大豆异黄酮糖苷酶的纯化及性质研究.pdf

! 卷 “ 期 !#$ 年 % 月 生物工程学报 !“#$%/3： !?，!#$) 1A B6C B=A A,6:6;/3 5- ;/ D6=E; F64 ;/ *=;1E=( *=;,6=( G01/E0/ H,E3=;1E F I1E= （*)!#%$#%） ) “I66/A:E31ED =,;6) /(： J$K“77KJ“!8J?#$； LK4=1(： M4N7!OA1E=)04 国家自然科学基金资助 （*)!#%$#%） 。 大豆异黄酮糖苷酶的纯化及性质研究 !“#$%$ +$; :%*6%$/+/#($ ?#+ A:). 菌株， 通过液体发酵的方法， 得到了一种高活性的大豆异黄酮糖基水解酶。该酶经硫酸铵分级沉 淀、 YL9LKI/(0,A/ （YLK8!） 离子交换层析纯化， 被纯化了 77 倍， 收率为 7#ZX； 经 GYGK聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶的分子量 为 8?CY； 该酶的最适反应温度为 8#； 最适 :V 为 8Z#； 温度低于 $#， :V 在 8Z# %Z# 范围内该酶较稳定， I! 、 I= ! 对该酶有 激活作用； 9D、 I,! 对该酶有抑制作用。当以染料木甙为底物时该酶的米氏常数 （4） 为 7Z? _ 7# !4(aW。等电聚焦电泳测 得其等电点为 ?Z!。 关键词大豆异黄酮糖基水解酶，纯化，性质 中图分类号bJ7“Z7文献标识码9文章编号7#K?#$7 （!#$） #“K#$?8K#“ 45.(#121;- 1AF(=2E/KD(,0A13=A/，B10 -36(-A1A D(-0A13/A，B=A 5;=1E3/ ,A1ED (1c,13 F/64/E;=;1E F64 ?#+ A:) . A;6=1E) / 1AF(=2E/KD(,0A13=A/ B=A :,61F1/3 77 F(3A B1; -1/(31ED 6=;/ F 7#ZX =F;/6 =44E1,4 A,(F=;/ :6/01:1;=;1E =E3 YL9LKI/(0,A/ （YLK8!） 1E /M0=ED/ 064=;D6=:-) GYGKd9SL 6/A,(;A AB/3 ;=; ;/ 4(/0,(=6 B/1D; 1A 8?CY) 9E3 ;/ :;14,4 ;/4:/6=;,6/，;/ :;14,4 :V，4=E3 :Q F ;/ /Ee-4/ =6/ 8#，8Z#，7Z? _ 7# !4(aW =E3 ?Z!， 6/A:/0;12/(-) / 1AF(=2E/KD(,0A13=A/ 1A =(A 6=;/6 A;=5(/ ,E3/6 $# =E3 1E :V 6=ED/ F64 8Z# ; %Z#Z / /Ee-4/ 0=E 5/ =0;12=;/3 5- I! =E3 I=! ，=E3 5/ 1E151;/3 5- 9D=E3 I,! ) 6-7 8)#+.A-5/=E 1AF(=2E/KD(,0A13=A/，:,61F10=;1E，:6:/6;1/A 近年来， 随着人们对大豆及其制品的营养作用 和保健功效研究的深入， 发现大豆除了含有丰富的 蛋白质和油脂外， 还含有许多有益的生物活性物质。 在这些生物活性物质中， 大豆异黄酮因具有明显的 生物学活性已越来越引起社会和学术界的普遍关 注。它与人类的健康密切相关， 具有许多生理功能， 如抗肿瘤作用、 对血管的防护作用、 抗氧化活性、 类 似女性雌激素作用及抗激素作用和预防骨质疏松症 等 7 “。迄今为止， 已知大豆中的异黄酮共有 7! 种 异构体， 分为游离型的甙元 （9D(-0E） 和结合型的糖 甙 （S(,0A13/A） 两类， 天然状态下大豆异黄酮主要以 糖甙形式存在， 占总量的 X% XJ， 甙元占总量 的 ! ? 8。近年来的研究结果表明， 天然甙类 的分子结构并不是活性的最佳状态， 大豆异黄酮的 生理活性主要是其甙元的活性， 大豆异黄酮甙须被 酶水解成甙元形式才能发挥药效， 因此获得高活性 的大豆异黄酮糖苷酶对开发富含大豆异黄酮甙元的 保健食品意义重大。但目前国内外高活性的水解大 豆异黄酮糖甙的酶还在研制阶段， 有关酶法转化大 豆异黄酮糖甙为大豆异黄酮甙元的系统研究也尚未 见报道。本文利用从酒曲中分离筛选到的 !“#$%$;?3.30 公司。 !“!“2:; B) C8;+6.,)6.=G=W= F 菌株， 通过液体发酵的 方法， 得到了一种高活性的大豆异黄酮糖基水解酶， 由于大豆异黄酮甙的主要成分为染料木甙， 因此本 文以染料木甙作为测定酶活的底物。经 G 6B ?QD6$A(6:$# 6# Q+5 123 O#“) 5,2)3$ ?（9/%$* (6$“6# !0 5 -6$3 A2)， 4222， #-（J） ： .L2H 3 .L2L H Q6+ ! （周玲） ， G+ !E （苏黎红） ， E6+ ! （侯金玲） ; O :$#$( B$#.$C./3 9/%$*$3/ +(“B“ :),*/# ,7 E$,*./0$#)?， 4224， $#： LW0 3 LW_ L MQ( *$/3*/， .WL.， -#!： ! -2 3 -H. 治禽流感的酶及其商品化前景 禽流感病毒主要在禽类之间流行传播， 易造成禽类大量死亡， 形成瘟疫。一般不在人类之间传染流行， 但也得高度警惕。 饲养者直接接触病禽已有发生感染的情况。该病毒一旦发生变异传染给人， 则会对人类构成生命威胁。这类非细胞形态致 病因子有随着不同因素的变化而发生变异的可能性。在现实生活中多加注意是可以避免的， 需防与治相结合。首先， 此病毒 要有适宜的受体才能生存繁衍 （复制） ， 并发挥作用。禽流感病毒通过某种载体物进入口中而感染肺部， 其下端细胞表面的糖 链正是它的侵染受体。有研究者通过实验证明， 可以利用酶把这种糖链切掉， 阻止该病毒进一步传染。美国一家 a$*“6 公司 余芒博士 （华裔） 研制出一种新酶叫流