彩紫1号甘薯茎尖脱毒与组培快繁技术研究.pdf

2 0 1 1年第 3期 宁 舛 趁 9 彩紫 1 号甘薯茎尖脱毒与组培快繁技术研究 王 芳 ，沈岚 ，刘健 ，朱红芬 ，黄 坚 ，严成其 ，裘尧 军 ，皇 甫伟 国 f 宁波市农业科学研 究院3 1 5 0 4 0 ) 摘 要采用彩紫 1 号甘薯茎尖进行脱毒 和组 培快 繁试 验的结果显示 选用含 1 2个大小为 0 2 0 3 m m 叶原 基 的茎尖 。置 于 MS + 6 一 B A 1 0 mg L + N A A 0 1 m g L的培养基 上培养 5 0 d ，成 苗率 可达 4 0 ；试管苗经 指示 植物巴西 牵牛检测 出试管苗脱毒率为 6 5 ：脱毒苗茎段快繁 的最佳 配方 为 M S + 6 一 B A 0 2 m g L + N A A 0 2 mg L；同时 ，大 田种 植试验表 明茎尖脱毒苗 比正常薯块未脱毒苗增产 2 5 比带毒苗增产 6 2 2 。 关键 词彩紫 1 号甘薯 ；茎尖脱毒 ；组织培养 ；快繁 甘薯营养丰富产量高 。不但是我 国4大主要 粮食作物之一 。还是重要的饲料 和工业原料作物 。 目前全 国年种植 面积为 6 0 0多万 h m 2 年产鲜薯 1 亿多 t 。甘薯病毒病为甘薯种植 中的重要病害 ，是 造成减产的主要原 因之一 我国多数种植 区的田间 植 株病毒感染率 为 6 O 7 0 。有 的甚 至达 9 0 每年因病毒病导致甘薯减产幅度达 2 9 可见对 甘薯病毒病防治已经刻不容缓 。 多年来 国内有许多学者致力于甘薯抗病毒病 育种及植株脱毒技术的研究 寻求防治甘薯病毒病 的最佳 途径 。已针对甘薯病毒 的鉴定 、诊断 、分 离、提纯及防治开展了一系列工作 。但 目前 尚无对 病毒完全免疫的品种和彻底免疫的方法 也无特效 药剂 采用茎尖脱毒技术防治甘薯病毒病仍是最有 效的措施【 n 。茎尖脱毒是指利用 “ 组培育苗”技术 ， 将甘薯内的病毒清除出来 并培育 出无病毒 的甘薯 种苗 。恢复优 良种性 ，增强抗性 。提高产量和 品 质 ，延长种薯 的服务期 限圜 。本文研究了利用甘薯 茎尖分生组织获得脱毒苗的方法以及最适合脱毒苗 生长的培养基配方 为甘薯脱毒苗 的生产应用提供 了依据 1 材料 与方法 1 1 材料 本实验采用彩紫 1 号甘薯 品种 1 2方 法 1 2 1 材料采集与消毒 选取健康无病斑的薯块 洗净后用 3 0 mg k g赤 霉 素 ( G A )浸 种 3 0 ra i n ，埋于 消毒过 的泥炭 中 ， 放 人 2 5 c I = 培养 箱黑 暗 培养 催 芽 ：露芽 后 升温 至 3 0 c I = 培养 7 d ：剪取生长 旺盛 的茎尖 5 e m。切去 叶 片用 7 5 的乙醇浸泡 2 0 3 0 s ，再用无菌水冲洗 1 遍 然后用 0 1 的升汞消毒 6 m i n ，最后再用无菌 水 冲洗 4次备用嘲。 1 2 2 茎尖剥离与培养 在双 目解剖镜下 将 消毒后的茎尖置于载玻片 上 用解剖针轻轻剥开叶片 。并用解剖刀切去 ，仅 留 1 2个叶原基 的茎尖 大小为 0 2 0 3 mm t 4 1 。 将 留 下 的茎尖接种在含有不 同浓度萘 乙酸( N A A)和 6 苄氨基 嘌呤 ( 6 一 B A)的 MS培养基 中 ( 试验处 理见表 1 ) 。培养条件 ：温度 2 8 2 C，湿度 5 0 ， 光照强度 2 0 0 0 3 0 0 0 L x ，光照时间 1 2 1 6 h d 。 1 2 3 试管苗脱毒鉴定 用指示作物巴西牵牛进行试管苗脱毒鉴定 。 1 2 4 不 同培养基对茎尖成苗率的影响试验 设 1 3组含有不 同浓度 激素 N A A和 6 一 B A的 MS培养基 ( 详见表 1 ) 。每组培养基接种 3 0个茎 尖。培养 5 0 d后观察污染数、成苗数和成苗率 。 1 2 5 脱毒苗快速繁殖试验 以 MS为基 本培养基 添加 不 同浓度 的 N A A 和 6 一 B A ( 详见表 2 ) ，置 于温度 2 5 ，光 照强度 2 0 0 0 L x 光照时间 1 2 h d的环境中培养 。培养 3 0 d 后统计植株高度、叶片数、根数等生长情况。 1 2 6 脱毒苗大 田种植试验 基金项 目：国家农业综 合开发 土地治理 宁波市科技集 中项 目 ( 项 目编号 2 0 1 1 1 1 ) 。 