《生化分析仪原理》PPT课件.ppt

,生化分析仪原理,临床生化自动分析仪分类,按运行速度： 1大型生化仪速度600 test / 小时以上 2中型生化仪速度300-600 test / 小时 3小型生化仪速度300 test /小时以下 按仪器结构： 1流动式自动生化分析仪 2离心式自动生化分析仪 3分立式自动生化分析仪,临床生化自动分析仪分类,按运行速度： 1大型生化仪速度600 test / 小时以上 2中型生化仪速度300-600 test / 小时 3小型生化仪速度300 test /小时以下 按仪器结构： 1流动式自动生化分析仪 2离心式自动生化分析仪 3分立式自动生化分析仪,自动分析仪的主要部件,加样系统 比色系统 分光系统 供排水系统 操作控制与数据处理系统,加样系统,试剂仓 样品转盘 样品取样单元 试剂取样单元 混合部件,比色系统,光源 比色杯 分立式比色转盘 离心式比色盘 流动池式 比色杯恒温 水浴、空气浴、恒温液循环间接加热 比色杯类型 硬质石英/玻璃、塑料，永久、半永久、一次性。,分光系统,干涉滤光片 光栅分光式 无相差蚀刻凹面光栅 后分光集束式光路系统,关于双波长检测的优点,通过计算两个波长之间的差值，可纠正样品中脂血、溶血和黄疸干扰的影响；也可补偿电压波动的影响，从而获得稳定的测定结果。,自动生化分析仪的工作程序,自动分析仪的基本分析方法,终点法 （1点）终点法和2点终点法 速率法 速率法和2点速率法（固定时间法）,终点法,被测物质（反应底物）在化学反应过程中完全被消耗或转换，即反应达到平衡（终点），通过测定产物（反应生成物）的多少来定量测定被测底物的含量。 终点法一般用来检测代谢物的浓度，通过测定标准液（校准液）的反应吸光度，建立一条浓度与吸光度变化的标准曲线。 通过检测标本的吸光度与标准液的吸光度进行比较，计算出该标本中待测物的浓度。,终点法,终点法 终点法可根据试剂原理不同设置为（一点）终点法和两 点终点法。 对于单一试剂，在加入标本后，反应即可进行，在反应达到终点后，读取反应点（吸光度），故一般选用一点终点法。 对于两种以上的试剂，加入第一试剂，主要起缓冲或者消除干扰等作用，此时可读取初始反应点，加入第二（或第三）试剂后，在反应达到终点后，读取结束反应点。此即两点终点法。 本质均为终点法。,终点法反应曲线举例（单试剂）,终点法反应曲线举例（双试剂）,终点法反应曲线举例（双试剂免疫比浊法）,速率法,速率法分为：连续监测速率法和两点速率法（固定时间法）。 连续监测速率法：在可见光区(GGT、ALP：405nm黄色)或紫外（HBDH 、LDH、ALT： 340nm）在一段时间内连续监测某一物质的生成 (或消耗的) 速率，计算待测物的活性，一般用于样本中酶活性的检测。 酶促反应，在一定条件和测定范围内，当Km底物浓度，符合零级速率法，底物消耗/生成的速率只与催化反应的酶的活性有关，为正比例关系，直线的斜率为定值（即K值或factor）,连续监测速率法的反应曲线,两点速率法,两点速率法适用于反应吸光度随时间的变化而变化，在一定时间内无到达终点的趋势，该反应的变化规律为在一定时间内反应的趋势为直线或接近于直线。 设定参数时选择在直线上的两个点作为检测点。,速率法的吸光度计算,速率法吸光度计算： 如读点为21-26 ; 用最小二乘法，得到测光点21-26间每分钟吸光度的变化量。 两点速率法吸光度计算: 如读点为21-26 ; T 为：(26-21) 点间隔的时间 (A26+A25)/2-(A21+A20)/2/T,定标方法,对于终点法和两点速率法，必须通过使用标准液，建立一条标准曲线。 速率法检测的酶类可以采用理论因数法（K因数或Factor法），不过目前，大多数实验室对酶类（速率法）测试亦采用标准液校正Factor的方式，以消除仪器和试剂的系统误差。,定标方法2点定标,两点定标：以水作为零点，标准液作为另一点，建立标准曲线。此方法适用于浓度随吸光度变化呈线性变化的试剂。曲线的方程为：Y=AX 对于一些特殊试剂如：K，Na，CL，因水中痕量离子浓度的存在或者线性范围限制，一般不以水作为零点，而采用定值的高、低两个标准液，建立标准曲线。曲线的方程为：Y=AX+B。,2点定标的标准曲线,定标方法多点定标,多点定标：采用两个以上的标准液来建立一条标准曲线。该曲线的特征一般为非线性，即吸光度与浓度的变化不是直线关系。计算方式在自动生化仪上可选择为：NONLINEAR或LOGIT-LOG法。 对于一些通过（胶乳增强）免疫比浊法测定的试剂，多为此方法。因为抗原抗体反应形成的浊度的线性范围较窄。,多点定标的标准曲线,自动生化分析仪的操作控制系统,仪器操作和控制软件的功能： （1）设置系统参数 （2）设置项目参数 （3）设置试剂参数 （4）设置校准品和质控品参数 （5）实施校准和质控测试 （6）进行样品测试 （7）结果查询 （8）反应全程监控 （9）执行维护,自动生化分析仪的上机参数,生化分析仪的参数就是仪器工作的指令，操作