体外受精和早期胚胎培养1.ppt

3.2 体外受精和早期胚胎培养,一、学习目标： 1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。 3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 二、学习重点： 1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 三、学习难点： 1.卵母细胞的采集和培养。 2.精子的采集和获能。,知识链接,1.哺乳动物体内胚胎的形成需要经过哪些过程？,精子和卵子的发生受精胚胎的发育,2、早期胚胎发育分为几个阶段？ 3、受精作用发生的部位及卵母细胞处的时期？,1978年7月25日世界首例试管婴儿,思考：,试管婴儿的形成及发育需要完成哪些环节？,获得精子和卵子体外受精体外胚胎培养,试管动物技术,通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。,试管动物技术涉及了哪些 生物技术？,包括体外受精、早期胚胎体外培养和胚胎移植技术。,阅读课本 “从试管牛说起”,自学导引,思考： 1.传统的动物育种存在哪些遗憾？ 2.试管动物与之相比有哪些优点？,意义：可以通过试管动物技术大量繁殖良种家畜。,“试管牛” 生产的技术流程图,采集良种母牛的卵母细胞,采集良种公牛精子,体外受精胚胎培养,受体牛,良种犊牛,试管动物技术过程：,第一步：体外受精,第二步：胚胎的早期培养,第三步：胚胎移植,主要包括 、 和 等几个主要步骤 。,概念：采取雌性动物的卵母细胞和雄性动物的精子，使其在试管中受精。,一、体外受精,卵母细胞的采集,精子的获取,受精,1.卵母细胞的采集和培养,对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 实验动物小鼠、兔，及家畜猪、羊等卵母细胞的采集： 最常用的方法是给供体注射 ，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,促性腺激素,输卵管,大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集： 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也可以借助 、 或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。,卵巢,超声波(B超)探测仪,内窥镜,腹腔镜,培养至减数第二次分裂的中期才能与精子受精的能力。,B超引导法： 借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,2.精子的收集和获能,假阴道法,手握法,电刺激法,在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有 和 两种。 对于 、 和 的精子，一般采用培养法，精子在获能液中获能； 对于 、 等家畜的精子常用化学诱导法。精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导获能。,培养法,化学诱导法,啮齿动物,家兔,猪,牛,羊,3.受精,获能的精子和培养成熟（减中期）的卵子，一般情况下在 或 中完成受精过程。,获能溶液,专用受精溶液,二、早期胚胎的培养,概念：是应用人工创造条件，对获取的 进行体外培养。 培养液成分：水、无机盐、有机盐类、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等,早期胚胎,不同动物胚胎移植时间不同 马、牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段 小鼠、家兔：卵裂期或囊胚 阶段 试管婴儿：8-16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。,有性生殖 无性生殖,体外受精 胚胎移植,核移植技术、 胚胎移植,遵循,不遵循,知识巩固： 1、以下是师生共同制订并研究设计的“试管牛”工厂化生产的流程，其中正确的是（ ） 卵母细胞的采集和培养 精子的采集和获能 画出“试管牛”工厂化生产的技术流程图 受精 胚胎的早期培养 A、 B、 C、 D、 ,答案：B,2、体外受精常用的采卵方法有： 用促性腺素处理后，从输卵管冲取卵子 化学诱导法 电刺激法 从活体动物卵巢吸取卵母细胞 A、 B、 C、 D、,答案：D,3、如下图，所做的处理是_