1 0 宁 纬鼓 2 0 1 1 年 第 3 期 试验地翻耕后每 6 6 7 m 施复合肥 5 0 0 k g 、有机 肥 2 0 0 k g 、过磷 酸钙 6 0 0 k g ，四周 留保 护行 。脱 毒苗种植行株距为 3 0 c m 2 0 c m，每小区 2 O株苗 ， 各 小 区随机排 列 ，设3次重复 。于收获时测定产 量 。 2结果与分析 2 1 不同培养基对茎尖成苗率的影响 试验结果表明 ( 表 1 ) ：MS培养基 中添加不 同 浓度的激素 N A A和 6 一 B A均可诱导甘薯茎尖成苗 当 N A A浓度不变 6 一 B A浓度 与茎尖成苗率成正 比。由此可见 。6 一 B A是影响甘薯成苗 的一个重要 因子 。N A A是影响甘薯成苗的一个次要 因子 其 浓 度 以 0 1 0 2 mg L为最 适 表 1 彩紫 甘薯 茎尖分生组织在各种培养基中的成 苗率 2 - 2 指 示植 物病 毒检 测 结果 以巴西牵牛对试管苗用嫁接法进行病毒检测 脱毒率 达到了 6 5 。对 已经脱毒的苗进行快速繁 殖 ，并淘汰未脱毒的苗 。 2 3不同培养基对甘薯脱毒苗快速繁殖的影响 试验显示 ( 表 2 ) ，N A A能促进脱毒苗的生根 ， 但 随着 6 - B A浓度 的升高 N A A的生根作用被抑 制 ，当 6 一 B A浓度高于 0 5 m g L时 ，茎段 出现愈伤 组织化 ，且苗生长缓慢 ，颜色变浅。由此可见 ，低 浓度 的 NA A与低浓度的 6 - B A结合最适合甘薯组 培苗的快速繁殖。 表 2 不 同培养基对甘薯脱毒苗快速繁殖 的影 响 2 0 1 1 年第 3期 宁 科 控 宁波市近 3 O年来粳稻主栽品种及其特性演变分析 陆永法 章志远 z ( 1 宁波市农业科学研究院3 1 5 0 4 0 ；2 宁波市种子管理站3 1 5 0 1 2 ) 主栽 品种是指作物在某一地区的栽培或种植 中 占主导地位的品种。宁波地处宁绍平原 。为浙江省 传统的两大粳稻主产地之一 水稻生长季节常受 台 风、洪涝 、特殊高温和低温等 自然灾害的侵袭 ，为 此长期以来在晚粳稻主栽品种的选用上具有鲜明的 地域特点 ，即要求抗倒性强、后期耐寒性强等。本 文分析 了上世纪 8 0年代初以来 宁波地区粳稻 主栽 品种及其特性演变 以求总结出主栽品种特性演变 规律 ，为我市今后的粳稻育种工作提供思路 。 1 常规粳 稻主栽品种的演 变 从表 1可见 宁波市 1 9 8 3年 以来 主要应用 了 6个 主栽 品种 ，分别 为 秀水 4 8( 1 9 8 3 1 9 8 7年 ) 、 秀水 1 1( 1 9 8 8 1 9 9 2年 ) 、宁 6 7 ( 1 9 9 3 1 9 9 8年 ) 、 甬粳 1 8( 1 9 9 9 2 0 0 7年 ) 、嘉花 1号 ( 2 0 0 8 2 0 0 9 年)和宁 8 1( 2 0 1 0年) 。其中 2 0 0 0年以前推广 的 2 4脱毒苗的大田种植效果 对脱毒苗一代 、脱毒苗二代 、正常薯块未脱毒 苗和带毒苗进行 田间种植效果 比较结果显示 脱毒 试管苗可 比正 常薯块未脱毒苗增产 2 5 比带毒 苗增产 6 2 2 ，增产效果十分显著。 表 3彩紫甘薯脱毒苗对产量的影响 3 小 结 与 讨 论 利用甘薯茎尖分生组织可以获得脱毒苗 这为 甘薯病毒病 的防治展示了广阔的前景 。但不同激素 浓度 的培养基对茎尖 出苗率有很大 的影 响 其 中 6 一 B A是影响甘薯茎尖成苗的重要因子。出苗率随 着其浓度的升高而提高N A A是影响甘薯茎尖成 苗 的次要 因子 ，其浓度 在 0 1 0 2 m g L最为适 宜 ： 另外 ，在甘薯茎段快速繁殖过 程中 ，低浓度 的 6 一 B A和 N A A结合能促进腋芽的萌发 高浓度 的 6 一 B A会 使植株愈伤化严 重 且 N A A对植株 的生根 作用也会随着 6 一 B A浓度 的升高而受到抑制 ：大 田 种植试验还显示 彩紫 1 号甘薯的脱毒苗能 明显提 高甘薯的产量。脱毒试管苗 比正常薯块未脱毒苗增 产 2 5 ，比带毒苗增产 6 2 2 ，充分表明了脱毒苗 的复壮与增产作用。 参考文献 1 1 康明辉 ， 刘 德畅 ， 海燕 ， 等 甘薯脱 毒技术 的原理 及方法 J 种业导刊， 2 0 1 0