课件：免疫球蛋白.ppt

,诊断学,第八章 临床临床常用免疫学检查 The eighth chapter Clinical Immunology Examination,第四篇 第八章 临床免疫学检查,尹卫东 河北北方学院,目 录,概述 第一节 免疫功能紊乱的检查 第二节 感染性疾病的免疫检查 第三节 超敏反应的免疫检查 第四节 自身免疫疾病的检查 第五节 免疫增殖及免疫缺陷病的免疫检查 第六节 肿瘤标志物的检查 第七节 移植免疫检查,第四篇 第八章 临床免疫学检查,概述,临床免疫学检查常用于免疫相关疾病（如感染性疾病、自身免疫性疾病、免疫缺陷病等多种疾病）的诊断、病情监测、疗效监测与发病机制研究。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,第一节 免疫功能紊乱的常规检查,标本采集与送检 早晨空腹用黄色不抗凝的生化真空采血管采集静脉血，分离血清。 在采血与送检中要注意：重度脂血、溶血、黄疸、微小凝块等对免疫球蛋白、补体测定产生的影响。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,一、免疫球蛋白测定 免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）分为5种，即IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。其中IgG含量最多，占血液Ig的70%80%， IgA占Ig的10%15%，居第二位。IgM占血清Ig的5%10%， IgD占Ig的1%以下，IgE仅占Ig的0.002%。 免疫球蛋白的检测方法主要有单向免疫扩散法、ELISA法和免疫透射（散射）比浊法及化学发光法。 【参考区间】 免疫比浊法 IgG 7.016.6g/L； IgA 0. 73.5g/L；IgM 0.52.6g/L ELISA法 IgE 0.10.9mg/L,第四篇 第八章 临床免疫学检查,【临床意义】 （一）免疫球蛋白增高 1. 单克隆性免疫球蛋白增高 见于免疫增殖性疾病，如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等。 2. 多克隆性免疫球蛋白增高 见于各种慢性感染、自身免疫病、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤及某些自身免疫性疾病 。 3. IgD升高 可见于甲状腺炎、流行性出血热等，妊娠末期、大量吸烟者中IgD也可出现生理性升高。 4. IgE增高 常见于变态反应、寄生虫感染等，亦可见于肝炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等。 （二）免疫球蛋白减低 见于各类先天性或获得性体液免疫缺陷病， 亦可见于长期使用免疫抑制剂的患者。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,二、补体测定 补体（Complement,C）是 由传统途径的9种成分C1C9、旁路途径的3种成分（B因子、D因子及P因子）及其衍生物组成。 补体系统活化后可促进机体的防御功能，有利于机体清除病原微生物。 病理情况下，补体参与破坏自身组织和自身细胞而造成免疫损伤。 补体活性与含量的检测对某些疾病的辅助诊断、鉴别诊断及发病机制的研究具有重要意义。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（一）总补体溶血活性测定 血清总补体活性亦称50总补体溶血活性（complement hemolysis 50%，CH50）。 【参考区间】 CH50为50100kU/L 【临床意义】 1. CH50活性增高：见于急性炎症、组织损伤和某些恶性肿瘤。 2. CH50活性降低：主要见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病活动期、感染性疾病、慢性肝病、肝硬化等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（二）补体C3含量测定 【参考区间】 0.81.5g/L 【临床意义】 1. C3增高：见于急性时相反应 。 2. C3降低 （1）补体合成原料不足 （2）补体合成能力降低 （3）补体消耗过多 （4）补体丢失太多 （5）先天性补体缺乏,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（三）补体C4含量测定 【参考区间】 0.200.60g/L 【临床意义】 1. C4增高：见于各种炎症 、组织损伤和各种传染病。 2. C4降低：见于自身免疫性肝炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、IgA型肾病、型糖尿病、胰腺癌、多发性硬化等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,第二节 感染性疾病的免疫检查,标本采集与送检 血清检测，一般适宜早晨空腹抽取样本，禁忌暴饮暴食后和剧烈运动后检测。