凝聚胺方法不规则抗体.ppt

凝聚胺方法不规则抗体 筛选实验的应用,佳木斯市妇幼保健院 【输血科】,开展不规则抗体筛选的预期目的:ABO以外的不规则 抗体是引起血型鉴定困难和交叉配血不合的主要原因,因此，对输血前患者进行不规则抗体筛查及鉴定是安全输血的重要保证,也是避免或减少医疗纠纷和事故发生的必要手段. 开展不规则抗体筛选的临床意义: 不规则抗体是指 抗-A、抗-B或抗-AB以外的其他抗体。目前不规则抗体的筛查方法是采用O型试剂红细胞检测被检者的血清中的不规则抗体。,预期目的和意义和实施方案,由于有临床意义的不规则抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生溶血性输血反应，轻则影响治疗效果，重则危机病人生命；此外，对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害，严重者则会危及新生儿的生命安全。因此，抗筛选是很必要而且必须的。其筛选的意义主要在于三个方面：,一、献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止含有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏而引起的溶血性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。 二、对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查，有利于血液的选择，从而有充分的时间来选择不含有针对某抗体的相应抗原的血液，从而防止因为输注含有某抗体相应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血安全。,三、孕妇进行不规则抗体筛查，可以尽早发现不规则抗体，可以在孕期进行新生儿溶血病的预防和治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤害，提高胎儿或新生儿的身体素质。 该项目的实施方案：1月3日起由科主任带领输血科全体成员对不规则抗体筛选(凝聚胺法)的一切知识要点及操作方法进行强化训练。自1月10日开始对不规则抗体筛选试验应用于有输血史、妊娠史的患者。然后通过对各种患者标本检测结果的分析对该项目的操作价值及可以为科室创造的效益进行评价。2月10日上报医务科，并通知临床实施该项目的注意事项。最终于2月15日将该项目应用于临床。,美国、日本、澳大利亚等国家均已将不规则抗体筛查列入常规检测，而我国卫生行政部门目前尚未要求对献血者进行抗体筛选，在临床也只有少数医院对患者进行抗体筛选。我国目前大多数临床医院输血科（或血库）的配血水平比较落后，一直沿用室温盐水方法配血，此方法只能检出不配合的IgM类抗体，不能检出不配合的IgG抗体，而ABO血型系统以外的其他血型系统的绝大多数,该项医疗技术的基本概况,国内外应用情况,抗体是IgG性质的抗体，因此，含有不规则抗体（抗- A、抗-B或抗-AB以外的其他抗体，如抗-D）的血液给病人输用后，此不规则抗体会引起急或迟发性输血反应，往往给病人生命带来危险。为提高血液质量，保证输血患者的输血安全，提高输血治疗效果，避免患者输用含有不规则抗体引起的输血反应，使我院输血事业与世界接轨，应该对献血者或输血者进行不规则抗体筛选。,不规则抗体筛选试验（凝聚胺法）是在凝聚胺试验法的辅助作用下让受检者血清与特殊试剂红细胞-筛选红细胞发生免疫反应，以发现在37下有活性抗体的试验方法。 抗体筛选试验（凝聚胺法）不一定能检验出所有有临床意义的抗体，一些低频率抗原产生的抗体或者剂量效应的抗体，可能被漏检，这时需选择抗原性更完全和特异性更敏感的筛选细胞做试验，或用更高敏感度的技术作检验。,技术路线 （包括总体安排和进度步骤及其可行性论证）,总体安排及进度步骤：1月3日起由科主任带领输血科全体成员对不规则抗体筛选(凝聚胺法)的一切知识要点及操作方法进行强化训练。自1月10日开始对不规则抗体筛选试验应用于有输血史、妊娠史的患者。然后通过对各种患者标本检测结果的分析对该项目的操作价值及可以为科室创造的效益进行评价。2月10日上报医务科，并通知临床实施该项目的注意事项。最终于2月15日将该项目应用于临床。,1.取试管3支，各加被检血清（或血浆）100ul，分别加入3-5%筛检红细胞各50ul。 2.各加LIM0.65ml，混匀后，再加入Polybrene溶液100ul，并混合均匀。 3.用输血科专用离心机3400rpm/min离心10秒，然后倒掉上清液，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。 4.轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。 5.最后加入Resuspending100ul，轻轻摇动试管混合并同时观察结果。如凝集散开，表示由Polybrene引起的非特异性凝集，抗体筛检结果为阴性。如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步做抗体鉴定。,疗效判定标准,不规则抗体筛选试验（凝聚胺法） 适应症： 第一类产前病人：测定非典型抗体以排除新生儿溶血病 发生的可能。 第二类输血前病人：确定供应相应抗原阴性血液，供血 者、受血者之间相容性评估。 第三类献血员：避免有阳性抗体阳性血，发现稀有血型 的献血者。 禁忌症：参照静脉采血禁忌症。,适应症 禁忌症 不良反应,质量控制措施：输血科室内质量控制 开展该项医疗技术具备的条件：（包括课题负责人的学术水平和学术地位、技术力量、现有仪器设备、实验动物、试剂及对本课题已做了哪些工作等） 人员配置：中级及以上职称1人，检验师1人，护师1人，检验士2人。 设备要求：常温冰箱2