课件：爱必维产品知识so标准操作方法.ppt

,需氧菌阴道炎/细菌性阴道病五项联合测定技术 简介、sop操作与注意事项 中国科学院生物物理研究所,一、技术简介 1、技术名称 2、科技技术 3、技术特点 4、技术原理 5、技术配置组成 二、适宜人群 三、使用注意事项 四、 样品采集和处理 五、 操作步骤 六、检验结果的解释 七、产品技术参数,一、技术简介,1、技术名称 名 称：需氧菌阴道炎/细菌性阴道病五项联合测定试剂盒 商品名：爱必维 简 称：ABV,构架完善的阴道菌群结构分析,白带常规检测 分泌物的清洁度、滴虫、假丝酵母菌,爱必维检测 阴道微生态、BV、AV、炎症,爱必维（ABV） “爱必维”是全国领先、独家的阴道微生态检测项目，够检测出目前国内、外的体外诊断技术无法检测的需氧菌阴道炎和各种混合型阴道炎。有效提高妇科感染诊断率，将给现有的阴道炎的诊断带来革命性的进步。,国内外最新研究发现GTI不仅仅是TV、VVC、BV，且常常不是单一感染 包含需氧菌AV、厌氧菌BV、真菌VVC、滴虫TV、胞溶性CV等， 且混合感染高达50%！ Sebastian Faro ,阴道炎的鉴别诊断和管理 “爱必维”（ABV），不仅明显提高医生对目前临床上较难诊断的混合性阴道感染的诊断率，同时能了解病患阴道内乳酸杆菌的生态状况，分析阴道微生态是否正常，为临床重建阴道微生态平衡提供实验室指标。 “爱必维”（ABV），与临床白带常规检查联合使用，构建和完善女性阴道分泌物检测系统。不仅在全国多个省市的三甲医院及妇产医院广泛应用，同时多次在全国性的妇产科学术会上得到介绍和推荐。,2、科技技术 1、“爱必维”是国家“十一五科技支撑计划” “农村与城市社区适宜技术的研究”转化 成果。 2、国家科技型中小企业技术创新基金项目。 3、“爱必维” ABV五联检测试剂盒及其制备 方法已获得国家发明专利。ABV五联检测中 的-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶测定为国家 发明专利。 4、11.5攻关成果：卫生部、科技部、计生委、 中医药管理局联合推广项目。,3、技术特点 “爱必维”五联酶谱分析一次呈现：,检测项目包括五联酶谱分析： 1)过氧化氢 反映正常阴道菌群生态状况 2)唾液酸苷酶 反映BV致病菌进居状态 3)白细胞酯酶 反映阴道炎症的状况 4) -葡萄糖醛酸苷酶 反映AV致病菌进居状态 5)凝固酶 反映AV致病菌进居状态 五项指标同时进行测定联合白带常规检查，可构建新型阴道疾病评价系统。 全国妇产科感染协作组推荐诊断方案- 形态学（白带常规）+功能学检查（爱必维） “爱必维”五联酶谱分析一次呈现，不仅快速筛查、诊断需氧菌阴道炎、细 菌性阴道病、混合感染和其它阴道疾病，也可从女性阴道微生态、清洁度角度 评价阴道炎是否治愈，提高合理用药的程度，降低复发率。,临床意义,分析组合-形态学/功能学检查,形态学分析可发现所有致病微生物,功能学分析可鉴定这些微生物是?,唯一全面、系统、规范、准确、标准,全国妇产科感染协作组推荐诊断方案,+,=,微生态 病原体,4、技术原理 本品检测包括五项指标。 过氧化氢H2O2 阴道乳酸杆菌的标志物 唾液酸苷酶 加德纳菌、游动弯曲杆菌等BV致病菌的标志物 白细胞酯酶 炎性细胞的标志物 -葡萄糖醛酸苷酶大肠埃希菌、B族链球菌等AV致病菌的标志物 凝固酶 金黄色葡萄球菌、粪肠球菌和大肠埃希菌等 AV致病菌的标志物,5、技术配置组成 AV/BV Set反应装置（含保护贴条和包装袋）：由塑料基板和反应垫组成，塑料基板上设有过氧化氢孔、唾液酸苷酶孔、白细胞酯酶孔、-葡萄糖醛酸苷酶孔和凝固酶孔，规格为20人份/盒。 