收取到的标本要及时送去检测，避免被污染，造成假阳性。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（一）抗链球菌溶血素“O”测定 【参考区间】 胶乳法1：400； 免疫比浊法:0200IU/L 【临床意义】 ASO滴度增高 常见于急性上呼吸道感染、皮肤及软组织化脓性感染、活动性风湿热、风湿性心肌炎、风湿性关节炎和急性肾小球肾炎等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（二）伤寒和副伤寒沙门菌免疫测定 临床上可通过肥达反应（Widal reaction，WR）、伤寒和副伤寒沙门菌抗原及IgM抗体进行测定。 【参考区间】 肥达反应直接凝集法 伤寒H1:160； O1:80，副伤寒甲、乙、丙均1:80。 伤寒和副伤寒沙门菌抗原胶乳凝集法 阴性。 伤寒和副伤寒沙门菌IgM抗体ELISA法 阴性或滴度1:20。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,【临床意义】 1. 单份血清抗体效价“O”1:80及“H”1:160则有诊断意义，如动态观察WR持续超过参考值或较原效价升高4倍以上更有价值. 2. WR结果分析的临床意义： （1）O正常，H升高：不久前曾患过伤寒或伤寒疫苗接种后，或非特异性回忆反应。 （2）O升高，H正常：伤寒发病早期或其他沙门菌感染的交叉反应。 （3）O升高，H升高：提示伤寒可能性大，并且多数患者在感染后第2周出现阳性。 （4）O升高，A、B、C任何一项升高：可能分别为副伤寒甲、乙、丙。 3. 早期应用抗生素及免疫抑制剂治疗者可呈假阴性，此外检测伤寒和副伤寒沙门菌抗原或IgM抗体的诊断价值更大。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（三）结核分枝杆菌抗体和DNA测定 【参考区间】 胶体金或ELISA检测抗体为阴性；PCR法检测DNA为阴性。 【临床意义】 1. 结核抗体是检查结核的一项重要辅助指标。 2. 胸膜结核、腹腔结核的体腔液、结核性脑膜炎的脑脊髓液中结核抗体测定，比血清更加敏感。 3. PCR法检测DNA特异性更强，敏感性更高，但应防止标本污染出现假阳性。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（四）幽门螺杆菌抗体测定 【参考区间】 胶体金标记免疫斑点法 阴性 【临床意义】 幽门螺杆菌抗体阳性常见于胃、十二指肠幽门螺杆菌感染，如慢性胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡等，其敏感性大于90%，特异性约85%。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（五）C-反应蛋白测定 【参考区间】 免疫比浊法 8.2mg/L 【临床意义】 1组织损伤，如急性心肌梗死、严重创伤、大手术、烧伤等。 2CRP可作为细菌性感染和病毒性感染的鉴别诊断指标。 3用于SLE、类风湿性关节炎、风湿热等自身免疫性疾病是否活动期的观察指标。 4恶性肿瘤、器官移植后急性排斥反应，以及妊娠都可见CRP明显升高。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,第三节 超敏反应性疾病的免疫检查,（一）特异性IgE测定 【参考区间】 Pharmacia Uni CAP 0.35IU/ml 【临床意义】 特异性IgE增高 常见于异位性皮炎、过敏性哮喘、过敏性鼻炎、过敏性支气管肺曲菌病、间质性肺炎、荨麻疹、疱疹样皮炎等的诊断与鉴别诊断具有重要意义。 （二）抗人球蛋白试验见第四篇第二章第二节。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,第四节 自身免疫性疾病的检查,绝大多数自身免疫性疾病患者血清中都存在针对自身组织器官、细胞和细胞内成分的抗体，称为自身抗体， 通过对自身抗体的检测对自身免疫性疾病的诊断、判断疾病的活动和疗效评价具有重要意义。 标本采集与送检 早晨空腹抽取静脉血样本，避免溶血，分离血清。血清标本要及时送检，避免被污染。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（一）抗核抗体测定 抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）狭义的是针对真核细胞核成分为靶抗原的自身抗体的总称，广义的靶抗原是整个细胞成分，包括细胞核与细胞质。 间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence IIF）检测ANA有四种荧光图谱，分别为均质型、核膜型、颗粒型和核仁型。 【参考区间】 IIF法阴性，血清滴度140为阳性。 【临床意义】 1ANA是自身免疫性疾病的筛选试验。 2服用抗心律失常药物可出现假阳性。