实验一微生物实验课介绍及要求.ppt

微生物学实验课介绍,任课教师 程立忠 王绍辉 张理珉 余泽芬,今天的主要内容,1、实验课的目的； 2、实验课的内容介绍； 3、实验课的具体安排和要求； 4、实验安全知识介绍 5、环境及人体表面微生物的检测,1、实验课的目的,掌握微生物实验的基本操作技术 并充分得到训练（熟练掌握最好）,2、实验课的内容介绍,实验课开设的意义 实验课所涉及的内容,实验课开设的意义,微生物学是生命科学中最基础的学科之一，实验技术的独特性和重要性。 促进了多个学科的建立和发展生物化学、分子生物学、生物工程学、免疫学、病毒学等等 广泛的应用基础理论研究、工业、农业、环境、医学、食品等。,实验内容,无菌操作技术； 培养基的制备和消毒灭菌技术； 微生物的分离培养纯化技术； 菌种的保藏技术 微生物制片染色技术； 微生物数量和大小测定技术； 噬菌体的分离纯化及效价的测定； 微生物生理生化反应； 乳酸发酵的应用酸牛奶的制作;,3、实验课的具体安排和要求,实验课学习要求 实验过程的要求 实验课安排 良好的实验习惯 实验报告的形式 成绩的评定及组成,实验课学习要求,认真对待，做好预习，加强自主 多发现问题，多和教师交流 注重原理，努力创新,实验过程的要求,实验过程注意安全 操作时要预防空气对流 接种时不要走动和讲话 认真做好环境卫生，做到“干干净净进来，干干净净出去” 进出实验室要洗手,实验课安排,分组两人一组，登记联系电话； 每组准备记号笔和打火机各一个； 下午实验课改在13：30上，上午的不变。,良好的实验习惯,不迟到，不缺席，有事提前请假；迟到5分钟以上以缺席计入实验习惯成绩； 爱护实验用具，注意不要损坏； 实验完成后认真清洗实验用具，并归位摆放整齐； 离开实验室要经教师检查同意后方可离开； 认真做好值日生工作，有人具体负责安排检查。,实验报告的形式,目的要求 实验原理 实验材料和器材 实验方法和步骤 实验结果 思考题及讨论,成绩的评定及组成,平时成绩（20%，安排于实验过程中） 实验习惯（10%） 期末考试（20%，笔试） 实验报告（50%） 可能组织就实验内容进行答辩，替代期末考试,微生物实验用到的仪器设备,显微镜（光学普通、相差、微分干涉差、暗视野；电子扫描、透射）；高压蒸汽灭菌锅（立式和卧式）；隔水式恒温培养箱；鼓风恒温干燥箱；恒温振荡培养箱（旋转式和往复式）；旋涡振荡器；恒温水浴锅；pH计；分光光度计（紫外、可见光、红外、原子吸收等）；离心机；电泳仪、PCR仪、发酵罐、酶标仪、冰箱；微波炉等。,实验用到器械,试管（test tube） 德汉氏小管（Durham tube） 小塑料离心管，又称Eppendorf管 玻璃吸管（glass pipette） 微量吸管（micropipette） ，又称微量加样枪 培养皿（petri dish） 三角烧瓶（erlenmeyer flask） 载玻片（slide）和盖玻片（coverslip） 滴瓶(dropper bottle) 接种工具接种环、接种针、接种钩、接种铲、接种刀、涂布器（玻璃或不锈钢制作）等。,教材用书,1沈萍，范秀容，李广武主编微生物学实验（第三版）北京：高等教育出版社，1999（第四版已在出版过程中）,主要参考书,1杜连祥，路福平主编微生物学实验技术M北京：中国轻工业出版社，2005 2周德庆微生物学实验教程（第2版）M北京：高等教育出版社，2006 3杨文博主编微生物学实验M北京：化学工业出版社，2004 4赵斌，何绍江主编微生物学实验M北京：科学出版社，2002 5东秀珠，蔡妙英主编常见细菌系统分类和鉴定方法M北京：科学出版社，2001,实验室安全！？