量瓶中，加入1% 草酸溶液至刻度，此溶液每毫升含有0.02mg维生素C。,a.标定 吸取维生素C标准溶液5.00mL于100mL三角瓶中，加6%KI溶液0.5mL, 加1%淀粉3滴，用0.00lmol/L碘酸钾标准滴定溶液滴定到浅蓝色。 b.计算 抗坏血酸浓度(mg/mL)=V10.088/V2 式中 V1滴定时消耗0.001mol碘酸钾标准滴定溶液的体积,mL; V2滴定时吸取维生素C标准溶液的体积，mL; 0. 088与1.00mL碘酸钾标准滴定溶液C(1/6KI03)=0.001mol/L相当的维生素C 的质量，g., 0.02% 2，6-二氯靛酚溶液 准确称取2，6-二氯靛酚溶液0.05g (标准至0.0002g)，溶于200mL含有0.052g碳酸氢钠的热水中。冷却后，稀释定容至250mL。过滤，滤液接收于棕色瓶中，置于冰箱内保存，使用时每周标定一次s,a. 标定：吸取5.00mL已知浓度的维生素C标准溶液，加5.00mL 1 %草酸溶液，用 2,6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色，15s不褪色为终点。,b.计算 T=CV1/V2 式中：T滴定度（即每毫升2，6-二氯靛酚溶液相当于维生素C的质量）mg/mL； c维生素C标准溶液的实际浓度，mg/mL; V1维生素C标准溶液的体积，mL； V2滴定消耗2,6-二氯靛酚溶液的体积，mL。 1%淀粉指示剂。 1%KI溶液 称取6gKI，溶于l00mL水中。 偏磷酸-乙酸溶液 称取15g偏磷酸，加入40mL冰醋酸及250mL水，加热搅拌，使其溶解，冷却后加水至500mL，于4冰箱保存（710天)。,3、测定方法（维生素C注射液）,精密量取试样适量（约相当于维生素C 50mg,如有必要，先用水稀释）置lOOmL容量瓶中，加偏磷酸-乙酸溶液20mL，用水稀释至刻度，摇匀；精密吸取稀释液适量（约相当于维生素C 2mg)置50mL锥形瓶中，加偏磷酸-乙酸溶液5mL，用0. 02% 2，6-二氯靛酚溶液滴定，至溶液显玫瑰红色并持续5s不褪色。另取偏磷酸-乙酸溶液5.5mL，加水15mL，用 0.02% 2，6-二氯靛酚溶液滴定，做空白试验校正。,4、计算,维生素 C 含量（mg/100g）=（V1-V0） T m 100 式中 V1滴定试样时消耗的0.02% 2，6-二氯靛酚溶液的体积，mL； V0空白试验时消耗的0.03% 2，6-二氯靛酚溶液的体积，mL； m滴定时所取样液中含有样品的质量，g,5、讨论,本法并非维生素C的专一反应，其他还原性物质对测定也有干扰。但由于维生素C 的氧化速度远比干扰物质的快，故快速滴定可减少干扰物质的影响。 可用2，6-二氯靛酚进行剩余比色测定，即在加入维生素C后，在很短的时间间隔内， 测定剩