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文档简介

重组人白细胞介素-2,Recombinant Human Interleukin-2,主要内容,一、基本信息 二、生产制备 三、药物信息 四、注意事项 五、发展前景,一、基本信息,为多肽类免疫增强剂，是一种淋巴因子。 刺激B细胞增殖分化和分泌抗体。 诱导干扰素和多种细胞因子的分泌 用于肿瘤辅助治疗和癌性胸、腹水的治疗。 也可各种自身免疫病的治疗。 对乙型肝炎、麻风病、肺结核、白色念珠菌感染等具有一定的治疗作用。,二、生产制备,生产制备的方式主要有两种： 1、传统工艺制备 2、基因工程制备 其中以第二种方法为主,传统工艺流程,鸡瘟病毒，PHA,培养液,启动诱生 37,人白细胞粉,诱生白细 胞培养液,灭活病毒，分离,HCl,NaOH,pH = 22.5,pH = 7.27.4,离心,上清液,35%硫酸铵,4 ，24h，离心,上清液,85%硫酸铵,4 ，24h，离心,沉淀,10mmol/LPBS透析,pH = 6.5，24h,透析内液,亲和层析 上Sepharose柱,pH = 6.5,亲和载体I,洗涤 0.4mol/LNaCl，PBS,pH = 6.5,亲和载体,吸收 1.0mol/LNaCl,PBS透析,pH = 6.5,IL-2组分,凝胶层析 上Utrogel柱,pH = 6.5,凝胶载体,0.2mol/Ltris-HCl含0.1%PEG 2%正丁醇，0.2mol/L甘氨酸,pH = 7.6,IL-2,基因工程制备流程,IL-2 cDNA 文库的构建,IL-2表达,利用mRNA杂交筛选,IL-2 cDNA克隆,与质粒载体pLY-4连接，并转入大肠杆菌,纯化的IL-2,制备包涵体，并用凝胶过滤层析纯化,cDNA文库的构建,IL-2mRNA,逆转录酶,逆转录成单链cDNA,末端脱氧核苷酸转移酶,cDNA末端连接dCMP残基，寡聚（dG）1218为引物,DNA聚合酶I,双链 cDNA,蔗糖密度梯度离心,cDNA片段,G-C加尾法,插入到pBR322质粒的PstI位点,重组质,粒转化大肠杆菌,得到IL-2 cDNA文库,三、药物信息,药典中有以下三种药物含有重组人白细胞素介素-2： 注射用重组人白细胞介素-2 重组人白细胞介素-2注射液 注射用重组人白细胞介素-2（ ）,注射用重组人白细胞介素-2,高效表达人白细胞介素-2的大肠杆菌，经过发酵、分离和高度纯化后获得的重组人白细胞介素-2冻干制成，含有适宜稳定剂，不含添加剂和抗生素。 外观为白色或者微黄色疏松体，加灭菌注射水后迅速溶解为澄明液体。,重组人白细胞介素-2注射液,高效表达人白细胞介素-2的大肠杆菌，经过发酵、分离
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