配 置 反应装置20人份/盒 稀释液 1瓶， 8ml/瓶 显色液A 1瓶， 1ml/瓶 显色液B 1瓶， 1ml/瓶 无菌棉签 20支（物理消毒） 软塑料试管 20个 使用说明书 1份 套孔比色板 1份,二、适宜人群 什么情况下该做此项检查？,1、有阴道感染症状的患者 所有的阴道感染都伴有不同程度的阴道微生态破坏，在治疗中使用抗生素、消炎药和阴道冲洗等都可加重微生态失衡，而阴道炎的程度与阴道微生态破坏的程度密切相关，因此，阴道微生态状况与阴道炎的治疗方案和疗程、疗效有密切关系， 在阴道分泌物常规检查中增加爱必维检查，有利于选择适宜的治疗方案，缩短疗程、提高阴道炎的疗效。,2、经常规治疗方案治疗后的各类阴道炎患者 在我国，目前判断阴道炎是否治愈主要根据三项指标，即：症状消失、体征消失、病原体消失，在基层则主要是根据症状和体征是否消失作为阴道炎是否治愈的指标。 如果阴道微生态没有恢复正常，即使上述三项指标都已恢复正常的病例在半年内的复发率可达60%。 造成阴道炎复发率高的重要原因是现有阴道炎的疗效评价标准不适宜。,上世纪90年代初，国外已将阴道微生态评价列为阴道炎诊断的常规手段，被列为阴道炎诊疗方面的一次革命性进展。 对经常规治疗方案治疗后的各类阴道炎患者做“爱必维”检查并配合阴道分泌物常规检查，可了解阴道生态恢复情况，确定是否对患者做生态治疗，达到提高阴道炎的诊疗效率、降低阴道炎复发率的目的。,3、产后何时恢复性生活评价 分娩、消毒、冲洗、使用抗生素、激素等原因使阴道乳酸杆菌数量急剧减少，导致菌群失调，性生活可加重这种失调，易造成阴道感染。 北京大学廖秦平等教授研究发现：微生态不正常患病治愈后的复发率为 43.6%，而微生态正常者仅为 10.0%。 对产妇做爱必维检查并配合阴道分泌物常规检查，可了解阴道生态恢复情况，确定是否恢复性生活，避免造成产后阴道感染。,4、妊娠期无症状体征者 妊娠期阴道生态失调状态可引起不良妊娠结局。妊娠期感染可直接导致包括自然流产、早产、足月前胎膜早破、羊水感染、产后子宫内膜炎和剖宫产后切口感染和围产儿并发症。 在妊娠期无阴道炎的症状和体征者中，有36.7%已处于微生态失调状态。 定期对孕妇进行阴道微生态评价，可保证孕妇与胎儿的健康，提高生殖健康水平。,三、使用注意事项,2019/8/31,21,可编辑,注意把握四个环节 1）正确取样，部位、量、方法 2）样品处理（充分混匀、防止过度稀释） 3）显色时间、温度（推荐使用干浴器、48、13min） 4）结果判读,四、 样品采集和处理,样品采集和处理 1 、受检者的准备 取样品前24小时应禁止性交、盆浴、阴道灌洗及局部上药等，以免影响检查结果。经期样品会对结果判读有影响，所以不宜做该项检测。 2 、样品的采集 受检者取妇科检查常规体位，使用专用棉签于阴道后穹窿处旋转10-20秒，以清晰见到棉签上有分泌物附着为准。如果使用的棉签太短或棉球太小都不能保证取得适宜的样品，这些都会影响到检测结果。 应使用厂商配送的棉签，取样前棉签不得做任何处理，包括使用消毒剂及任何液体,如生理盐水等。不要取脓性、血性样品。 如不使用厂商配送的棉签，则必须保证棉签长度、棉球大小与厂商赠送的尽可能相同；应保证棉签是经过高温消毒的，不能用环氧乙烷消毒，后者影响结果。,3 、样品的处理 将带有样品的棉签放入厂商赠送的软塑料试管中，加入400l稀释液（或用稀释液滴瓶），垂直滴加15滴，反复挤压棉签，使分泌物溢出。