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（二）抗脱氧核糖核酸抗体测定 抗脱氧核糖核酸抗体（anti DNA antibody）主有抗双链DNA（double stranded DNA，ds-DNA）抗体和抗单链DNA (single stranded DNA，ss-DNA) 抗体二种。 【参考区间】 阴性 【临床意义】 1抗ds-DNA抗体阳性 可用于区分SLE和其他自身免疫性疾病。 2抗ss-DNA抗体阳性 见于多种自身免疫性疾病，特异性较差。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（三）抗可提取性核抗原多肽抗体谱测定 【参考区间】 免疫印迹法 阴性 【临床意义】 1抗RNP抗体：RNP即核糖核蛋白（ribonucleoprotein,RNP）。抗RNP抗体主要与混合性结缔组织病相关，也是该病的诊断指标之一。 2抗Sm抗体：抗Sm抗体是SLE的特异性标志之一 。 3抗SS-A和抗SS-B抗体： 抗SS-A和抗SS-B是干燥综合征诊断标准中特有的两项自身抗体指标。抗SS-A对干燥综合征诊断敏感性高，而抗SS-B对干燥综合征的特异性高。 4其他：抗Scl-70抗体是系统性硬化症的标记抗体。抗JO-1抗体为多发性肌炎及皮肌炎的标记抗体 。抗组蛋白抗体可见于5070的SLE及95%以上的药物诱导性狼疮。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（四）类风湿因子测定 【参考区间】 阴性 【临床意义】 1RF检测主要用于类风湿性关节炎的辅助诊断。 2本试验对类风湿性关节炎特异性不高，其它的自身免疫性疾病， 亦可阳性。 3在某些感染性疾病 可有不同程度的阳性率。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（五）抗线粒体抗体测定 【参考区间】 免疫荧光法 阴性（或效价在1:10以下）。 【临床意义】 1. 许多肝脏疾病可检出AMA。 2. AMA为原发性胆汁性肝硬化的一项诊断指。 3. 胆总管阻塞性肝硬化和肝外胆管阻塞时均为阴性。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（六）抗甲状腺球蛋白及微粒体抗体测定 【参考区间】 免疫荧光法 阴性 【临床意义】 1抗TG抗体阳性 见于桥本甲状腺炎、甲状腺功能亢进和甲状腺癌。 2抗TM阳性 见于桥本甲状腺炎、甲状腺功能亢进、原发性甲状腺功能低下，二者联合检查，可提高阳性检出率。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（七）抗乙酰胆碱受体抗体测定 【参考区间】 ELISA法 正常人多为阴性 【临床意义】 抗乙酰胆碱受体抗体的测定对重症肌无力具有诊断意义，敏感性和特异性均较高，同时还可监测重症肌无力的疗效。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（八）抗平滑肌抗体 【参考区间】 间接荧光抗体法：阴性。 【临床意义】 抗平滑肌抗体主要见于自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、急性病毒性肝炎。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（九）循环免疫复合物测定 【参考区间】 阴性 【临床意义】 1. CIC阳性常见于某些自身免疫性疾病 。 2. CIC阳性也可见于链球菌感染后肾小球肾炎、膜增殖性肾炎、恶性肿瘤、血清病等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（十）自身抗体选择和应用 1在临床诊断中不能把单一项目的结果绝对化，而要结合临床表现及有关检查结果，并根据疾病的诊断标准综合分析。 2对怀疑患有器官特异性自身免疫性疾病者，应同时选用抗核抗体和器官特异性自身抗体检测。 3对自身抗体阳性标本，可继续做效价或定量检测，有利于对疾病病程和疗效观察。 4正常人血清也可出现自身抗体，并随年龄增大而阳性率增高，但抗体的效价和亲和力均较低。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,第五节 免疫增殖及免疫缺陷疾病的免疫检查,标本采集与送检 早晨空腹抽取静脉血样本，避免溶血，分离血清。血清标本要及时送检，避免被污染。要注意饮食、运动和药物量等因素的影响。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（一）血清M蛋白测定 【参考区间】 蛋白电泳法、免疫电泳法 阴性 【临床意义】 M蛋白增高见于: 1多发性骨髓瘤（包括轻链病） 。 2巨球蛋白血症（又称Waldenstrm病） 。 3其他：如恶性淋巴瘤、重链病等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（二）人获得性免疫缺陷病毒抗体及RNA测定 【参考区间】 筛查试验和确认试验均阴性，RT-PCR检查HIV-RNA为阴性。 