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文档简介

第一章 无菌操作技术实践测评(时间:60分钟满分:100分)一、选择题(每小题2.5分,共50分)1.不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不正确的是()A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一解析:CO2是自养微生物的碳源,但由于CO2是无机物,因此不是该类微生物的能源物质。答案:B2.下列不属于MS基本培养基的主要组成成分的是()A.大量元素B.微量元素C.蔗糖D.植物激素解析:MS基本培养基是一种基础培养基,主要成分包括大量元素、微量元素和有机物。答案:D3.高温灭菌的原理是()A.每种微生物生长的最适温度是一定的B.微生物对高温环境不适应C.高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动D.高温降低了环境中氧的浓度解析:相对于动植物来说,微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态(如芽孢),所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性,以使其永远丧失生活能力。答案:C4.用人工培养基来培养圆褐固氮菌。当向无菌培养箱中充入氮气时,其固氮量和菌落大小比充入无菌空气时()A.多和大B.多和小C.少和大D.少和小解析:圆褐固氮菌为异养需氧型,当向无菌培养箱中充入氮气时,会使其有氧呼吸受到抑制,生命活动所需要的能量供应不足,生命活动减弱,分裂、生长减缓,因此其固氮量和菌落大小比充入无菌空气时少和小。答案:D5.美国研究人员通过对大肠杆菌进行基因改造,可以使它将植物纤维逐渐转化为生物燃料。这种细菌不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料,还能将广泛存在于植物纤维中的半纤维素分解合成为燃料物质。若要将这种大肠杆菌分离出来,应将它们接种在()A.不含氮源的培养基上B.含有蛋白胨的固体培养基上C.只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上D.不含营养要素的培养基上解析:微生物生长繁殖所需的营养物质分为碳源、氮源、水和无机盐。要将能分解半纤维素的大肠杆菌分离出来应选用选择培养基。因此可以添加基因改造后大肠杆菌能利用而其他大肠杆菌不能利用的碳源(半纤维素)来达到分离选择所需细菌的目的。答案:C6.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒,下列实验结束后的做法错误的是()A.对接种环进行灼烧处理B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉D.接种后双手必须经肥皂洗净,再用体积分数为75%的酒精棉球擦拭解析:带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉,不能通过简单的加热后就倒掉,这样达不到灭菌效果。答案:C7.下列关于植物组织培养中灭菌操作的叙述,错误的是()A.外植体可以用酒精消毒B.镊子等器械需用酒精灭菌C.操作者的手需用酒精消毒D.培养基需用高压蒸汽灭菌解析:植物组织培养需要严格的无菌操作,包括:培养基需要用高压蒸汽灭菌;操作者的手需用酒精消毒;外植体应浸泡在酒精中消毒;对镊子等器械应进行灼烧灭菌;同时整个操作过程在酒精灯火焰旁或超净工作台上进行。答案:B8.常常作为人们鉴别菌种的重要依据的是()A.细菌群体的结构特征B.单个细菌的结构特征C.鞭毛、荚膜的有无D.拟核、细胞壁的特征解析:鉴别菌种的重要依据是菌落稳定的结构特征,包括菌落的形态、大小,隆起程度和颜色等方面。答案:A9.耐冷菌是生活在低温环境下的一类微生物,在05 可生长繁殖,最高生长温度一般在30 左右。关于耐冷菌下列选项中不正确的是()A.耐冷菌参与代谢的酶在低温下仍具有较高的催化活性B.不同取样地点相比较,北方寒冷地区水土中较易分离出耐冷菌C.探究耐冷菌生活的最适温度,自变量应为温度,无关变量应相同且适宜D.分离纯化耐冷菌的过程中,使用过的培养基及培养物必须经过消毒处理后才能丢弃解析:使用过的培养基必须经过灭菌处理后才能丢弃。答案:D10.植物组织培养接种时应注意的事项全部正确的是()接种室要消毒无菌操作接种时可以谈话外植体用自来水冲洗接种时要防止交叉污染接种完立刻盖好瓶口A.B.C.D.解析:整个接种过程必须在严格的无菌条件下进行,不能谈话,防止造成污染。接种的外植体应用无菌水冲洗。答案:D11.下列有关微生物培养与应用的说法正确的是()A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D.分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源和碳源解析:天然培养基是成分不明确的培养基,并不是不需加工配制的培养基;实验者的双手需进行消毒处理;分离分解尿素的细菌时,尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。答案:C12.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,哪一项不是必须的?()A.具有完整细胞核的细胞B.使培养对象处于离体状态C.导入外源性目的基因D.一定的营养和激素答案:C13.下列关于植物组织培养过程中的脱分化的叙述,正确的是()A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞的过程B.体内分化的细胞在形态、结构和功能上发生改变的过程C.高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程D.愈伤组织分裂产生大量相同细胞的过程解析:脱分化是指高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。答案:C14.下列属于菌落特征的是()菌落的形状菌落的大小菌落的多少隆起程度颜色有无荚膜A.B.C.D.解析:不同种类的细菌所形成的菌落大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征,所以,每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的,故细菌的个体特征(如有无荚膜)不能作为菌种鉴定的依据。答案:B15.在植物组织培养中,切取胡萝卜的外植体时一般选择()A.具有木质部的部分B.具有韧皮部的部分C.具有形成层的部分D.具有髓的部分答案:C16.某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了四个实验,实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果,据图不能得出的初步结论是()A.污染主要不是培养基灭菌时间短造成的B.污染不可能来源于组织培养所用的离体组织C.调节培养基pH不能解决污染问题D.调节培养温度不能解决污染问题解析:本题主要考查图文转换能力。图解所示的信息是随培养基灭菌时间、培养基pH和培养温度的增加,污染率在90%上下波动,说明污染不是这三方面的原因;而图解中随离体组织消毒时间的增加污染率急剧下降,因而,该曲线表明组织培养所用的离体组织是污染的主要因素。答案:B17.下列关于植物组织培养的表述,错误的是()A.外植体可以来自于植物的任何细胞B.培养应在无菌条件下进行C.以花粉作为外植体可得到单倍体植株D.