各种疾病的免疫治疗.ppt

,肿瘤免疫学 Tumor Immunology,研究内容,肿瘤与宿主免疫系统的关系。 寻找、鉴定及分析肿瘤抗原是肿瘤免疫学研究的核心。,肿瘤免疫学历史,旧分子时代：20世纪50年代 新分子时代：20世纪90年代 免疫治疗时代：21世纪,一、肿瘤抗原 二、抗肿瘤免疫 三、肿瘤免疫逃逸 四、肿瘤免疫治疗,一 肿瘤抗原,肿瘤抗原检测方法,动物肿瘤移植排斥试验 - TSA 特异性单克隆抗体的应用 - TAA 肿瘤特异性 T 细胞系 - 黑色素瘤抗原,肿瘤抗原的种类,肿瘤相关性抗原（TAA, tumor-associated antigen ） 肿瘤特异性抗原（TSA or TSTA, tumor specific antigen, tumor-specific transplantation antigen）,Fetal antigen (胚胎抗原) Tissue-specific differntiation TAA（组织特异性分化 TAA） overexpressed protein TAA (高表达的肿瘤相关抗原）,肿瘤相关抗原的种类,胚胎抗原,癌胚抗原（CEA)：结肠癌 甲胎蛋白（AFP）：肝癌,组织特异性分化TAA,PSA (前列腺特异性抗原) ：前列癌 MelanA/MART-1 (黑色素细胞分化抗原） gp100 （黑色素瘤相关基因） Tyrosinase（酪氨酸酶）：黑色素瘤 Protease 3 （蛋白酶3）：慢性髓性白血病 GD2GD3(神经结苷脂）：,高表达的肿瘤相关抗原,HER-2/neu(表皮生长因子受体，ErbB-2）：高表达于乳腺癌、宫颈癌等腺癌。已进入临床研究。 MUC1 : 粘蛋白家族 CA125：高表达于卵巢癌。,研究肿瘤相关性抗原的意义,肿瘤诊断的辅助指标 导向治疗的靶点 肿瘤疫苗的研制,肿瘤特异性抗原的种类,恶性黑色素瘤基因（MAGE）编码的MZ2-E抗原 病毒编码的基因：HPV17 编码的E6/E7, EB编码的EBNA-1 p53 突变乳腺癌 ras 基因突变胰腺癌 融合蛋白bcr-abl 慢性髓性白血病,肿瘤特异性抗原的意义,肿瘤诊断和治疗的有效靶点。 但由于不同个体、不同组织上所发生的肿瘤彼此抗原性不同，互相没有交叉反应给肿瘤的免疫学诊断和治疗带来极大的困难。,二、 抗肿瘤免疫,机体免疫系统所有组分，特异的和非特异的, 体液和细胞免疫均影响肿瘤的发生发展，清除肿瘤主要依靠CTL。,Immune Response (IR),髓样前 体细胞,未成熟DC,血流,外周非淋巴组织,病原体或摄 取抗原后,外周淋巴组织,成熟DC,细胞介导的抗肿瘤免疫,细胞毒T淋巴细胞(CTL) NK细胞 巨噬细胞 LAK细胞 TIL细胞,体液介导的抗肿瘤免疫,淋巴细胞依赖性抗体(IgG) 补体依赖细胞毒抗体(IgM) 嗜细胞性抗体(IgG1,IgG2),三 肿瘤免疫逃逸,免疫耐受及免疫抑制 抗原调变 肿瘤细胞表面分子的改变 抗原加工途径改变 Fas 反击,免疫耐受,小剂量多次接触 肿瘤抗原与未成熟的淋巴细胞接触,Ts : Treg( CD4+CD25+), 分泌 IL-10, TGF- 肿瘤分泌抑制因子： TGF- 抑制 Th1 细胞活性。 IL-10 PGE,免疫抑制,抗原调变,由于对肿瘤抗原的免疫应答导致肿瘤对表面抗原的减少、减弱或丢失，使免疫系统不能识别。,肿瘤细胞表面分子的改变,MHCI B7 ICAM-1，LFA3。 LFA1-ICAM-1，CD2-LFA3。,抗原加工途径的改变,LMP 巨大多功能蛋白酶体 TAP 转运蛋白,肿瘤细胞抗原加工途径的改变,Fas 的反击,某些肿瘤细胞表达大量的FasL,通过Fas/FasL 系统诱导淋巴细胞凋亡。,逃脱免疫监视,缺乏新抗原,逃脱免疫监视,缺乏协同刺激分子,逃脱免疫监视,缺乏MHC I分子,逃脱免疫监视,肿瘤分泌 免疫抑制分子,近年的热点话题,肿瘤微环境,肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages, TAM) 调节性T细胞 (regulatory T cells,Treg) 髓系来源的抑制性细胞 (myeloid-derived suppressor cells, MDSC) Th17 DC，T，B，NK,TAM: 属于M2型，促进血管生成，侵袭和转移，监测预后。 巨噬细胞分型： M1 和 M2型 M1: IFN-诱导，分泌IL-1, IL-6, IL-12 or IL-23, TNF-.促炎、抗菌，抗肿瘤。 M2: IL-4, IL-10, IL-13 诱导,分泌 IL-10，ARG1，组 织修复，抑制炎症、促进肿瘤生长。,Treg：CD4+ CD25+ Foxp3+ 分泌免疫抑制因子IL-10, TGF-。