【临床意义】 1. HIV抗体筛查试验敏感性高，易出现假阳性，因此，必须做确认试验，只有确认试验阳性才能确定为HIV感染。 2. HIV核酸定性检测可用于HIV感染的辅助诊断 。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（三）T细胞测定 1. T细胞花结形成试验 【参考区间】 ERFT （64.46.7）% 【临床意义】 （1）降低：主要见于免疫缺陷性疾病 。 （2）升高：见于甲状腺功能亢进、甲状腺炎、重症肌无力、慢性活动性肝炎、SLE活动期和移植排斥反应等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,2. T细胞分化抗原测定 【参考区间】 流式细胞术 CD3+ 6185；CD4+ 2858；CD8+ 1948；CD4+CD8+ 0.92.0/1。 【临床意义】 （1）CD3+降低 见于自身免疫性疾病 。 （2）CD3+/CD4+降低 见于遗传性免疫缺限症、AIDS、恶性肿瘤及应有免疫抑制剂者。 （3）CD4+CD8+增高 见于自身免疫性疾病、变态反应、器官移植后排斥反应等 。 （4）CD4+CD8+降低 见于AIDS、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,3. B细胞分化抗原测定 【参考区间】 流式细胞术 CD19+（11.743.73） 【临床意义】 （1）升高 见于急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病和Burkitt淋巴瘤等。 （2）降低 见于无丙种球蛋白血症、使用化疗或免疫抑制剂后。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,4. 自然杀伤细胞活性测定 【参考区间】 51Cr释放法：自然杀伤率为47.6%76.8%；流式细胞术法：113.85.9。 【临床意义】 1. 自然杀伤细胞活性测定活性降低 见于血液系统肿瘤、实体瘤、免疫缺陷病，艾滋病和免疫抑制剂使用者等。 2.自然杀伤细胞活性升高 见于宿主抗移植物反应，病毒感染早期，以及使用干扰素等免疫增强剂的患者。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,小结,1. 各种病原体感染后，刺激机体免疫系统产生相应的抗体或释放某些抗原成分，利用免疫学检测手段进行检测，对感染性疾病的诊断具有重要意义。 2. 多数自身免疫性疾病血清中存在自身抗体，对自身抗体的检测对自身免疫性疾病的诊断、疗效及预后判断意义重大。 3. 特异性IgE测定有助于型超敏反应性疾病的诊断，抗人球蛋白试验是自身免疫性溶血性贫血的重要辅助指标。 4. 免疫球蛋白测定有助于诊断体液免疫缺限病、免疫增殖病。 5. 补体测定有助于诊断补体缺限，免疫细胞的鉴定、计数及功能试验有助于诊断免疫细胞缺限。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,第六节 肿瘤标志物检查,肿瘤标志物（tumor marker,TM） 检测在肿瘤普查、辅助诊断、疗 效观察和预后判断中有重要意义。 标本采集与送检 血液标本采集后应及时离心，分离血清，避免溶 血，保存于4冰箱中。如果在23个月内测定，则应于-20保存。酶 类和激素类肿瘤标志物不稳定，易溶解，应及时送检测定或低温保存。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（一）甲胎蛋白测定 【参考区间】 RIA、ELISA法 25g/L 【临床意义】 1AFP主要用于原发性肝癌的辅助诊断，是原发性肝癌最特异的肿瘤标志物。 2生殖腺胚胎癌（睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤）、胃癌、胰腺癌等患者血清AFP含量可以升高。 3某些非恶性肝脏病变 ，AFP水平亦可不同程度升高 。 4孕妇血清中AFP异常增高，应考虑有胎儿神经管缺陷、双胎及先兆流产的可能性。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（二）癌胚抗原测定 【参考区间】 RIA、ELISA法 5g/L 【临床意义】 1 结肠癌和直肠癌患者血清CEA测定的敏感性高于其他肿瘤标志物，常作为首选指标。 2动态观察血清CEA，用于恶性肿瘤术后治疗监测和预后判断。 3结肠炎、直肠息肉、胰腺炎、肝硬化、肝炎、肺气肿、支气管哮喘、良性乳腺疾病等也可CEA轻度升高 。 4少数吸烟者可见血清CEA轻度升高。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（三）前列腺特异抗原测定 【参考区间】 RIA、ELISA法 T-PSA0.25 【临床意义】 1前列腺癌 患者血清PSA明显升高。 2良性前列腺瘤、前列腺增生和前列腺炎也会引起PSA的轻度升高 。 3前列腺按摩、前列腺穿刺、导尿和直肠镜检查后，血清 PSA可升高 。