,实验教学过程中出现的各类突发事故和事件主要有：,1、火灾； 2、触电； 3、跑（漏）水； 4、化学品伤害及中毒； 5、灼伤； 6、割（划）伤。,事故预防要求,实验过程严格按照操作规范进行； 对使用的化学药品试剂、仪器设备、实验器材等清楚其性质和使用注意事项； 不在实验室进餐、饮水； 实验室严禁明火取暖，实验用到的加热设备在人离开时，关闭加热； 清楚实验室或实验楼内配备的防护用具的使用方法和摆放位置（消防设施灭火器、消防用水、防毒面具，冲淋设施桌面冲眼器、紧急冲淋设备，通风柜，医药箱等）。,事故处理要求,先保护好自身的安全，再施救 不要慌张，冷静按预案处理 认真负责，不推缷责任 逐级上报，不隐瞒事故,学生衣服着火的对策,以灭火毡包裹该同学，并把其在地上滚动 其他同学立刻通知老师。,实验室的窗帘布着火的对策,取出灭火器，拔出安全针。 把喷咀对准火源。 按掣使灭火器喷出二氧化碳。 其他同学立刻通知老师。,酒精溅在长桌上并着火的对策,利用沙桶或湿抹布把燃烧的液体用沙盖着。 其他同学立刻通知老师。,打破了烧杯，被碎片割伤流血的对策,以清水冲洗伤口。 贴上干净的消毒胶布。 其他同学立刻通知老师。,化学药品溅进学生的眼睛内的对策,用桌面上冲眼器以大量清水冲洗眼睛。 其他同学立刻通知老师。,学生在倾倒酸时意外地接触到酸的对策,立刻以大量清水冲洗患处最少五分钟。 其他同学立刻通知老师。,实验物品常见警告标识符号,灭火器及其使用方法,实验一：实验室环境及人体表面微生物的检测,检查实验室空气中及各人手上的微生物（细菌为主），并加以统计、比较和描述（数量、菌落形态等）。 使学生认识到微生物无处不在，以便在以后的实验中重视无菌操作。 强调对微生物感性认识。,一、目的要求,因为微生物个体较小，肉眼难以看到，但其实际上它们广泛分布于室内外、水、空气和土壤中；环境微生物的检测及观察有利于建立起“微生物无所不在、无孔不入”的概念，形成自身良好的卫生习惯，认识到在微生物实验中无菌操作的重要性。,二、实验原理,平板培养基含有微生物生长所需的营养成分，当不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，12天内每一菌体细胞即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个肉眼可见的细胞群体（菌落）；每种微生物都有其特有的菌落形态，一般情况下一个菌落对应一个微生物活细胞，这样就可以统计不同微生物在某样品中的数量。,三、实验材料及器材,牛肉膏蛋白胨培养基平板 3个； 洗手液、酒精灯、记号笔、恒温培养箱等。,四、实验方法及步骤,1、实验室空气中微生物检查 2、手上微生物检测,取一无菌牛肉膏蛋白胨琼脂平板，打开皿盖（扣放，开始计时），使培养基暴露于空气中30分钟，盖上皿盖，在37下倒置培养2448小时，观察结果，统计微生物数量。,1、实验室空气中微生物检查,取一个牛肉膏蛋白胨琼脂平板，用记号笔在平板底部（外面）划线等分成2半，用手指在其中一半上摩擦几下（不能把培养基划破）；然后用肥皀洗手，用同一手指在另一半上摩擦几下，在37下倒置培养2448小时，观察结果，统计比较洗手前后的微生物数量及菌落种类。,2、手上微生物检测,附：菌落特征描写方法如下 大小 大、中、小、针尖状。可先将整个平板上的菌落粗略观察一下，再决定大、中、小的标准，或由教师指出一个大小范围。 颜色 黄色、金黄色、灰色、乳白色、红色、粉红色等。 干湿情况 干燥、湿润、粘稠 形态 圆形、不规则等 高度 扁平、隆起、凹下 透明程度 透明、半透明、不透明 边缘 整齐、不整齐,