不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同解析:在植物组织培养中,外植体必须是具有活性的细胞,通常是分生能力强的细胞;培养需在无菌条件下进行;花粉为植物的配子,作为外植体可培养得到单倍体;在形成根和芽的过程中,要调节细胞分裂素与生长素的比例。答案:A18.植物组织培养依据的原理、培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是()细胞的全能性离体植物器官、组织或细胞根、芽生长素和细胞分裂素生长素和乙烯愈伤组织再分化脱分化植物体A.、B.、C.、D.、解析:植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性;培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,再分化形成根、芽等进而形成新的植物体。诱导的植物激素是生长素和细胞分裂素。答案:B19.配制植物组织培养的培养基时下列各项可不必考虑的是()A.大量元素要充足B.微量元素不可少C.不能被杂菌污染D.要有一定光照解析:培养基中应含大量元素、微量元素以供植物细胞吸收利用;配制培养基时还要避免杂菌污染,否则,杂菌会与外植体争夺营养,也会造成外植体被侵染以致腐烂。配制培养基的过程不必考虑光照,但对外植体培养的过程要考虑光照。答案:D20.关于影响植物组织培养的因素,说法正确的是()A.不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料培养的难易程度相同B.用于植物组织培养的培养基不需添加植物激素C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的D.pH、温度、光照条件等对植物组织培养特别重要答案:D二、非选择题(共50分)21.(2014四川高考理综)(10分)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。图甲图乙(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是。(2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和。(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有。(4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是,该实验设计是否合理?为什么?。解析:(1)微生物生长繁殖所需营养物质有碳源、氮源、水和无机盐四类。该实验是要分离能降解苯磺隆的菌株,所以以苯磺隆作为唯一碳源。(2)植物组织培养所用的植物激素是生长素和细胞分裂素。(3)进行菌株纯化时,常用的划线工具是接种环。用接种环进行第二区域划线前需灼烧灭菌,灭菌后的接种环温度过高,若不经冷却立即进行划线操作,会使第一条线上无活菌存在。另外,若划线未从第一区域末端开始,也会导致题述的划线无菌落现象。(4)据图可知,该实验的假设为该微生物产生的分解苯磺隆的物质是蛋白质,该实验的设计不合理,因为缺少空白对照实验。答案:(1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)细胞分裂素(3)接种环接种环灼烧后未冷却;划线未从第一区域末端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理,缺少空白对照22.(10分)临床试用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。完成下列问题。(1)为了从样本中获取致病菌菌落,可用法或法将样本借种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用法接种于固体培养基表面,在37 培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A敏感;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的。(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选择抗生素。解析:(1)分离菌落常用涂布平板法或平板划线法。(2)应用涂布平板法接种于固体培养基表面,适宜温度培养。(3)含抗生素的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对该抗生素有敏感性,周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。(4)实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。答案:(1)平板划线涂布平板(2)涂布平板(3)不敏感该致病菌对C的敏感性比对A弱耐药菌(4)A23.(9分).下图表示植物组织培养过程,请据此回答下列问题。(1)表示,它能培养成为的根本原因是。(2)表示的是。(3)若是花药,则是幼苗,继续对其使用处理可获得可育植株。(4)若是胡萝卜根尖细胞,则培养成的的叶片的颜色是色。.利用植物组织培养的方法可快速、大量繁殖植物,在培养过程中,取该植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中,花芽的生长状况如下表所示。A组花芽B组花芽C组花芽D组花芽E组花芽吲哚乙酸(mgL-1)0330.030细胞分裂素(mgL-1)00.20.0021.00.2续表A组花芽B组花芽C组花芽D组花芽E组花芽花芽生长状况组织切块形成愈伤组织愈伤组织分化出根愈伤组织分化出嫩枝稍生长(1)在此过程中能实现脱分化的花芽是组。从实验结果可以看出,能诱导新的花芽形成的条件是。(2)上述实验结果说明,在植物组织培养过程中,诱导芽和根形成的关键是。在生产实践中,欲快速、大量获得此植物的花芽,可选用组的培养基进行扩大生产。解析:.图示为植物组织培养过程,为外植体,为愈伤组织,为胚状结构,为幼苗。若是花药,则是单倍体幼苗,继续对其使用秋水仙素处理可获得可育植株。无论用胡萝卜的哪一部分体细胞培育得到的幼苗,其叶片都是绿色的。.本题用对比的实验手段演示了一个事实:脱分化、再分化过程与植物激素生长素和细胞分裂素有关,且生长素用量与细胞分裂素用量直接影响培养过程,当生长素与细胞分裂素用量比值高时,有利于根的分化,抑制芽的形成;当生长素与细胞分裂素用量比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成;当用量相当时,有利于促进愈伤组织的形成。答案:.(1)外植体(离体的器官、离体的组织、离体的细胞)植物细胞的全能性(2)愈伤组织(3)单倍体秋水仙素(4)绿.(1)B生长素用量与细胞分裂素用量的比值低(2)培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比)D24.(9分)某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题。(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选,这种培养基属于培养基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源来自培养基中的,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是。(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量。(4)转为固体培养时,常采用的方法接种,获得单菌落后继

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