TGF-抑制 抗肿瘤T细胞，促进Th17分化 Th17： 与自身免疫病有关，是促进肿瘤生长的细胞，分泌IL-17,IL-21,能调节 IL-23 分泌。IL-23 能促进肿瘤生长。,MDSC：GR1+CD11b+,表达多种促血管形成因子，表达高水平 ARG1、iNOS、ROS、IL-10，抑制T细胞、NK、巨噬细胞的抗肿瘤作用。,TGF- 抑制 Th 细胞活性。 Soluble Fas Ligand IDO: indolamine-2,3-dioxygenase 抑制 T 细胞活化。其抑制剂可恢复免疫 功能排除肿瘤。 IL-10, TGF-,肿瘤微环境,抑制性因子：,全身性的抑制,头颈癌、黑色素瘤患者外周血检测到 Regulatory T cell，Treg; 结肠癌、胰腺癌患者外周血粒细胞和Myeloid-derived supressor cells, MDSC 增加，二者均能抑制肿瘤特异性T细胞。,四 肿瘤免疫治疗,肿瘤疫苗：主动免疫疗法 抗体疗法：被动免疫疗法 过继细胞免疫疗法：被动免疫疗法 细胞因子疗法 基因疗法,肿瘤疫苗,肿瘤细胞型疫苗 树突状细胞（DC） 疫苗 蛋白或多肽疫苗 DNA 疫苗 独特型疫苗,是一种主动免疫治疗方法，主要用于 抗病毒性疾病及抗肿瘤治疗,肿瘤细胞型疫苗,病毒感染的肿瘤细胞裂解物 疫苗VOV：感染病毒的自体或异体 肿瘤细胞溶解后制成的疫苗 治疗恶性黑色素瘤，延长存活期。 这是最早的肿瘤细胞疫苗。,树突状细胞(DC)疫苗,分离：骨髓，外周血 体外培养扩增、成熟诱导：GM-CSF、IL-4、抗原负载 (全肿瘤细胞抗原、肿瘤抗原，独特型抗原） 成熟度的鉴定,DC的制备,30-50 ml 外周血 最终得到108 DC。 注射途径： 皮内、皮下、静脉注射。,蛋白/多肽疫苗,种类：纯化的天然TAA 人工合成 基因重组,DNA 疫苗,将编码某种抗原的核酸表达载体直接转染到体内，激发机体对外源蛋白的免疫应答,DNA疫苗的制备过程,省略了复杂的体外表达，蛋白纯化 等下游 处理过程，操作简便，造价 低廉。 保证了抗原物质的天然性和完整性。 能够诱导体液和细胞免疫应答。,DNA疫苗的优点,独特型疫苗,利用抗肿瘤的单抗免疫动物, 可制备出模拟肿瘤抗原的独特型,优点: 不包含实际抗原或抗原片断,生产方便. 避免癌基因污染. 使糖抗原变成蛋白抗原. 打破免疫耐受,独特型 (idiotype, Id)Ab1 抗独特型(anti-idiotype,AId) Ab2: Ab2和Ab2(抗原内影像) 独特型和抗独特型网络: 抗原刺激机体产生Ab1, Ab1在结合抗原的同时又以其独特型诱导Ab2(抗独特型)的产生, Ab2可抑制Ab1的产生, 但又刺激了Ab3的产生, 同时Ab2部分则诱导产生Ab1 . 这样就形成了一个独特型-抗独特型相互刺激又相互制约的调节网络,使抗体产生处于适度水平.,独特型网络,抗体疗法,基因工程抗体 免疫导向治疗,FDA 批准的抗体,用于治疗恶性肿瘤的基因工程抗体: Rituximab（Rituxan，利妥昔）美如华：针 对 CD20 抗原的嵌和抗体，治疗非荷杰金 B 淋巴瘤。 Trastuzumab，曲妥珠（Herceptin）：针对 人表皮生长因子受体人源化的 IgG1抗 体，治疗 HER2（+）乳腺癌。,人鼠嵌和抗体,人源化抗体,将人的Ig CDR区换成鼠的，免疫原性可基本消除。,抗体免疫导向治疗,利用抗肿瘤特异性抗体为载体将细胞毒物质带到病灶处，减低细胞毒性剂的全身性副作用，特异地杀伤肿瘤细胞。,抗体运载物质的种类,同位素 131I，125I, 90Y 化疗药物质 毒素 酶 生物反应剂,过继细胞免疫疗法,输注自体或异体特异性或非特 异性的肿瘤杀伤细胞而达到治 疗肿瘤的目的,过继免疫治疗所用的细胞,肿瘤特异性CTL 肿瘤浸润淋巴细胞TIL 淋巴因子激活的杀伤细胞 LAK,CTL,取自患者自身外周血淋巴细胞,肿瘤抗原，IL-2,体外扩增,特点：特异性高，杀伤性强 有效剂量10 10-11个CTL 从患者外周血中诱导出如此数量CTL相当困难 因此使用受到极大的限制。,TIL,来源：从患者肿瘤周围分离 适应症：手术后的患者 特点：活性优于LAK细胞应用范围小于LAK细胞。,LAK,来源：外周血，腹腔，引流胸导管引流 体外激活-培养扩增-体内回输,细胞因子疗法,干扰素类 白细胞介素 集落刺激因子 肿瘤坏死因子,干扰素,分类：IFN,IFN,IFN 抗肿瘤作用:抑制肿瘤细胞增殖,增强NK,M,CTL 活性 治疗: IFN治疗毛细胞白血病，慢性髓性白血病，多发性骨髓瘤，非何杰金氏淋巴瘤，恶性黑色素瘤及肾细胞癌。 是应用最早最多并且疗效最为肯定的细胞因子。,2. 白细胞介素 （IL）,概念 种类 IL-122,目前批准上市的只有IL-2和IL-11，其它正在进行I-III级临床. 应用：IL-2 抗肿瘤 （单独大剂量，局部注射，与LAK细胞合用，基因疗法。）,