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（四）前列腺酸性磷酸酶测定 【参考区间】 RIA法 2.0g/L 【临床意义】 1前列腺癌时，血清PAP浓度明显升高，升高程度与肿瘤发展基本平行。PAP对诊断前列腺癌的特异性高于PSA，但敏感性较PSA低。 2前列腺增生、前列腺炎和泌尿生殖系统疾病等也可见血清PAP的升高。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（五）组织多肽抗原测定 【参考区间】 ELISA法 130U/L 【临床意义】 1血清TPA水平 升高，主要见于膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌和消化道恶性肿瘤。 2血清TPA和CEA联合检测有助于恶性与非恶性乳腺肿瘤的鉴别诊断 。 3急性肝炎、胰腺炎、肺炎、妊娠3个月后血清TPA水平均可见升高。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（六）-L-岩藻糖苷酶测定 【参考区间】 ELISA法、连续监测法 234414mol/L 【临床意义】 1AFU 是原发性肝癌新的诊断标志物，与AFP联合检测可提高原发性肝癌诊断阳性率。 2血清AFU升高可见于某些转移性肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌或子宫癌等 。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（七）鳞状上皮细胞癌抗原测定 【参考区间】 RIA、ELISA法 1.5g/L 【临床意义】 1SCCA是较好的鳞癌肿瘤标志物，其浓度随病情的加重而升高。 2SCCA升高还可见于肝炎、肝硬化、胰腺炎、特异性皮炎等皮肤病、上呼吸道感染性疾病等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（八）神经元特异性烯醇化酶测定 【参考区间】 RIA、ELISA法 15g/L 【临床意义】 1 NSE可作为小细胞肺癌高灵敏性、高特异性的肿瘤标志物。 2NSE作为神经母细胞瘤的标志物，其敏感性达90%以上，对该病的早期诊断具有较高的临床价值。 。 3红细胞中存在NSE，样本溶血可使血清NSE浓度升高。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,（九）糖脂类肿瘤标志物测定 1. 癌抗原15-3测定 【参考区间】 RIA、ELISA法 2.5万U/L 【临床意义】 （1）CA15-3主要用于乳腺癌的辅助诊断和疗效观察，也是监测乳腺癌患者术后复发的最佳指标。 （2）CA15-3升高还可见于肺癌、肾癌、结肠癌、直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、原发性肝癌等。 （3）肝脏、肺、乳腺等非恶性肿瘤性疾病，也可见CA15-3升高。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,2. 糖链抗原19-9测定 【参考区间】 CLIA、RIA、ELISA法 3.7万U/L 【临床意义】 （1）血清CA19-9对诊断胰腺癌有较高的敏感性和特异性，是胰腺癌首选的肿瘤标志物 。 （2）血清CA19-9升高还可见于结肠癌、原发性肝癌、胃癌、直肠癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌等。 （3）急性胰腺炎、胆汁淤积型胆管炎、胆囊炎、胆石症、急性肝炎、肝硬化等，血清CA19-9水平也有不同程度升高。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,3. 癌抗原125测定 【参考区间】 RIA、ELISA法 3.5万U/L 【临床意义】 （1）血清CA125检查主要用于早期辅助诊断卵巢癌，也是卵巢癌疗效观察及判断复发转移的指标。 （2） CA125也可见于子宫内膜癌、宫颈癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌和肺癌等。 （3）非恶性肿瘤 也有不同程度升高，但多数不超过10万U/L。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,4. 糖链抗原72-4测定 【参考区间】 RIA、ELISA法 4 000U/L 【临床意义】 （1）CA72-4对胃癌的检测特异性明显优于CA19-9和CEA。CA72-4如与CA19-9或CEA联合检测，可提高胃癌检出率。 （2）卵巢癌时CA72-4含量也明显增加。CA72-4与CA125联合检测可提高卵巢癌的检出率 。 （3）CA72-4升高还可见于结肠癌、胰腺癌、乳腺癌等。,第四篇 第八章 临床免疫学检查,5. 癌抗原242测定 【参考区间】 ELISA法 2.0 万U/L 【临床意义】 （1） CA242增高见于 胰腺癌、 结肠癌、 胃癌， （2） CA242增高也见于卵巢癌、子宫癌和肺癌等。 （3）良