样品应及时检测，不能及时检测的样品应保存在2-8，但应在8小时内完成检测。 脓性、血性样品如何判读结果？ 在反应孔中滴加两滴蒸溜水，轻轻晃动反应板， 用吸管吸去孔中的液体，观察反应垫的颜色。,有关仪器、设备的说明 1、 微量移液器（100l、1000l） 2、 应使用恒温干浴器。 使用干浴器则严格按如下要求操作： 使用的环境温度： 18-25 设定温度48 开机预热不少于10分钟 反应时间13分钟,五、 操作步骤,1,2,3,将试剂盒从2-8取出，平衡到室温，取出反应装置开始使用. 撕开铝箔包装，取出反应装置，轻轻揭掉反应孔上的铝箔条。,在反应装置的五个孔中每孔滴加一滴处理过的样品，约35l，以没过反应孔1/2为宜，之后在“唾液酸苷酶”反应孔中滴加一滴“显色液A”。,将反应装置放在37水浴箱或恒温干浴 器（48）中显10分钟后在“凝固酶”反孔加 滴加一滴“显色液B”，继续反应3分钟后判读 结果。,SOP操作：步骤,注： 开封后的反应装置，须避光放置，并在当天使用完毕。,六、检验结果的解释,检验结果的解释,1. 过氧化氢（反映装置第一个反应孔）：过氧化氢浓度2mol/L，显红色、紫色 或蓝紫色为阴性，过氧化氢浓度2mol/L，显蓝色为阳性。如显灰色或灰蓝色，则 为样品稀释过度，建议重新采样或判读为正常。 唾液酸苷酶（反应装置第二个反应孔）：不显色或黄色为阴性，显棕黄色为脓性 、血性样品以及脓稠分泌物所致，应判读为唾液酸苷酶阴性；显红、紫色或蓝色为阳 性，显蓝色表示唾液酸苷酶活性浓度很高。 白细胞酯酶（反应装置第三个反应孔）：不显色为阴性；显蓝色或绿色为阳性。参照标准比色板。“-”和“”表示白细胞酯酶阴性，“+”、“+”、 “ +”表示白细胞酯酶阳性。 -葡萄糖醛酸苷酶（反应装置第四个反应孔）：不显色为阴性，显蓝色或绿色为阳性。 凝固酶（反应装置第五个反应孔）：不显色或黄色为阴性，紫红色为阳性。 注意：反应结束后，应立即判读结果，时间在15-20分钟内。,SOP操作：结果判读,结果判读,临床常见检测结果类型及建议： SNa + H2O2阳性：，阴道微生态失衡、BV（厌氧菌感染） GADP或GUS阳性+白细胞酯酶(LE)阳性 + H2O2阳性：阴道微生态失衡，AV(需氧菌感染)。 全部指标异常：考虑混合性阴道炎. 单纯H2O2异常：阴道微生态失衡，存在阴道感染的高危因素，或阴道感染治疗后阴道菌群尚未恢复，建议使用微生态制剂治疗，并定期复查。如出现外阴瘙痒等临床症状需及时就诊。,七、产品技术参数,产品技术参数 1、重复性： a）批内重复性：90%； b）批间重复性：90%； 2、阴性参考品符合率90%； 3、阳性参考品符合率90%； 有质控品，是国内唯一获得批件的。,最低检出量 过氧化氢2mol/L、唾液酸苷酶7 U/L、白细胞酯酶9 U/L、-葡萄糖醛酸苷酶15U/L、凝固酶20U/L 检出符合率 阳性参考品符合率 过氧化氢2mol/L 符合率90% 唾液酸苷酶7 U/L 符合率90% 白细胞酯酶9 U/L 符合率90% -葡萄糖醛酸苷酶15U/L 符合率90% 凝固酶20U/L 符合率90% 阴性参考品符合率 过氧化氢2mol/L 符合率90% 唾液酸苷酶7 U/L 符合率90% 白细胞酯酶9 U/L 符合率90% -葡萄糖醛酸苷酶15U/L 符合率90% 凝固酶20U/L 符合率90%,阴道分泌物测定的质量控制,技术标准,第四部分,发明 专利,建立“需氧菌阴道炎/细菌性阴道病五项联合测定 试剂盒”的企业标准，编号为YZB/京0057-2