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文档简介
液相色谱的定性及定量技术,Waters LC School 培训教材,色谱峰定性,鉴别每个色谱峰 通过比较保留值(通常是保留时间)的方法,找到各色谱峰所对应的组份 大多数情况下用比较保留时间来定性 即所谓: 保留时间相同,可能是同样的组份 保留时间不同,肯定不是同样的组份,用保留时间定性,用“标样”的保留值定出被测组份的位置,进一步的确认,标准加入 同时用其他方法 其他色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱) 其他检测器 PDA,光谱图比较、谱库检索 MS,质谱图解析、谱库检索 其他仪器方法,标准加入法举例,废水样品中五氯苯(PCP)的分析,梯度曲线,梯度曲线,PCP,4 ppm,3 ppm,2 ppm,1 ppm,峰一致性的确认,确认色谱峰的纯度 保证每个色谱峰下只有一个被测的组份 检查是否有共流出的物质(杂质)干扰 色谱峰纯度确认的方法 用光电二极管矩阵检测器比较光谱图 峰纯度鉴定,双波长Ratio 996的纯度角理论,用二极管矩阵检测器比较光谱图,苯的色谱及光谱图(Index),996的纯度角理论,996的纯度角理论可快速得到纯度结果,定量分析的具体内容,确定样品的类型,主要成分/痕量成分 使分析条件的分离度(R)大于:1.5 色谱峰的定性,峰一致性测定 检测限及定量限:确定灵敏度及线性范围 用标样建立标准曲线 检查方法的准确度及精确度 用标样定期检查方法,痕量分析,如信/噪比不够,定量的精确度会受影响,因此要: 分析前浓缩样品 选择高灵敏度检测器 用衍生法 使色谱体系最优化 使用短的微径柱(减少样品的稀释) 使用高效色谱柱 使k值尽可能小 增加进样体积和浓度 使用低流速(N增加) 采用梯度淋洗,液相色谱定量的精度,测量的精度,定量的准确度,误差 E = O - T O观测到的值 T真值,液相色谱定量精度的计算,测量精度的计算,准确度的衡量,色谱方法是相对定量方法,如不考虑损失及杂质干扰等的因素,其结果同“标样”的准确程度关系密切 一般的衡量方法是做回收率实验或不同方法之间的比较:相关系数 相关系数: 其中,X及Y分别代表不同方法的实验值及平均值,准确度的影响因素,标样的可靠性及其配制的准确度 色谱方法的可靠性 色谱泵的精确度(GPC的影响更大) 进样器的准确度,进样技术,流速与
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